2024年9月20日
私たちは、 in vivo の葉接種法を使用して、茎潰瘍病原体に対するポプラの耐性を評価するための段階的なプロトコルを提供します。この方法は、中国のポプラ育種子孫における Cytospora chrysosperma および Botryosphaeria dothidea 潰瘍病抵抗性の大規模な評価に特に適しています。
この研究プロトコルの範囲は、ポプラハイブリッド育種を使用した病原体接種と耐病性評価の方法論を調べることです。私たちは、ポプラ茎潰瘍病の繁殖を進めることを目的として、従来の方法に代わるものとしてin vivo葉接種法を提案しています。葉の接種方法を使用して、研究者は、茎潰瘍病のポプラハイブリッド等級付けにおけるスライド選択で早期に実現し、ハイブリッド病変の2年目に、大規模なハイブリッドクローンの病害抵抗性をスクリーニングすることができます。
葉の接種方法の最も有利な側面は、高効率と高スループットです。まず、葉法は、病害抵抗性選択の期間を交配後5〜7年から交配後2年に急激に短縮することができます。次に、この手法では、大規模なハイブリッドクローンの耐病性を数週間以内に評価できます。
この葉の接種法は、中国におけるポプラ種Botryosphaeria dothideaとCytospora chrysosperma cankerの雑種育種、北米におけるセプトリア潰瘍のポプラ種交配を進めるものです。さらに、この方法は、耐病性遺伝子をマイニングし、ポプラ分子育種の発達を改善するために使用できます。茎潰瘍病のポプラ雑種育種に加えて、葉法は、自然または突然変異のポプラ集団の耐病性、およびポプラ茎潰瘍病原体の感受性をスクリーニングするために使用できます。
さらに、この方法は、病害抵抗性遺伝子のマイニング、および病害抵抗性の遺伝的分析のための病理型を提供することができます。
本研究では、in vivo 葉面接種法を用いて、ポプラハイブリッドの茎いもち病病原菌に対する抵抗性を評価するためのプロトコルを提供します。この手法は、中国におけるポプラ育種において、Cytospora chrysospermaおよびBotryosphaeria dothideaによるキャンカー病への抵抗性を大規模にスクリーニングする際に特に有効です。
ポプラハイブリッドにおける病害抵抗性の迅速かつ定量的な評価は、林業バイオテクノロジーパイプラインにおける重大なボトルネックを解消します。in vivo 葉接種法は、ハイスループットな初期段階のスクリーニングを可能にし、茎幹潰瘍病原体に対する抵抗性クローンの同定と選別を加速させます。このアプローチは、病害抵抗性育種プログラムにおける予測精度とポートフォリオの進展を向上させます。
この手法は、初期の探索およびスクリーニング段階に組み込まれ、林業の研究開発パイプラインにおける表現型バリデーションと分子育種を橋渡しするものです。