Name: げっ歯類モデルにおける中大脳動脈閉塞前の脳血流モニタリングのためのレーザードップラープローブの眼窩周囲配置 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-11-22T13:10:00.000+00:00
Duration: 3 min 26 s
Description: 学ぶレーザードップラーフローメトリーを用いたげっ歯類の中大脳動脈閉塞における脳血流モニタリング法。微小侵襲で迅速な眼窩周囲プローブ配置により、虚血性脳卒中のミクログリア応答と再現性の課題を解明します。

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<meta charset="utf8"></head><body>げっ歯類のMCAO誘発性虚血性脳卒中のための眼窩周囲レーザードップラー流量計

<ol><li>Koizumi, J., Yoshida, Y., Nakazawa, T., Ooneda, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+studies+of+ischemic+brain+edema.+I.+A+new+experimental+model+of+cerebral+embolism+in+rats+in+which+recirculation+can+be+introduced+in+the+ischemic+area%5BTitle%5D)+AND+%22Japanese+J+Stroke%22%5BJournal%5D)">Experimental studies of ischemic brain edema. I. A new experimental model of cerebral embolism in rats in which recirculation can be introduced in the ischemic area.</a> Japanese J Stroke. 20 (1), 84-91 (1986).</li>
<li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke. 20 (1), 84(1989).</li>
<li>Hata, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+reproducible+model+of+middle+cerebral+artery+occlusion+in+mice%3A+hemodynamic%2C+biochemical%2C+and+magnetic+resonance+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">A reproducible model of middle cerebral artery occlusion in mice: hemodynamic, biochemical, and magnetic resonance imaging.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 18 (4), 367-375 (1998).</li>
<li>Dirnagl, U., Kaplan, B., Jacewicz, M., Pulsinelli, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Continuous+measurement+of+cerebral+cortical+blood+flow+by+laser-Doppler+flowmetry+in+a+rat+stroke+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Continuous measurement of cerebral cortical blood flow by laser-Doppler flowmetry in a rat stroke model.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 9 (5), 589-596 (1989).</li>
<li>Lyden, P. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+stroke+preclinical+assessment+network%3A+Rationale%2C+design%2C+feasibility%2C+and+stage+1+results%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">The stroke preclinical assessment network: Rationale, design, feasibility, and stage 1 results.</a> Stroke. 53 (5), 1802-1812 (2022).</li>
<li>Ingberg, E., Dock, H., Theodorsson, E., Theodorsson, A., Ström, J. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+laser+Doppler+flowmetry+and+occlusion+time+on+outcome+variability+and+mortality+in+rat+middle+cerebral+artery+occlusion%3A+inconclusive+results%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Effect of laser Doppler flowmetry and occlusion time on outcome variability and mortality in rat middle cerebral artery occlusion: inconclusive results.</a> BMC Neurosci. 19 (1), 24(2018).</li>
<li>Spratt, N. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modification+of+the+method+of+thread+manufacture+improves+stroke+induction+rate+and+reduces+mortality+after+thread-occlusion+of+the+middle+cerebral+artery+in+young+or+aged+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Modification of the method of thread manufacture improves stroke induction rate and reduces mortality after thread-occlusion of the middle cerebral artery in young or aged rats.</a> J Neurosci Methods. 155 (2), 285-290 (2006).</li>
<li>Watcharotayangul, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Post-ischemic+vascular+adhesion+protein-1+inhibition+provides+neuroprotection+in+a+rat+temporary+middle+cerebral+artery+occlusion+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurochem%22%5BJournal%5D)">Post-ischemic vascular adhesion protein-1 inhibition provides neuroprotection in a rat temporary middle cerebral artery occlusion model.</a> J Neurochem. 123 Suppl 2 (Suppl 2), 116-124 (2012).</li>
<li>Beretta, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimized+system+for+cerebral+perfusion+monitoring+in+the+rat+stroke+model+of+intraluminal+middle+cerebral+artery+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Optimized system for cerebral perfusion monitoring in the rat stroke model of intraluminal middle cerebral artery occlusion.</a> J Vis Exp. (72), e50214(2013).</li>
<li>Ritter, L. S., Stempel, K. M., Coull, B. M., McDonagh, P. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leukocyte-platelet+aggregates+in+rat+peripheral+blood+after+ischemic+stroke+and+reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Res+Nursing%22%5BJournal%5D)">Leukocyte-platelet aggregates in rat peripheral blood after ischemic stroke and reperfusion.</a> Biol Res Nursing. 6 (4), 281(2005).</li>
<li>National Research Council. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Guide+for+the+Care+and+Use+of+Laboratory+Animals.%22">Guide for the Care and Use of Laboratory Animals.</a>. , 8th ed., The National Academies Press. Washington, DC, USA. (2011).</li>
<li>Ingberg, E., Dock, H., Theodorsson, E., Theodorsson, A., Ström, J. O. Method parameters' impact on mortality and variability in mouse stroke experiments: a meta-analysis. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aIngberg%2C+E+%22Sci+Rep%22">Sci Rep</a>. 6, (2016).</li>
<li>Morais, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Embracing+heterogeneity+in+the+multicenter+stroke+preclinical+assessment+network+%28SPAN%29+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Embracing heterogeneity in the multicenter stroke preclinical assessment network (SPAN) trial.</a> Stroke. 54 (2), 620-631 (2023).</li>
<li>Ström, J. O., Ingberg, E., Theodorsson, A., Theodorsson, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+parameters%27+impact+on+mortality+and+variability+in+rat+stroke+experiments%3A+a+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Method parameters' impact on mortality and variability in rat stroke experiments: a meta-analysis.</a> BMC Neurosci. 14, 41(2013).</li>
</ol>

<a href="https://app.jove.com/t/6629">This corrects</a> the article <a href="https://dx.doi.org/10.3791/66839">10.3791/66839</a>

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/66839">Periorbital Placement of a Laser Doppler Probe for Cerebral Blood Flow Monitoring Prior to Middle Cerebral Artery Occlusion in Rodent Models</a>. The Authors&#160;section was&#160;updated.

Erratum: Periorbital Placement of a Laser Doppler Probe for Cerebral Blood Flow Monitoring Prior to Middle Cerebral Artery Occlusion in Rodent Models

<table><tbody><tr><td>湾曲した春はさみ</td><td>Castroviejo</td><td>1501710</td><td></td></tr><tr><td>鉗子#5</td>ファイン<td>サイエンスツール</td><td>11250-20</td><td></td></tr><tr><td>鉗子#5/45</td>ファイン<td>サイエンスツール</td><td>1151-35Forcepts</td><td></td></tr><tr><td>焼灼ツール</td><td>Conmed</td><td>M18019-01</td><td></td></tr><tr><td>ラボラトリーテープ</td><td>フィッシャーブランドラベリングテープ</td><td>15-950</td><td></td></tr><tr><td>レーザードップラーモニター</td><td>ムーア・インスツルメンツ&nbsp;</td><td>MOORVMS-LDF</td><td></td></tr><tr><td>LDF ソフトウェア</td><td>Perisoft for Windows or moorSOFT</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>マウスクリッパー</td><td>フィリップス ノレルコ</td><td>MG7910</td><td></td></tr><tr><td>ペリフラックスシステム 4000、プローブ 407</td><td>危険な</td><td>機器はもう利用できません</td><td></td></tr><tr><td>ラップ</td> う<td>れしい</td><td>プレス n シール</td><td></td></tr><tr><td>ラットクリッパー</td><td>オスター</td><td>A5 または類似のもの</td><td></td></tr><tr><td>小さなげっ歯類の麻酔</td><td>JD医療</td><td>カスタムオーダー</td><td></td></tr><tr><td>の小さなはさみ</td><td>エクセルタ</td><td>362はさみまたはプローブ</td>Physitemp TCAT-2ACコントローラー付き同様の<td></td></tr><tr><td>温度モニターシステム</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

げっ歯類モデルにおける中大脳動脈閉塞前の脳血流モニタリングのためのレーザードップラープローブの眼窩周囲配置

Periorbital Placement of a Laser Doppler Probe for Cerebral Blood Flow Monitoring Prior to Middle Cerebral Artery Occlusion in Rodent Models

MCA領域におけるレーザードップラープローブの配置を 図1に視覚的に示し、血管系のピクトグラフを提供し、矢状および背側の観点からの視覚的なガイドとして機能します。 図2 は、レーザードップラープローブをマウスに配置するための重要な手順と結果をまとめたものです。 図2A は、麻酔をかけ、準備したマウスの画像を示しており、その後のレーザードップラープローブの配置に必要な垂直切開の部位に破線のマーキングが付いています。頭蓋骨への眼窩周囲窓を 図2Bに示します。
図3は、ラットのレーザードップラープローブの配置をまとめたものです。その後のレーザードップラープローブの配置に必要な垂直切開の部位に破線のマーキングが付いた麻酔をかけ、準備したラットの画像を 図3Aに示します。眼窩周囲窓はマウスよりも深いため、見ることができません。この場合、ステップ2.3で述べたように、頭蓋骨を感じることができます。仰臥位ラットの眼窩周囲領域に配置されたレーザードップラープローブを 図3Bに示します。
マウスMCAO手順中の典型的なLDFトレースを 図4Aに示します。これは、頸動脈が結ばれているとき、およびフィラメントがMCAの口に進められたときに、相対脳血流(CBF)の明確かつ即時の低下によって証明されるように、虚血の成功した誘発を示しています。再灌流の開始は、トレーシングの終了時に示され、頸動脈が解かれたとき、およびフィラメントがMCAから引き抜かれたときに、相対的なCBFが明確かつ即時に増加することによって証明されます。ラットMCAO手術中の虚血の典型的なLDF測定値を 図4Bに示し、虚血の誘導が成功し、その後、再灌流中のLDF測定のためのプローブの除去と再配置が行われたことを示しています。ラットの手術では、虚血時間が60分を超える場合があり、動物は虚血期間中に回復する可能性があり、再 ?? 流のために再麻酔する必要があります。.この場合、プローブは眼窩周囲ウィンドウに再配置され、LDFトレースが続行されます。虚血は、頸動脈が結ばれ、フィラメントがMCA口に進んだときに、相対的なCBFが明確かつ即時に低下することによってトレースで証明されます。再灌流は、2 回目の LDF トレースで、相対的な CBF の明確かつ即時の増加によって証明され、その後、頸動脈が解かれ、再びフィラメントが MCA の口から引き抜かれます。眼窩周囲ドップラーはMCAの遠位枝上に配置されているため、 図4に示すように、MCAO手順中の血流の減少によって証明されるように、CBFの減少が観察されるMCAの血液分布の範囲内です。
図5に、失敗したMCAO手術を例示するLDFトレースを示します。図5Aは、頸動脈閉塞が成功し、後に緩んだフィラメント留置が失敗し、相対的なCBFがゆっくりと低下したラット手術からのLDFトレースをまとめたものです。このLDFパターンは、通常、剖検で確認できる穿孔MCAに関連しています。マウスのMCAO手術による別のトレース(図5B)は、MCA口でのフィラメントの配置を検出できない原因となった可能性が高い、決定的でない頸動脈閉塞を明らかにしています。MCAの穿孔が疑われたのは、フィラメントがわずかに引き抜かれたときに、相対的なCBFの回復が遅かったためです。これらの例は、成功したMCAO手術と失敗したMCAO手術の特定におけるLDFトレーシングの重要な役割を強調し、信頼性の高い実験結果のための綿密な外科的処置と対策の重要性を強調しています。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66839/66839fig01.jpg"> 図1:MCAに対するレーザードップラープローブのおおよその配置のピクトグラフ。 レーザードップラープローブの配置を(A)矢状図と(B)背側から見た模式図。Biorender.com で作成。KT26JWLYF6。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66839/66839fig01large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66839/66839fig02.jpg"> 図2:レーザードップラープローブをマウスに留置するための手術手順の図(A)マウスを仰臥位にしてレーザードップラープローブを留置するために必要な垂直切開の位置の画像。(B)マウスの鉗子および/またはハサミによって調製された眼窩周囲窓および頭蓋骨の画像。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66839/66839fig02large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66839/66839fig03.jpg"> 図3:ラットにレーザードップラープローブを留置するための手術手順の図。 (A)ラットを仰臥位にしてレーザードップラープローブを留置するために必要な垂直切開の位置の画像。(B)仰臥位ラットの眼窩周囲領域におけるレーザードップラープローブの配置。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66839/66839fig03large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66839/66839fig04.jpg"> 図4:マウスおよびラットにおけるMCAO処置の成功を確認したLDFトレーシングの例(A)マウスMCAO処置中のMCA領域のLDF読み取り。このトレースは、1 の確認を示しています。ネクタイによる頸動脈閉塞;2. MCAのフィラメントの配置;3.連続虚血の60分後のフィラメント除去;そして4。頸動脈がほどかれたときの再灌流。要素 a. と b. は、読み取り中に頸動脈をほどいて再度結んだときにドップラー トレースがどのように見えるかを示しています。この手法は、プローブの配置を確認するために使用できます。(B)ラットMCAO手順中のMCA領域のLDF読み取り。マウスと同様に、このトレースは 1 の確認を示しています。ネクタイと2による頸動脈閉塞。MCAでのフィラメントの配置。ラットMCAOの手順では、ドップラープローブがしばしば取り外され、動物は完全な虚血時間を目を覚まして動いています。再灌流のために、LDFは再灌流の前に再確立されます:3.フィラメントの除去を確認し、4.頸動脈が完全な再灌流に解かれていることを確認します。マウスとラットの両方のMCAO手順では、プローブの配置が成功した場合に、正しいフィラメントの配置を視覚化し、トレースがLDFの2つの明確で突然の減少(虚血の場合)を示し、続いてLDFの2つの明確で突然の増加(再灌流)を示す場合に示されます。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66839/66839fig04large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66839/66839fig05.jpg"> 図5:マウスとラットにおけるMCAO処置の失敗を示すレーザードップラーフローメトリートレースの例(A)ラットにおけるフィラメントの配置が決定的でないことを示すLDFトレースの例。頸動脈が結ばれ(1.)、緩み(2.)、再び結ばれた(3.)一方で、フィラメントがMCA OstiaにあったときのLDFの突然の低下ではなく、不明瞭でゆっくりとした低下が見られます。このトレースは、穿孔されたMCAを示している可能性があり、動物は再灌流の最初の24時間生き残れない可能性があります。フィラメントの穿孔は剖検で確認することができます。(B)マウスにおけるフィラメントの配置が決定的でないことを示すLDFトレースの例。このトレースでは、頸動脈の結びつきの証拠は決定的ではなく(1.)、続いてMCAオスティアでのフィラメントの配置に伴うLDFの不明瞭な低下が続きます(2.)。また、フィラメントをわずかに引き抜くと、相対的な脳血流の増加が緩慢になりました(3.)。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66839/66839fig05large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>

Middle cerebral artery occlusion (MCAO) is the gold-standard method for preclinical modeling of ischemic stroke in rodents. However, successful occlusion ...

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