Name: 68Ga標識ナノ分子の放射合成、品質管理、および小動物陽電子放出断層撮影イメージング (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-10-04T14:15:00.000+00:00
Duration: 9 min 55 s
Description: 学ぶ 68Ga標識ナノボディNM-02の放射合成と品質管理、小動物PET/CTイメージングによるがん可視化手法。セラノスティクス開発と臨床応用可能性評価の基盤となる技術を習得できます。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>異種移植モデルにおける 68個のGa標識ナノボディの放射合成とPET/CTイメージング

<ol><li>American Cancer Society. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Cancer+facts+%26+figures+2024%22">Cancer facts & figures 2024</a>. , https://www.cancer.org/research/cancer-facts-statistics/all-cancer-facts-figures/2024-cancer-facts-figures.html (2024).</li>
<li>Cancer Research UK. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Ovarian+cancer+survival%22">Ovarian cancer survival</a>. , https://www.cancerresearchuk.org/about-cancer/ovarian-cancer/survival (2021).</li>
<li>Siegel, R. L., Giaquinto, A. N., Jemal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+statistics%2C+2024%5BTitle%5D)+AND+%22CA+Cancer+J+Clin%22%5BJournal%5D)">Cancer statistics, 2024.</a> CA Cancer J Clin. 74 (1), 12-49 (2024).</li>
<li>Altunay, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Her2-directed+antibodies%2C+affibodies+and+nanobodies+as+drug-delivery+vehicles+in+breast+cancer+with+a+specific+focus+on+radioimmunotherapy+and+radioimmunoimaging%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Nucl+Med+Mol+Imaging%22%5BJournal%5D)">Her2-directed antibodies, affibodies and nanobodies as drug-delivery vehicles in breast cancer with a specific focus on radioimmunotherapy and radioimmunoimaging.</a> Eur J Nucl Med Mol Imaging. 48 (5), 1371-1389 (2021).</li>
<li>Altunay, B., Morgenroth, A., Mottaghy, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+radionuclide-based+imaging+methods+in+breast+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Nucl+Med%22%5BJournal%5D)">Use of radionuclide-based imaging methods in breast cancer.</a> Semin Nucl Med. 52 (5), 561-573 (2022).</li>
<li>Mcgale, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pet%2Fct+and+spect%2Fct+imaging+of+her2-positive+breast+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Med%22%5BJournal%5D)">Pet/ct and spect/ct imaging of her2-positive breast cancer.</a> J Clin Med. 12 (15), 4882(2023).</li>
<li>Zhang-Yin, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((State+of+the+art+in+2022+pet%2Fct+in+breast+cancer%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Med%22%5BJournal%5D)">State of the art in 2022 pet/ct in breast cancer: A review.</a> J Clin Med. 12 (3), 968(2023).</li>
<li>USFD Administration. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Pet+drug+products+-+current+good+manufacturing+practice+%28cgmp%29%22">Pet drug products - current good manufacturing practice (cgmp)</a>. , https://www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/pet-drug-products-current-good-manufacturing-practice-cgmp (2018).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Official+Journal+of+the+European+Union%2C+L238%22">Official Journal of the European Union, L238</a>. 60, https://eur-lex.europa.eu/legal-content/EN/TXT/?uri=OJ:L:2017:238:TOC (2017).</li>
<li>Korde, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Position+paper+to+facilitate+patient+access+to+radiopharmaceuticals%3A+Considerations+for+a+suitable+pharmaceutical+regulatory+framework%5BTitle%5D)+AND+%22EJNMMI+Radiopharm+Chem%22%5BJournal%5D)">Position paper to facilitate patient access to radiopharmaceuticals: Considerations for a suitable pharmaceutical regulatory framework.</a> EJNMMI Radiopharm Chem. 9 (1), 2(2024).</li>
<li>Korde, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Practical+considerations+for+navigating+the+regulatory+landscape+of+non-clinical+studies+for+clinical+translation+of+radiopharmaceuticals%5BTitle%5D)+AND+%22EJNMMI+Radiopharm+Chem%22%5BJournal%5D)">Practical considerations for navigating the regulatory landscape of non-clinical studies for clinical translation of radiopharmaceuticals.</a> EJNMMI Radiopharm Chem. 7 (1), 18(2022).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22European+Pharmacopeia%22">European Pharmacopeia</a>. , (2023).</li>
<li>Volokhov, D. V., Graham, L. J., Brorson, K. A., Chizhikov, V. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mycoplasma+testing+of+cell+substrates+and+biologics%3A+Review+of+alternative+non-microbiological+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell+Probes%22%5BJournal%5D)">Mycoplasma testing of cell substrates and biologics: Review of alternative non-microbiological techniques.</a> Mol Cell Probes. 25 (2-3), 69-77 (2011).</li>
<li>Dülsner, A., et al. Technical information from the Committee for Animal Welfare Officers (GV-SOLAS) and Working Group 4 in the TVT Recommendation on substance administration to laboratory animals. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aD%C3%BClsner%2C+A+%22GV-SOLAS%22">GV-SOLAS</a>. , (2017).</li>
<li>derived xenograft (pdx) protocols at the jackson laboratory. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://tumor.informatics.jax.org/mtbwi/live/www/html/SOCHelp.html">https://tumor.informatics.jax.org/mtbwi/live/www/html/SOCHelp.html</a> (2020).</li>
<li>Velikyan, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((68ga-based+radiopharmaceuticals%3A+Production+and+application+relationship%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">68ga-based radiopharmaceuticals: Production and application relationship.</a> Molecules. 20 (7), 12913-12943 (2015).</li>
<li>Percie Du Sert, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reporting+animal+research%3A+Explanation+and+elaboration+for+the+arrive+guidelines+2.0%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biol%22%5BJournal%5D)">Reporting animal research: Explanation and elaboration for the arrive guidelines 2.0.</a> PLoS Biol. 18 (7), e3000411(2020).</li>
<li>Smith, A. J., Clutton, R. E., Lilley, E., Hansen, K. E. A., Brattelid, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prepare%3A+Guidelines+for+planning+animal+research+and+testing%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">Prepare: Guidelines for planning animal research and testing.</a> Lab Anim. 52 (2), 135-141 (2018).</li>
<li>Landesamt Für Natur UUVN. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Tierversuche%22">Tierversuche</a>. , https://www.lanuv.nrw.de/verbraucherschutz/tierversuche (2024).</li>
<li>Herrmann, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Statistical+controversies+in+clinical+research%3A+Publication+bias+evaluations+are+not+routinely+conducted+in+clinical+oncology+systematic+reviews%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Oncol%22%5BJournal%5D)">Statistical controversies in clinical research: Publication bias evaluations are not routinely conducted in clinical oncology systematic reviews.</a> Ann Oncol. 28 (5), 931-937 (2017).</li>
<li>Johnsen, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+critical+evaluation+of+amicon+ultra+centrifugal+filters+for+separating+proteins%2C+drugs+and+nanoparticles+in+biosamples%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharm+Biomed+Anal%22%5BJournal%5D)">A critical evaluation of amicon ultra centrifugal filters for separating proteins, drugs and nanoparticles in biosamples.</a> J Pharm Biomed Anal. 120, 106-111 (2016).</li>
<li>TVT-Veröffentlichungen zum Download. , Society for Laboratory Animal Science (GV-SOLAS). Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.tierschutz-tvt.de/alle-merkblaetter-und-stellungnahmen/">https://www.tierschutz-tvt.de/alle-merkblaetter-und-stellungnahmen/</a> (2024).</li>
<li>Bedard, P. L., Hansen, A. R., Ratain, M. J., Siu, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumour+heterogeneity+in+the+clinic%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Tumour heterogeneity in the clinic.</a> Nature. 501 (7467), 355-364 (2013).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Equipment</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>活動量計 ISOMED 2010</td><td>Nuviatech Healthcare&nbsp;</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>遠心分離機 MIKRO 185</td><td>Andreas Hettich GmbH & Co. KG</td><td>1203</td><td></td></tr><tr><td>エンドトキシン試験 Endosafe nexgen-PTS</td><td>チャールズリバー</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>ヒーティングブロック NANOCOLOR VARIO C2</td><td>Macherey-Nagel</td><td>919350</td><td></td></tr><tr><td>HPLCシステム、ラジオ検出器を含む</td><td>Knauer &Raytest</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>画像解析ソフトウェア Pmod 4.4&nbsp;</td><td>PMOD Technologies LLC</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>小動物PET / CTシステム&beta;-CUBEおよびX-CUBE</td><td>Molecubes</td> <td>NV-TLC</td><td></td></tr> <tr><td>MiniGITA *</td> <td>Elysia-Raytest</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Materials</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>0.3 mm diameter PE10 tube</td><td>fisher scientific</td><td>22-204008</td><td></td></tr><tr><td>30G needle</td><td>B |Braun</td><td>4656300</td><td></td></tr><tr><td>遠心フィルター; 10 kDa MWCO, 0.5 mL</td><td>Millipore</td><td>UFC501008</td><td></td></tr><tr><td>Chromatography Paper strip iTLC-SG</td><td>Agilent Technologies</td><td>SGI0001</td><td></td></tr><tr><td>Endotoxin Cartridge, 0.05 EU/ml sensitivity&nbsp;</td><td>チャールズ</td><td>リバーPTS-2005</td><td></td></tr><tr><td>HPLCカラムBiosep SEC-s2000</td>フェ<td>ノメネックス</td><td>マイクロ</td><td></td></tr><tr><td>遠心チューブ(1.5 mL)</td><td>エッペンドルフ</td><td>0030125150</td><td></td></tr><tr><td>pHストリップ0.0 - 6.0</td><td>Merck KGaA</td><td>109531</td><td></td></tr><tr><td>pHストリップ0-14</td><td>Merck KGaA</td><td>109535</td><td></td></tr><tr><td>PS-H+ SPEカートリッジ</td><td>Macherey Nagel GmbH &;Co. KG</td><td>731861</td><td></td></tr><tr><td>滅菌バイアル 10 mL</td><td>ALK Life Science Solutions</td><td>SEV100</td><td></td></tr><tr><td>Reagents</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>68Ge/68Ga-Generator</td><td>NRF-iThembaLABS-Ammoniumacetate</td><td></td><td></td></tr> <tr><td></td><td>Merck KGaA</td><td>101116</td><td></td></tr><tr><td>クエン酸</td><td>Merck KGaA</td><td></td><td></td>100241</tr><tr><td>塩酸</td><td>メルク KGaA</td><td>320331</td><td></td></tr><tr><td>NaCl</td><td>メルク KGaA</td><td>S9888</td><td></td></tr><tr><td>ナノボディ NM-02</td><td>放射線薬 セラノスティクス</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>P-SCN-BZ-DOTA-GA</td><td>ケマテック</td><td>C115</td><td></td></tr><tr><td>トリフルオロ酢酸</td><td>メルク KGaA</td><td>T6508</td><td></td></tr><tr><td>超純水</td><td>メルク KGaA</td><td></td><td></td>101262</tr></tbody></table>

68ga標識ナノ分子の放射合成、品質管理、および小動物陽電子放出断層撮影イメージング

Radiosynthesis, Quality Control, and Small Animal Positron Emission Tomography Imaging of 68Ga-Labelled Nano Molecules

放射性医薬品の品質管理の最も重要な側面の1つは、HPLCによるもので、これは化学的および放射性化学的純度(この場合は98.2%)だけでなく、溶出時間とピーク形状を非放射性参照化合物と比較することにより、放射性医薬品の同一性を証明することもできます。この参照化合物は、この場合、非標識ナノボディであり、質量分析や核磁気共鳴などの古典的な手法によって正しい化合物であることが証明されています。これらの手法は、放射性化合物に直接適用することはできませんが(シグナルを生成するのに十分な質量がありません)、放射性化合物とその参照を比較することにより、正しい化合物が実際に標識され、合成中に変化しなかったという十分な証拠が収集されます。放射性製品と 図1の基準との間の保持時間のわずかな違いに注意してください(これは、HPLCフローの連続測定に対応します(UVが最初に測定され、その後、フローが放射能検出器に到達するまでに約0.2分かかります)。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67048/67048fig01.jpg"> 
図1: 68Ga標識ナノボディNM-02(GLNM-02)の品質管理のための一般的な分析用HPLCクロマトグラム。 コールドコンパウンドのUV吸光度(上部パネル)は280nmで測定され、4.18分にピークを示し、0.22分シフトします。 68Gaで標識された製品のピークは、ガンマ検出器(つまり、下部パネル)で見ることができます。放射性化学収率は98.2%です。mAU = ミリ吸光度単位、NM-02 = 当社製品、UV = 紫外線チャネル、nm = ナノメートル、min = 分、CPS = カウント/秒、GLMN-02 = 68Ga標識ナノボディ NM-02、 68Ga-DOTA-GA = [68Ga]Ga-DOTA-GA、γ ChA = ガンマチャネル。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67048/67048fig01large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
HPLCがない場合、またはHPLCに加えて、TLCを使用して最終製品のラベリング収率と純度を決定できます(ただし、同一性は測定できず、HPLCほど詳細ではありません)。TLCは複雑性が低いため、放射性合成経路がまだ最適化されている場合に最適です。 図2 に、 68Ga標識ナノボディNM-02(見かけ上の放射化学的純度99.9%)のTLCクロマトグラムを示します。
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67048/67048fig02.jpg"> 
図2:68Ga標識ナノボディNM-02(GLNM-02)の品質管理のための典型的な分析TLCクロマトグラム。 面積カウントは、TLCプレート上の溶媒(クエン酸塩)が移動した距離に対してプロットされます。Rfは0.2で、放射化学的純度は99.9%です。C = カウント、mm = ミリメートル、GLNM-02 = 68Ga標識ナノボディNM-02、TLC = 薄層クロマトグラフィー。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67048/67048fig02large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
公開用の画像データを準備するプロセスでは、少なくとも 1 つのスタンドアロンの CT 画像と PET 画像を表示するのが標準的な方法です。このアプローチにより、トレーサーの生体内分布を包括的に評価することができます。標準的なCTスケーリングは-1000HUから1000HUの間であり、1つのウィンドウ内ですべての軟組織を視覚化することができます。 図3Aに示すように、この方法ではマウスの腎臓を明確に区別すると同時に、骨の評価が可能になります。
PETスケールの場合、最小上限しきい値を1.0(図3B)に維持しながら、SUVの下限しきい値を0.0に設定し、できればSUVの計算中に体重の正規化を使用します(つまり、SUVのbw)。さらに、定量化には、SUVmaxよりもSUVmeanが好まれます。SUVmaxを使用する場合は、SUVBW の計算で最もホットなシングルボクセルの値ではなく、最もホットな10個のボクセルの平均を使用します。CTスライスとPETスライスをマージして、PET/CT画像の特徴融合を準備します(図3C)。
読者が全身トレーサーの生体内分布を独立して評価できるように、同じPETスキャンの最大強度投影をPETスライスと同じスケールを使用して表示することができます(図3D)。
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67048/67048fig03.jpg"> 
図3:皮下SKOV-3担がんマウスの in vivo PET/CT画像。 画像は、5 MBq 68Ga標識ナノボディNM-02(GLNM-02)の静脈内注射の3時間後に取得されました。(A)CT画像は-1000HUから1000HUの間でスケーリングされ、(B)PET画像は0.0から5.0のSUVの間にあります。(C)PET/CT融合は同じスケールを使用します。(D)最大強度投影(MIP)PET画像も、0.0と5.0のSUVを使用してスケーリングされます。すべてのPET画像は、GLNM-02の良好な腫瘍取り込みを示しており、腎クリアランスがはっきりと見えます。CT = コンピューター断層撮影、PET = 陽電子放出断層撮影、MIP = 最大強度投影、HU = ハウンズフィールド単位、SUV = 標準化された取り込み値。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67048/67048fig03large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
68Ga標識ナノボディNM-02の特定のケースでは、マウスの左側に顕著な腫瘍の取り込みが観察できます。さらに、トレーサーの腎クリアランスも明らかです。PETの最大強度投影を提示することにより、膀胱活動も見えるようになり、トレーサーの腎クリアランスが強化されます。この特定のケースでは、腎臓、腫瘍、および膀胱を同じ2Dスライスで表示できないことに言及する価値があります。出版物に最大強度投影を含めることにより、トレーサーの生体内分布全体が同じ画像に表示されます。

68Ga標識ナノ分子の放射合成、品質管理、および小動物陽電子放出断層撮影イメージング

Small animal Positron Emission Tomography (PET) and Single Photon Emission Computed Tomography (SPECT) imaging techniques are crucial in preclinical ...

radiosynthesis-quality-control-small-animal-positron-emission

Research

JoVE Journal

Cancer Research

がん研究

我々は、[ 18 F] 3F4APの半自動放射化学合成および品質管理手順を実証する。...

[<sup&gt; 18</sup&gt; F] 3F4AP：脱髄疾患イメージングのための新規PETトレーサ

がん転移臨床生体内で追跡のためのプロトコルについて述べる。それは、非侵襲的 [18F] テトラフルオロホウ酸-ペット、および合理化された前のヴィヴォ確認のため蛍光蛋白質によって検出されたナトリウム...

放射性核種蛍光レポーターの遺伝子齧歯動物腫瘍モデルで腫瘍の進行を追跡するイメージング

ここでは、取得するためのプロトコルを提案する68高速電子レンジ駆動合成を介してGa コアをドープした酸化鉄ナノ粒子。方法論は、ペットをレンダリングします/(T1) MRI ナノ粒子標識化し、20 分合成で 99% の放射化学的純度 90%...

二重陽電子放出断層レントゲン写真撮影のため68Ga コアをドープした酸化鉄ナノ粒子の合成/(T1) 磁気共鳴イメージング

複数初期臨床研究臨床試験に関与している陽電子放出断層撮影 (PET) 画像処理サイトには、堅牢で汎用性の高い検査製造能力が必要があります。ルコース [18F] を使用して Clofarabine、カセット ベースの柔軟な radiosynthesizer...

臨床用陽電子放出断層レントゲン写真撮影 (ペット) ルコース合成プロトコルの自動化

[11C]SNAP-7941の自動合成とリアルタイム運動評価の技術的側面

この方法は、ペプチド-受容体-放射性核種療法(PRRT)の異なる構造の吸収線量を推定し、2D-プロジェクション上で臓器の重複を回避する可能性を有する。全身の連続全身画像は、全身に沿って平均吸収線量の推定を可能にし、平坦な画像と3D-SPECT/CT画像を組み合わせたハイブリッドアプローチは、重なり合う構造の限界を克服する。...

ペプチド受容体放射性核種療法のための全身線種測定プロトコル(PRRT):2D平面画像とハイブリッド2D+3D SPECT/CT画像法

陽電子放出断層撮影のためのフッ素-18(18F)標識放射性医薬品の合成は、典型的には数ヶ月の経験を必要とする。放射性トレーサーに組み込まれると、フッ化ケイ素アクセプター(SiFA)モチーフは、高価な機器や準備トレーニングに依存しないシンプルな18Fラベリングプロトコルを可能にする一方で、必要な前駆体量を削減し、より穏やかな反応条件を利用します。...

18年陽電子放射断層撮影用フッ化ケイ素アクセプタ(SiFA)で機能化した放射性トレーサーのFラベリング

68ガリウム標識D-ペプチドPETトレーサーの開発によるプログラム死リガンド1発現イメージング

この研究は、線維芽細胞活性化タンパク質のPETイメージングのためのiPHASE...

ルーチン臨床使用のための[68Ga]Ga-FAPI-46の自動放射性合成

このプロトコルは、「ループ法」[11C]メチル化によって4つの炭素11放射性トレーサーを調製する詳細な手順を示しています。[11C]ER-176を合成する手順を、[11C]MRB、[11C]mHED、および[11C]PiBの3つの追加の放射性トレーサーのデータとともに説明します。ループ法は、従来の反応容器[11C]メチル化に対して放射化学的収率を高め、効率的な合成を提供します。...

ループ法を用いた臨床研究のための炭素11放射性配位子の効率と放射性標識収率の向上

腫瘍微小環境PETイメージングのための合成モジュール上の[68Ga]Ga-3BP-3940の自動調製

学ぶ 68Ga標識ナノボディNM-02の放射合成と品質管理、小動物PET/CTイメージングによるがん可視化手法。セラノスティクス開発と臨床応用可能性評価の基盤となる技術を習得できます。

⁶⁸Ga標識ナノ分子の放射合成、品質管理、および小動物陽電子放出断層撮影イメージング

さらに動画を探す