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DOI: 10.3791/67389-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
ここでは、ショウジョウバエの卵巣ニッチにおける生殖幹細胞(GSC)の非対称分裂のライブイメージングを行うための詳細なプロトコルを提供します。私たちは、スペクトロソームタンパク質Par-1の緑色蛍光タンパク質(GFP)融合を遍在的に発現するトランスジェニックラインを使用しています。
私たちは、細胞の幹細胞性を制御する新しい細胞および分子メカニズムを発見することに興味を持っています。私たちの主な目的は、幹細胞がニッチでの分化をどのように回避するかを解読することです。私たちは実験条件下で研究しているため、GSCが生理学的挙動を確実に受けられるように、組織の完全性を保つことが不可欠です。
私たちのプロトコルは、健全で機能的なGSCニッチを維持し、in vivoで分裂するGSCのモニタリングを可能にします。長寿命イメージングを用いることで、GSCの細胞周期全体と分光体ダイナミクスを研究することができます。具体的には、これまで固定画像や短いイメージング期間では達成が難しかった、細胞周期全体にわたるスペクトロソームの変化を特徴づけることに成功しました。
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