天然マイクロバイオームを持つ実験用マウスの施設の手術および生物学的封じ込め手順:イムノフェノタイピング手順

私たちは、栄養が免疫系に及ぼす影響を調査しています。そして、カロリー制限と断食療法のアンチエイジングと抗炎症効果、およびこれらのプロセスにおける微生物叢の役割に特に関心があります。野生マウスは、実験用マウス系統の遺伝的背景と、自由に歩き回るマウスの自然なマイクロバイオームを組み合わせています。

しかし、これらの野生のネズミの自然なマイクロバイオームには、ウイルス、細菌、さらには寄生虫が含まれているため、畜産施設に課題が生じています。QUEST Center for Responsible Researchの貢献は、RussellとBurchから知られている3つのR、置換、改良、および削減を強化する6つのRフレームワークの開発であり、3つの追加のRの堅牢性、登録、および報告を組み込むことでした。このフレームワークは、前臨床研究の再現性と透明性を高めることを目的としています。

そして、実験結果はより信頼性が高く、信頼でき、最終的には臨床状況に変換できるという考え方です。過去4年間で、私たちは明確な生物学的封じ込めプロトコルを持つ野生マウスのための施設のコンセプトを開発しました。私たちは、研究者と専門知識を共有し、彼らが天然のマイクロバイオームを持つマウスを研究に参加できるようにしたいと考えています。

脳卒中は高齢者に最も一般的です。免疫系には、感染性粒子と戦い、不均一な微生物叢と共存することで得られる記憶細胞があります。したがって、野生マウスの脳卒中モデリングは、げっ歯類の洗練されたモデルであり、患者の状態をよりよく反映します。

エリアパンツ、コサック、使い捨てシューズカバーに着替えた後、エアシャワーの控え室でシューズとソックスを脱いでください。エリアソックスと、タイベックのオーバーオール、ヘアネット、コットン手袋、ニトリル手袋、フェイスマスクなどの全身の個人用保護具を着用してください。粘着性の床の敷物を介してエリアソックスを着用してエアシャワーに入ります。

エアシャワーを浴びながら、腕を上げて360度回転します。エアシャワーを出て、反対側でエリアシューズを履きます。マウスを密閉された個別に換気されたケージ内の部屋から処置室に移します。

麻酔をかけたマウスを消毒したテーブルにうつ伏せに置き、首筋をつかんで首の静脈を圧迫します。片手で、親指と人差し指でマウスの頭を固定します。新鮮な毛細血管を瞬膜の下の眼の内側眼瞼

血液が流れ始めるまで、眼窩の後ろにある副鼻腔膜を通して毛細血管を軸方向に回転させます。EDTAを一滴入れた採血管に最低15マイクロリットルの血液を採取します。毛細血管を取り外す前に首筋のグリップを緩めて、組織への出血を最小限に抑えます。

清潔なガーゼパッドまたは綿棒を使用して、出血を止め、止血を確保します。チューブを少し回転させて、振らずに血液とEDTAを混合し、血液サンプルを氷上に保存します。採血が完了したら、手袋を交換し、すべての材料と表面を消毒します。

LAFキャビンの前にあるアクセス層流(LAF)で新しい防護服を着用してください。サンプル容器を消毒し、LAFキャビンのガラス壁にあるスライドドアから取り出します。サンプル容器を人2に移した後、すべての表面を消毒します。

消毒されたサンプルコンテナは、LAFキャビンのガラス壁にあるスライドドアから直接接触することなく、野生地域から受け取ります。次に、使い捨てのオーバーオールとエリアシューズを指定されたエリア内に置いておきます。ヘアネット、ゴム手袋、フェイスマスクは廃棄してください。

エリアソックスですぐにエアシャワーに入ります。腕を上げて360度回転しながらエアシャワーを浴びます。エアシャワーを放っておき、エリアソックスをランドリーコレクターに入れます。

個人用の靴下、靴、使い捨ての靴カバーを着用してください。更衣室のランドリーコレクターにエリアの衣類を預け、通常の服に着替えます。