性別を肯定するホルモン療法を模倣したラットモデルの確立

私たちの研究は、トランスジェンダー男性にはテストステロン、トランスジェンダー女性には抗アンドロゲンを含むエストロゲンを使用する、トランスジェンダーの個人に対する性別適合ホルモン療法を再現する動物モデルを開発しました。私たちは、これらの治療を受けている人々が一般の人々と同じくらい環境化学物質に対して脆弱であるかどうか、またホルモン治療の長期的な副作用があるかどうかを調べています。このモデルは、ホルモン療法を受けているトランスジェンダーの人々の化学物質に対する潜在的に異なる感受性とその副作用を評価するためのデータとツールが現在利用できるため、その分野でユニークです。

私たちの研究から得られた重要な発見は、ホルモン療法の成功を評価するためのマーカーとして性特異的な肝臓 CPS を使用することです。このアプローチは、私たちの研究で初めて開発されたもので、モデルの精度と有効性を確認するための貴重なツールを提供します。

私たちのプロトコルは、ホルモン療法の長期的な効果を理解する際のギャップに対処します。また、食品や環境化学物質への毎日の曝露がホルモン治療の効果と相互作用したり、時間の経過とともに変化させたりする可能性があるかどうかも調査しています。

将来的には、このモデルが長期テストに適しているかどうかを調査し、治療効果をより適切に評価するために、狭い行動テストなどの追加のバイオマーカーを調査します。

[講師]まず、注射部位の皮膚をつまんで持ち上げ、テストステロンとエストラジオールと酢酸シプロテロンをゴマ油に溶かして投与します。1ミリリットルの注射器の針を動物の背中と平行に挿入します。針が中に入れられたら、モデルに応じて、100マイクロリットルのテストステロンまたは200マイクロリットルのエストラジオールと酢酸シプロテロンをゆっくりと注射します。2週間の治療後、麻酔をかけた各ラットを温熱パッドの上に仰臥位に置きます。次に、21ゲージの針が付いた5ミリリットルの注射器を準備し、真空が確実に取り除かれるようにする。.指を使って心臓の位置を特定します。胸壁を優しく洗浄し、肋骨5と6の間の屈曲した肘と一直線のポイントで、体に垂直な外側胸壁に針を慎重に挿入します。針が心室に到達すると、血液は毛細管現象によって注射器に入ります。血液が採取されるまで、シリンジピストンをゆっくりと継続的に引き込みます。生贄の後、各動物を仰臥位で解剖台に置き、前脚を上に向けて、後ろ足を下に向けます。手足をピンで固定し、動物の腹側表面に消毒液を振りかけて解剖の準備をします。はさみを使って、恥骨から上腹部までの正中線に沿って切ります。正中線腹側腹部切開から各後肢の内側面に沿って2つの横方向の切り込みを入れ、腹部内臓を露出させます。雄のラットでは、腹腔内陰嚢にある精巣を切除します。陰嚢を押して精巣が突き出ていることを確認し、そっとつかみます。ペンチを使用して内臓脂肪を保持し、精巣を内臓から慎重に切り離します。組織病理学的分析のために精巣をボワ溶液に保管する前に、精巣の重量を量ります。雌のラットでは、子宮を繊細につかみます。両方の子宮角の端にある卵巣を特定し、周囲の内臓脂肪組織から切り離します。切除後の卵巣の重さを量ります。次に、鉗子で肝臓をつかみ、壊れないようにします。ペンチを使用して剣状突起をつかみ、はさみで横隔膜を完全に切ります。はさみを使って肝臓を横隔膜から分離します。鉗子で剣状突起を持ち上げ、腹腔から肝臓を抽出します。切除後、肝臓の重さを量り、適切に保管してください。はさみを使って、動物の首に沿って垂直に切ります。皮膚と筋肉組織を取り除き、甲状腺がある気管を露出させます。気管の端をそっと切り取って甲状腺を取り除きます。精巣を取り除いた後、精巣の後縁に付着し、陰嚢内にある精巣上体をつかみます。精液を集めるには、はさみを使って脂肪や結合組織を取り除き、右精巣上体の尾部をきれいにします。尾を残りの部分から分離し、1ミリリットルのDMEMを含むペトリ皿に入れます。はさみで尾を切り、過去のピペットを使用して内容物を穏やかに流し、放出を容易にします。次に、収集した液体を 15 ミリリットルのチューブに移し、DMEM で容量を 10 ミリリットルに調整して、希釈係数を 1 から 10 にします。内容物をピペットで均質化し、懸濁液を作成します。軽く振った後、10マイクロリットルの懸濁液を取り、ノイバウアーチャンバーにロードします。