Name: α-Synuclein凝集体の鼻腔内投与技術 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-11-08T13:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 49 s
Description: 学ぶα-Synuclein凝集体の鼻腔内投与法。マウスモデルを用いて嗅球への伝播を評価し、パーキンソン病の病態進行メカニズム解明に貢献する非侵襲的アプローチを示す。

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<meta charset="utf8"></head><body>α-シヌクレインの伝播:パーキンソン病における鼻腔内投与

<ol><li>Tysnes, O. B., Storstein, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neural+Transm+%28Vienna%29%22%5BJournal%5D)">Epidemiology of Parkinson's disease.</a> J Neural Transm (Vienna). 124 (8), 901-905 (2017).</li>
<li>Goedert, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alpha-synuclein+and+neurodegenerative+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Alpha-synuclein and neurodegenerative diseases.</a> Nature Rev Neurosci. 2, 492-501 (2001).</li>
<li>Conway, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acceleration+of+oligomerization%2C+not+fibrillization%2C+is+a+shared+property+of+both+alpha-synuclein+mutations+linked+to+early-onset+Parkinson%27s+disease%3A+implications+for+pathogenesis+and+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Acceleration of oligomerization, not fibrillization, is a shared property of both alpha-synuclein mutations linked to early-onset Parkinson's disease: implications for pathogenesis and therapy.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 97 (2), 571-576 (2000).</li>
<li>Braak, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Staging+of+brain+pathology+related+to+sporadic+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Aging%22%5BJournal%5D)">Staging of brain pathology related to sporadic Parkinson's disease.</a> Neurobiol Aging. 24 (2), 197-211 (2003).</li>
<li>Braak, H., Rüb, U., Gai, W. P., Del Tredici, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Idiopathic+Parkinson%27s+disease%3A+possible+routes+by+which+vulnerable+neuronal+types+may+be+subject+to+neuroinvasion+by+an+unknown+pathogen%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neural+Transm+%28Vienna%29%22%5BJournal%5D)">Idiopathic Parkinson's disease: possible routes by which vulnerable neuronal types may be subject to neuroinvasion by an unknown pathogen.</a> J Neural Transm (Vienna). 110 (5), 517-536 (2003).</li>
<li>Kordower, J. H., Chu, Y., Hauser, R. A., Freeman, T., Olanow, C. W. Lewy body-like pathology in long-term embryonic nigral transplants in Parkinson's disease. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKordower%2C+JH+%22Nat+Med%22">Nat Med</a>. 14 (5), 504-506 (2008).</li>
<li>Li, J. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lewy+bodies+in+grafted+neurons+in+subjects+with+Parkinson%27s+disease+suggest+host-to-graft+disease+propagation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Lewy bodies in grafted neurons in subjects with Parkinson's disease suggest host-to-graft disease propagation.</a> Nat Med. 14 (5), 501-503 (2008).</li>
<li>Luk, K. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathological+%CE%B1-synuclein+transmission+initiates+Parkinson-like+neurodegeneration+in+nontransgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Pathological α-synuclein transmission initiates Parkinson-like neurodegeneration in nontransgenic mice.</a> Science. 338, 949-953 (2012).</li>
<li>Desplats, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inclusion+formation+and+neuronal+cell+death+through+neuron-to-neuron+transmission+of+alpha-synuclein%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Inclusion formation and neuronal cell death through neuron-to-neuron transmission of alpha-synuclein.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 106 (31), 13010-13015 (2009).</li>
<li>Sawamura, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lewy+body+disease+primate+model+with+%CE%B1-Synuclein+propagation+from+the+olfactory+bulb%5BTitle%5D)+AND+%22Mov+Disord%22%5BJournal%5D)">Lewy body disease primate model with α-Synuclein propagation from the olfactory bulb.</a> Mov Disord. 37 (10), 2033-2044 (2022).</li>
<li>Uemura, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inoculation+of+%CE%B1-synuclein+preformed+fibrils+into+the+mouse+gastrointestinal+tract+induces+Lewy+body-like+aggregates+in+the+brainstem+via+the+vagus+nerve%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Neurodegener%22%5BJournal%5D)">Inoculation of α-synuclein preformed fibrils into the mouse gastrointestinal tract induces Lewy body-like aggregates in the brainstem via the vagus nerve.</a> Mol Neurodegener. 13 (1), 21(2018).</li>
<li>Rey, N. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Widespread+transneuronal+propagation+of+alpha-synucleinopathy+triggered+in+olfactory+bulb+mimics+prodromal+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Widespread transneuronal propagation of alpha-synucleinopathy triggered in olfactory bulb mimics prodromal Parkinson's disease.</a> J Exp Med. 213 (9), 1759-1778 (2016).</li>
<li>Rey, N. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spread+of+aggregates+after+olfactory+bulb+injection+of+%CE%B1-synuclein+fibrils+is+associated+with+early+neuronal+loss+and+is+reduced+long+term%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathol%22%5BJournal%5D)">Spread of aggregates after olfactory bulb injection of α-synuclein fibrils is associated with early neuronal loss and is reduced long term.</a> Acta Neuropathol. 135 (1), 65-83 (2018).</li>
<li>Uemura, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%CE%B1-Synuclein+spread+from+olfactory+bulb+causes+hyposmia%2C+anxiety%2C+and+memory+loss+in+BAC-SNCA+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Mov+Disord%22%5BJournal%5D)">α-Synuclein spread from olfactory bulb causes hyposmia, anxiety, and memory loss in BAC-SNCA mice.</a> Mov Disord. 36 (9), 2036-2047 (2021).</li>
<li>Saito, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lewy+body+pathology+involves+the+olfactory+cells+in+Parkinson%27s+disease+and+related+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Mov+Disord%22%5BJournal%5D)">Lewy body pathology involves the olfactory cells in Parkinson's disease and related disorders.</a> Mov Disord. 31 (1), 135-138 (2016).</li>
<li>De Luca, C. M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+RT-QuIC+seeding+activity+for+%CE%B1-synuclein+in+olfactory+mucosa+samples+of+patients+with+Parkinson%27s+disease+and+multiple+system+atrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Transl+Neurodegener%22%5BJournal%5D)">Efficient RT-QuIC seeding activity for α-synuclein in olfactory mucosa samples of patients with Parkinson's disease and multiple system atrophy.</a> Transl Neurodegener. 8, 24(2019).</li>
<li>Stefani, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alpha-synuclein+seeds+in+olfactory+mucosa+of+patients+with+isolated+REM+sleep+behaviour+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%22%5BJournal%5D)">Alpha-synuclein seeds in olfactory mucosa of patients with isolated REM sleep behaviour disorder.</a> Brain. 144 (4), 1118-1126 (2021).</li>
<li>Ucciferri, C. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scoring+central+nervous+system+inflammation%2C+demyelination%2C+and+axon+injury+in+experimental+autoimmune+encephalomyelitis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Scoring central nervous system inflammation, demyelination, and axon injury in experimental autoimmune encephalomyelitis.</a> J Vis Exp. (204), e65738(2024).</li>
<li>Masuda-Suzukake, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prion-like+spreading+of+pathological+%CE%B1-synuclein+in+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%22%5BJournal%5D)">Prion-like spreading of pathological α-synuclein in brain.</a> Brain. 136 (Pt 4), 1128-1138 (2013).</li>
<li>Sawamura, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-dose+intranasal+administration+of+%CE%B1-syn+PFFs+induce+lewy+neurite-like+pathology+in+olfactory+bulbs%5BTitle%5D)+AND+%22Parkinsonism+Relat+Disord%22%5BJournal%5D)">Single-dose intranasal administration of α-syn PFFs induce lewy neurite-like pathology in olfactory bulbs.</a> Parkinsonism Relat Disord. 112, 105440(2023).</li>
<li>Guo, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intranasal+administration+of+%CE%B1-synuclein+preformed+fibrils+triggers+microglial+iron+deposition+in+the+substantia+nigra+of+Macaca+fascicularis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Dis%22%5BJournal%5D)">Intranasal administration of α-synuclein preformed fibrils triggers microglial iron deposition in the substantia nigra of Macaca fascicularis.</a> Cell Death Dis. 12 (1), 81(2021).</li>
<li>Macdonald, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assembly+of+%CE%B1-synuclein+and+neurodegeneration+in+the+central+nervous+system+of+heterozygous+M83+mice+following+the+peripheral+administration+of+%CE%B1-synuclein+seeds%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathol+Commun%22%5BJournal%5D)">Assembly of α-synuclein and neurodegeneration in the central nervous system of heterozygous M83 mice following the peripheral administration of α-synuclein seeds.</a> Acta Neuropathol Commun. 9 (1), 189(2021).</li>
<li>Abdelmotilib, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%CE%B1-Synuclein+fibril-induced+inclusion+spread+in+rats+and+mice+correlates+with+dopaminergic+Neurodegeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Dis%22%5BJournal%5D)">α-Synuclein fibril-induced inclusion spread in rats and mice correlates with dopaminergic Neurodegeneration.</a> Neurobiol Dis. 105, 84-98 (2017).</li>
<li>Tarutani, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+fragmented+pathogenic+%CE%B1-Synuclein+seeds+on+prion-like+propagation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">The effect of fragmented pathogenic α-Synuclein seeds on prion-like propagation.</a> J Biol Chem. 291 (36), 18675-18688 (2016).</li>
<li>Taguchi, T., Ikuno, M., Yamakado, H., Takahashi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+model+for+prodromal+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Animal model for prodromal Parkinson's disease.</a> Int J Mol Sci. 21 (6), 1961(2020).</li>
<li>Bousset, L., Brundin, P., Böckmann, A., Meier, B., Melki, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+efficient+procedure+for+removal+and+inactivation+of+alpha-Synuclein+assemblies+from+laboratory+materials%5BTitle%5D)+AND+%22J+Parkinsons+Dis%22%5BJournal%5D)">An efficient procedure for removal and inactivation of alpha-Synuclein assemblies from laboratory materials.</a> J Parkinsons Dis. 6 (1), 143-151 (2016).</li>
<li>Fenyi, A., Coens, A., Bellande, T., Melki, R., Bousset, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+the+efficacy+of+different+procedures+that+remove+and+disassemble+alpha-synuclein%2C+tau+and+A-beta+fibrils+from+laboratory+material+and+surfaces%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Assessment of the efficacy of different procedures that remove and disassemble alpha-synuclein, tau and A-beta fibrils from laboratory material and surfaces.</a> Sci Rep. 8, 10788(2018).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>オールインワン蛍光顕微鏡 BZ-X710</td><td>キーエンス</td><td>N/A</td><td>オールインワン顕微鏡</td></tr><tr><td>アンピシリン ナトリウム塩</td><td>ナカライ テスク</td><td>02739-32</td><td></td></tr><tr><td>バイオラプターII</td><td>ソニックバイオ</td><td>BR2006A</td><td>ウォーターバス型ソニケーター。</td></tr><tr><td>酒石酸ブトルファノール</td><td>明治製菓</td><td>WAK-52850</td><td></td></tr><tr><td>セルロースチューブ</td><td>ミスミ</td><td>UC20-32-100</td><td></td></tr><tr><td>ディープウェルマキシマイザー</td><td>タイテック</td><td>MBR-022UP</td><td>シェーカー</td></tr><tr><td>ダイナコンピュティセルズ ジップ BL21(DE3)</td><td>株式会社バイオダイナミクス研究所</td><td>DS255</td><td>コンピテントセル</td></tr><tr><td>Entellan</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>107961</td><td>顕微鏡用迅速封入剤</td></tr><tr><td>Graefe Extra Fine Forceps Curved Serrated</td><td>FST</td><td>11152-10&nbsp;</td><td>鉗子</td></tr><tr><td>硬化細ハサミ</td><td>FST</td><td>14090-09</td> は<td>さみ</td></tr><tr><td>ヒストファイン シンプルステイン マウス MAX-PO (R)</td><td>ニチレイバイオサイエンス</td><td>414341</td><td>ユニバーサル免疫ペルオキシダーゼポリマー 抗ウサギ</td></tr><tr><td>ImageJ ver 1.52p</td><td>NA</td><td></td><td>NA</td></tr> <tr><td>https://imagej.net/ innova4200</td><td>ニューブランズウィック科学</td><td>9105085</td><td>インキュベーター シェーカー</td></tr><tr><td>イソプロピル-&β;-D-チオガラクトピラノシド</td><td>ナカライ テスク</td><td>19742-94</td><td></td></tr><tr><td>LB ブロス、レノックス</td><td>ナカライ テスク</td><td>20066-24</td><td></td></tr><tr><td>ライカ EG 1150 H</td><td>ライカ</td><td>14 0388 86 108</td><td>モジュラー組織包埋センター</td></tr><tr><td>ライカ TP 1020</td><td>ライカ</td><td>14 0422 85108</td><td>自動ティッシュ プロセッサ&nbsp;</td></tr><tr><td>メデトミジン</td><td>富士フイルム</td><td>135-17473</td><td></td></tr><tr><td>マイクロム HM325 ロータリーミクロトーム</td><td>サーモサイエンティフィック</td><td>902100</td><td></td></tr><tr><td>ミダゾラム</td><td>丸石製薬</td><td>4987-211-76210-0</td><td></td></tr><tr><td>新ヘマトキシリン G型</td><td>武藤</td><td>65-9197-38</td><td>ヘマトキシリン溶液</td></tr><tr><td>静脈用普通翼針 D型 25G</td><td>テルモ</td><td>NN2332R</td><td>25G 針</td></tr><tr><td>Optima TLXの超遠心分離機</td><td>のベックマンのクーラー8043-30-1197</td><td></td><td>の超遠心分離機</td></tr><tr><td>P10ピペット</td><td>ギルソン</td><td>FA10002P</td><td></td></tr><tr><td>パラフィン</td><td>Leica</td><td></td>の39601095<td></td></tr><tr><td>パラホルムアルデヒド</td><td>Nacalaiのtesque</td><td>30525-89-4</td><td></td></tr>ペル<tr><td>オキシダーゼの汚れDABのキット</td><td>Nacalaiのtesque</td><td>25985-50</td><td></td></tr><tr><td>Pirece BCAの蛋白質の試金のキット</td><td>Thermo Scientific</td><td>23225</td><td>BCA assay</td></tr><tr><td>pRK172</td><td>Addgene</td><td>#134504</td><td>プラスミド</td></tr><tr><td>Q-セファロース Fast Flow.&nbsp;</td><td>cytiva</td><td>17051001</td><td>イオン交換樹脂</td></tr></tbody></table>

α-synuclein凝集体の鼻腔内投与技術

Technique for Intranasal Administration of &#945;-Synuclein Aggregates

図 3 に、OB の α-Syn アグリゲートの例をいくつか示します。本研究では、α-Syn凝集体を片側性鼻孔に投与しました。2つの鼻腔は鼻中隔によって分離されており、各OBは嗅覚ニューロンを各鼻腔に別々に投影します。そのため、対側のOBをコントロールとして使用することができます。
P-α-Synの病理は、1ヵ月後および3ヵ月後に治療を受けた側の産婦人科では観察されなかった(図3A、B)。レビー神経突起様p-α-Syn凝集体は、6か月後および12か月後に治療側の糸球体で観察されました。(図 3C、D、F、G)。これらの凝集体は、コントロール側のOBでは観察されませんでした(図3E)。
ImageJ(Table of Materials)を用いて、α-Syn凝集体の計数やサイズ等の検討により、α-Synの病態を推定することができます。たとえば、このモデルでは、以前に α-Syn アグリゲートの数をカウントして報告しました20。治療側のOBでは、OBのレビー神経突起様凝集体が12か月にわたって有意に増加しました(一元配置ANOVA、続いてダネット検定、p &lt; 0.01; 図3H)。コントロール側のOBでは、α-Synのアグリゲートはほとんどありません。
以前の研究では、マウスの脳に注入されたPFFは1週間以内に分解され、内因性のマウスα-Synはα-Syn凝集体に変換されたことが示されました19。本研究では、α-Synの病理の経時的な増加は、PFFの単回鼻腔内投与により、内因性マウスα-Synがα-Syn凝集体に変換されたことを示しています。これらの結果から、α-Synの病理が嗅覚粘膜から産婦人科に広がる可能性が示されました。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66943/66943fig01.jpg"> 
図1:マウス鼻腔投与方法(A)マウスを仰臥位に置き、頭部をわずかに下に傾けた状態。(B)マウスの鼻孔は黄色の矢印で示されています。(C、D)α-Synフィブリル溶液をマウスの鼻孔に滴下し(C、赤矢印)、素早く吸入する(D、赤矢印)。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66943/66943fig01large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66943/66943fig02.jpg"> 
図2:無傷の嗅球を得るための手順の概要。 (A)はさみを使用して、頭蓋骨を矢状および横方向に切開します(黄色の破線)。(B)嗅球(OB)の頭蓋骨を完全に取り除きます。(C)頭をひっくり返し、脳を慎重に取り出します。脳の神経を切断します。(D)脳骨に付着している嗅神経を切断します。(E) 無傷のOBを持つ全脳 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66943/66943fig02large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を見るには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66943/66943fig03.jpg"> 
図3:嗅球の糸球体におけるP-α-Syn凝集体 (A-G)(A-D)治療側1、3、6、および12か月後(それぞれ1m、3m、6m、および12m)のOBのP-α-Syn(EP1536Y)免疫組織化学、および(E)鼻腔内投与の12か月後の対照側。(C、D)レビー神経突起のような糸状のα-Syn凝集体が糸球体の周囲に現れます。(F、G)拡大画像は、鼻腔内投与6ヶ月後および12ヶ月後のレビー神経突起様p-α-Synの高倍率画像です。(H)治療側および対照側のOBにおけるレビー神経突起様p-α-Syn沈着量(n = 4-5)。グラフは平均±SEMを示しています。 一元配置ANOVAの後にダネットの検定が続きます。**0&lt;01.この数値は、前回のレポート20から修正されたものである。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66943/66943fig03large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>

α-Synuclein凝集体の鼻腔内投与技術

Parkinson's disease (PD) is a neurodegenerative disorder characterized by the presence of Lewy bodies, which are aggregates of &#945;-synuclein ...

technique-for-intranasal-administration-of-synuclein-aggregates

Research

JoVE Journal

Neuroscience

神経科学

パーキンソン病は、農薬への暴露に関係している。ここでは、所望の濃度と腸神経系ではα-シヌクレインの蓄積で、その効果を分析する方法で胃管を使って殺虫剤を提供する方法を示しています。...

腸神経系ではα-シヌクレインの介在物の強制経口および画像解析を用いたロテノンの経口投与

鼻腔内に脳を標的とすることの目的のために目を覚ましたマウスに薬を投与するための方法が記載されている。このメソッドは長い麻酔なしで薬物の鼻腔内投与を使用してピリオド、最小限の全身暴露と鼻から脳への配信をオーバー投与リピートが可能になります。...

アウェイクマウスに対する中枢神経系治療薬の経鼻投与

このビデオは、α-シヌクレイン(αS)凝集体で処理されたニューロンの免疫染色を示しています。ニューロンは最初にαS凝集体で処理されます。その後、それらを固定し、透過処理し、ブロッキング溶液で処理します。一次抗体を添加し、続いて蛍光標識二次抗体と核染色剤を添加します。次に、サンプルをマウントし、顕微鏡で観察します。...

α-シヌクレイン凝集体で処理したニューロンの免疫染色

このビデオは、α-シヌクレインフィブリルをマウスに注入して神経炎症を誘発する方法を示しています。このフィブリルは、変異したα-シヌクレインタンパク質を発現するトランスジェニックマウスに腹腔内に注入されます。中枢神経系に到達すると、原線維はニューロンに入り、変異したタンパク質の凝集を誘導します。凝集体は、隣接するニューロン、ミクログリア、およびアストロサイトに広がります。凝集体の認識は、ミクログリアが神経炎症を誘発し、ニューロンを損傷する引き金となります。...

α-シヌクレイン線維の注射によるマウスの神経炎症の誘導

出典: Ullah, I., et.al.中枢神経系への鼻腔内siRNA送達中のマウスの配置のための位置決め装置J. Vis.

ポジショニングデバイスを使用したマウス脳へのsiRNAの鼻腔内送達

出典: Kanazawa, T., et al.鼻から脳への薬物送達を評価するための吸入麻酔下での鼻腔内投与の新しい方法。J. Vis.

鼻から脳への薬物送達のためのピペットおよび逆カニューレ挿入によるマウスの鼻腔内薬物投与

α-シヌクレイン線維の末梢接種後のトランスジェニックマウスにおける神経炎症の生物発光イメージング

このプロトコルの目的は、生体内でα-シヌクレインの形成を複製するセルベースのシステムを集約を提供することです。細胞内の α-シヌクレイン介在物は一次ニューロンに内面化することによって播かれ、伝搬の外因性投与罹患 α-シヌクレイン遺伝子組換えマウスから隔離されたネイティブのミクロソームによる...

線維形成の強力な細胞モデルとして α-シヌクレインのミクロソーム関連付けられた集計一次ニューロンの外因性投与

ここでは、脳標的ペプチドsiRNA製剤の鼻腔内投与に対するマウスの適切な配置を可能にするマウス位置決め装置を用いて、中枢神経系における有効な遺伝子サイレンシングを可能にするプロトコルを提示する。...

中枢神経系への鼻腔内siRNA送達中におけるマウスの配置のための位置決め装置

本稿の目的は、単量体α-シヌクレインからのフィブリルの生成に必要なステップ、その後の品質管理、およびインビボで予備成形されたフィブリルの使用について概説することである。...

モノマーからのαシヌクレイン予備型フィブリルの生成と生体内での使用

このプロトコルは、非ウイルス性mRNAベクターのエアロゾル化のためのレイリー分解プロセスを軽度に示しています。エアロゾル化mRNAベクターの局所沈着は、アルバータ理想化鼻入口(AINI)モデルによって評価されます。ヒト肺細胞における緑色蛍光タンパク質(GFP)の発現は、エアロゾル化された後mRNAベクターの物理化学的および生物学的機能の維持を表します。...

レイリー分解エアロゾルを用いたmRNAポリプレックスの鼻腔内送達:鼻の堆積および機能試験のための in vitro 法

学ぶα-Synuclein凝集体の鼻腔内投与法。マウスモデルを用いて嗅球への伝播を評価し、パーキンソン病の病態進行メカニズム解明に貢献する非侵襲的アプローチを示す。

α-Synuclein凝集体の鼻腔内投与技術

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