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DOI: 10.3791/66657-v
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This study utilizes fission yeast as a heterologous host to examine the polymerization of bacterial cytoskeletal proteins FtsZ and MreB, fused with GFP for visualization. It aims to identify compounds influencing their polymerization using fluorescence microscopy.
ここでは、分裂酵母を異種宿主として利用し、FtsZやMreBなどの細菌細胞骨格タンパク質をGFPとの翻訳融合タンパク質として発現させ、それらの重合を可視化します。また、重合に影響を与える化合物は、蛍光顕微鏡を用いたイメージングによって同定されます。
私たちの研究室では、細胞骨格タンパク質がどのように動的な構造を組み立てて、細菌のDNA分配や細胞分裂などの機能を調節しているかを理解することに興味を持っています。また、これらの細胞骨格タンパク質を標的とする化合物を発見して、新しい抗生物質を開発することにも興味を持っています。私たちのプロトコルは、細菌の細胞骨格タンパク質が真核酵母の分子的に混雑した環境で重合する細胞ベースのアッセイです。
このアプローチにより、同時に、細菌の細胞骨格タンパク質、重合に直接影響し、潜在的に毒性のある分子を特定できます。この分裂酵母プラットフォームを用いて、ヘリコバクター・ピロリ菌や緑膿菌などの病原菌のFtsZを特異的に標的とする大環状化合物のライブラリーをスクリーニングする予定です。また、プラスミド分離に関与するClostridium perfringens由来のアクチン様タンパク質を標的とするスクリーニングも拡大する予定です。
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