Name: 迷路切除術中の生理学的条件下での前庭末端器官の収穫 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-11-29T14:50:00.000+00:00
Duration: 3 min 8 s
Description: 学ぼう、迷路切除術中に生理学的条件下で前庭末端器官を収穫する新手法。内視鏡と平衡塩溶液を用い、メニエール病などの内耳疾患の研究に有用な生体組織を直接取得できる。

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<ol><li>Monsanto, R. D. C., Pauna, H. F., Paparella, M. M., Cureoglu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Otopathology+in+the+United+States%3A+History%2C+Current+Situation%2C+and+Future+Perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Otol+Neurotol%22%5BJournal%5D)">Otopathology in the United States: History, Current Situation, and Future Perspectives.</a> Otol Neurotol. 39 (9), 1210-1214 (2018).</li>
<li>Nager, G. T. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aNager%2C+GT+%22Pathology+of+the+Ear+and+Temporal%22">Pathology of the Ear and Temporal</a>. , Williams and Wilkins Pubs. Baltimore, MD. (1993).</li>
<li>Schuknecht, H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSchuknecht%2C+H+%22Pathology+of+the+Ear%22">Pathology of the Ear</a>. , Lea and Febiger Pubs. Philadelphia, PA. (1993).</li>
<li>Swartz, J. D., Loevner, L. A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSwartz%2C+JD+%22Imaging+of+the+Temporal+Bone%22">Imaging of the Temporal Bone</a>. , 4th edition, Thieme Medical Pubs. Stuttgart. (2009).</li>
<li>Nagururu, N. V., Akbar, A., Ward, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+magnetic+resonance+imaging+to+improve+diagnosis+of+peripheral+vestibular+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurol+Sci%22%5BJournal%5D)">Using magnetic resonance imaging to improve diagnosis of peripheral vestibular disorders.</a> J Neurol Sci. 439, 120300(2022).</li>
<li>Hızlı, Ö, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+vestibular+labyrinthine+otopathology+in+temporal+bones+with+vestibular+schwannoma%5BTitle%5D)+AND+%22Otolaryngol+Head+Neck+Surg%22%5BJournal%5D)">Quantitative vestibular labyrinthine otopathology in temporal bones with vestibular schwannoma.</a> Otolaryngol Head Neck Surg. 154 (1), 150-156 (2016).</li>
<li>Sans, A., Bartolami, S., Fraysse, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histopathology+of+the+peripheral+vestibular+system+in+small+vestibular+schwannomas%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Otol%22%5BJournal%5D)">Histopathology of the peripheral vestibular system in small vestibular schwannomas.</a> Am J Otol. 17 (2), 326-324 (1996).</li>
<li>Johnson Chacko, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Growth+and+cellular+patterning+during+fetal+human+inner+ear+development+studied+by+a+correlative+imaging+approach%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Growth and cellular patterning during fetal human inner ear development studied by a correlative imaging approach.</a> BMC Dev Biol. 19 (1), 11(2019).</li>
<li>Taylor, R. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regenerating+hair+cells+in+vestibular+sensory+epithelia+from+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Regenerating hair cells in vestibular sensory epithelia from humans.</a> Elife. 7, e34817(2018).</li>
<li>Warchol, M. E., Lambert, P. R., Goldstein, B. J., Forge, A., Corwin, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regenerative+proliferation+in+inner+ear+sensory+epithelia+from+adult+guinea+pigs+and+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Regenerative proliferation in inner ear sensory epithelia from adult guinea pigs and humans.</a> Science. 259 (5101), 1619-1622 (1993).</li>
<li>Aaron, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selection+criteria+optimal+for+recovery+of+inner+ear+tissues+from+deceased+organ+donors%5BTitle%5D)+AND+%22Otol+Neurotol%22%5BJournal%5D)">Selection criteria optimal for recovery of inner ear tissues from deceased organ donors.</a> Otol Neurotol. 43 (4), e507-e514 (2022).</li>
<li>Vaisbuch, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+Approach+for+rapid+and+minimally+traumatic+recovery+of+human+inner+ear+tissues+from+deceased+organ+donors%5BTitle%5D)+AND+%22Otol+Neurotol%22%5BJournal%5D)">Surgical Approach for rapid and minimally traumatic recovery of human inner ear tissues from deceased organ donors.</a> Otol Neurotol. 43 (4), e519-e525 (2022).</li>
<li>Wang, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+transcriptomic+atlas+reveals+increased+regeneration+in+diseased+human+inner+ear+balance+organs%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Single-cell transcriptomic atlas reveals increased regeneration in diseased human inner ear balance organs.</a> Nat Commun. 15 (1), 4833(2024).</li>
<li>Creighton, F. X., Zhang, L., Ward, B., Carey, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hearing+outcomes+for+an+underwater+endoscopic+technique+for+transmastoid+repair+of+superior+semicircular+canal+dehiscence%5BTitle%5D)+AND+%22Otol+Neurotol%22%5BJournal%5D)">Hearing outcomes for an underwater endoscopic technique for transmastoid repair of superior semicircular canal dehiscence.</a> Otol Neurotol. 42 (10), e1691-e1697 (2021).</li>
<li>Schoo, W. W., Schoo, D. P., Chen, J. X., Carey, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Underwater+plugging+of+superior+canal+dehiscence+via+the+middle+cranial+fossa+is+possible%5BTitle%5D)+AND+%22Otolaryngol+Head+Neck+Surg%22%5BJournal%5D)">Underwater plugging of superior canal dehiscence via the middle cranial fossa is possible.</a> Otolaryngol Head Neck Surg. 169 (6), 1702-1703 (2023).</li>
<li>Basura, G. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+practice+guideline%3A+M%C3%A9ni%C3%A8re%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Otolaryngol+Head+Neck+Surg%22%5BJournal%5D)">Clinical practice guideline: Ménière's disease.</a> Otolaryngol Head Neck Surg. 162 (2_suppl), S1-S55 (2020).</li>
<li>Chandrasekhar, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+practice+guideline%3A+Sudden+hearing+loss+%28Update%29%5BTitle%5D)+AND+%22Otolaryngol+Head+Neck+Surg%22%5BJournal%5D)">Clinical practice guideline: Sudden hearing loss (Update).</a> Otolaryngol Head Neck Surg. 161 (1_suppl), S1-S45 (2019).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>10x リン酸緩衝生理食塩水ストック</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P5493</td><td></td></tr><tr><td>32% パラホルムアルデヒドストック溶液</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>50-980-495</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 抗ウサギ二次抗体</td><td>Jackson Immunoresearch</td><td>111545144</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 568 抗マウス二次抗体</td><td>Jackson Immunoresearch</td><td>115575146</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 647 抗ヤギ二次抗体</td><td>Jackson Immunoresearch</td><td>705607003</td><td></td></tr><tr><td>Balanced Salt Solution</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>14040117</td><td></td></tr><tr><td>ウシ血清アルブミン</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>10711454001</td><td></td></tr>共<tr><td>焦点顕微鏡</td><td>Nikon A1&nbsp;</td><td>A1</td><td></td></tr><tr><td>カバーガラス (18 mm x 18 mm、厚さ #1.5 )</td><td>Corning&nbsp;</td><td>2850-18</td><td></td></tr><tr><td>Endo-Scrub 2 レンズ クリーニング シース</td><td>Medtronic</td><td>IPCES2SYSKIT</td><td></td></tr><tr><td>エチレンジアミン四酢酸 (EDTA) 酸溶液</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E8008</td><td></td></tr><tr><td>ヤギ抗オンコモジュリン抗体</td><td>R&D Systems</td><td>AF6345</td><td></td></tr><tr><td>ホプキンス 0 度望遠鏡</td><td>カールストルツ</td><td></td><td></td>マウス</tr>抗<tr><td>カルレチニン抗体</td><td>BD Biosciences</td><td>610908</td><td></td></tr><tr><td>ProLong Gold 退色防止試薬</td><td>Invitrogen</td><td>P10144</td><td></td></tr><tr><td>ウサギ抗テナシン C 抗体</td><td>ミリポア</td><td>AB19013</td><td></td></tr><tr><td>トリトン X-100</td><td>シグマ・アルドリッチ</td><td>9036-19-5</td><td></td></tr></tbody></table>

迷路切除術中の生理学的条件下での前庭末端器官の収穫

Harvest of Vestibular End-Organs under Physiologic Conditions during Labyrinthectomy

この技術を使用して、ヒトの卵形嚢と外側および上管の膨大部を無傷で採取し、外傷を最小限に抑えました(図2)。図2に見られるように、膨大部は膜管のかなりの部分で採取できます。抗テネイシン-C(細胞外マトリックスタンパク質)および抗オンコモジュリン(パルブアルブミンタンパク質ファミリーの低分子カルシウム結合タンパク質)による免疫蛍光標識では、無傷の1型前庭有毛細胞が示されました(図3)。有毛細胞密度は10,000μm2あたり82でした。これらの結果は、神経上皮への外傷を最小限に抑えてヒトの内耳組織を採取するためのこの技術の有用性を示しています。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67523/67523fig01.jpg"> 
図1:手術のセットアップの図。 外科的セットアップの図:左の乳様突起腔は、外側、上、および後方の半規管とともに示されています。乳様突起腔を平衡塩溶液に沈め、0度内視鏡を使用して乳様突起腔を視覚化し、ダイヤモンドドリルを使用して迷路を開きます。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67523/67523fig01large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67523/67523fig02.jpg"> 
図2:膜状の迷路。 採取した(A)ヒト卵形骨と側方嚢、(B)上管膨大部を5倍の倍率で光学実体顕微鏡で観察。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67523/67523fig02large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67523/67523fig03.jpg"> 
図3:卵形嚢。 共焦点顕微鏡で撮影された40倍の倍率でのヒト卵形の免疫蛍光標識の最大強度投影。Calyxシナプス間隙は、抗テネイシンC抗体(緑)で標識されています。1型前庭細胞を抗腫瘍剤(赤)で染色します。スケールバー:50μmこの <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67523/67523fig03large.jpg" target="_blank">図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>

The living human inner ear is challenging to study because it is encased within dense otic capsule bone that limits access to biological tissue. ...

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迷路切除術中の生理学的条件下での前庭末端器官の収穫

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