針ガイド下非対称両側総頸動脈狭窄症に基づく血管性認知障害および認知症のマウスモデル

私たちの研究室は、虚血性脳卒中、血管性認知障害、認知症の新しい治療法を特定するために使用されていました。本研究では、血管性認知障害と認知症を研究するための新しいマウスモデルを作成しました。

主な課題は、血管性認知障害と認知症が、多くの臨床表現と原因を統合する複雑な用語であることです。したがって、研究者は、実験用の動物モデルを選択する際に常にそのことを念頭に置く必要があります。

私たちは、炎症の遠方でMRIによる脳波の動的モニタリングを可能にする新しいVCIDモデルを確立し、そのメカニズムがVCIDにおいて重要な役割を果たしています。

当社のモデルは信頼性が高く、研究者のニーズに応じてパラメータを微調整でき、超低コストで、生きた動物のMRIスキャンも可能です。VCIDでは炎症が重要な役割を果たしており、炎症がどのように認知症につながるか、炎症を調節することでどのように病気を改善するかについてさらに詳しく解明します。

[ナレーター]まず、長さ4ミリメートルの針の破片を滅菌ペトリ皿に入れます。針の鋭い端を硬い面に軽くたたいて鈍らせます。針ホルダーを使用して、針をプラスチック片から慎重に分離し、7-0のシルク縫合糸を1〜2センチメートルの長さに事前にカットします。マウスを麻酔した後、腹側を上にして加熱パッドの上に置きます。ヨウ素10%を含むベタジン溶液で手術部位を滅菌し、70%エタノールで皮膚を脱ヨウ素化します。つま先ピンチテストで麻酔レベルが適切であることを確認してください。次に、気管に沿って垂直の正中線切開を行います。マイクロ鉗子を使用して、両側の甲状腺をそっと分離し、滅菌された小さな皮膚レトラクターを使用して皮膚とその下の組織を引き戻します。顕微鏡下で、角度の付いたピンセットを使用して、迷走神経と周囲の鞘からCCAの1つを注意深く露出させ、鈍く解剖します。CCAが鉗子に付着する傾向がある場合は、切開部位を滅菌水またはPBSで湿らせます。必要に応じて、姿勢をサポートするために小さなプラスチック製の注射器を首の下に置きます。次に、角度の付いたピンセットを使用して、3つのプレカットされた7-0シルク縫合糸の断片をCCAの下に約1ミリメートル離して通します。縫合糸の片頭の1つでCCAの周りに非常に緩い二重結び目を作成します。準備した針片をCCAと平行に配置し、緩い結び目の内側に置きます。血流が止まるまで、針とCCAの両方の周りの一次結び目を慎重に締めます。次に、二次結び目で固定します。針をそっと引き抜いて部分的な血流を再開し、縫合糸の端をトリミングします。CCAの3つの縫合バンドすべてが、血流を完全に妨げるほどきつく締められずにしっかりと結ばれていることを確認します。CCAが結び目の下流で青白くなく、縫合糸の間隔が等しいことを確認してください。反対側のCCAの分離と結紮を繰り返し、正しい距離と血流の回復を確認します。2 次元レーザー スペックル イメージングにより、脳の低灌流は左半球でより顕著であり、手術後少なくとも 24 週間持続することが明らかになりました。手術後の6週間にわたる雄マウスの生存率は81.6%と記録され、最初の1週間の死亡率は高かった。T2強調MRI画像は、ABCS手術マウスの複数の脳領域にわたる低強度または超強度領域を検出し、脳損傷を示しました。拡散テンソルイメージングからの方向性にエンコードされたカラーマップは、シャムグループと比較して、ABCSマウスの構造的損傷を示しました。モリス水迷路テストでは、ABCS操作マウスで脱出までの潜時が長く、重大な学習障害が示されました。プローブ試験中にターゲット象限で費やす時間が短縮されたことで、記憶障害がさらに確認されました。これらの欠損は、手術後少なくとも 24 週間持続しました。