Name: 虚血性脳卒中のラットモデルにおける免疫蛍光法による細胞死シグナル伝達の評価 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-03T15:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 32 s
Description: 学ぶ虚血性脳卒中のラットモデルにおける免疫蛍光法による細胞死シグナル伝達の評価方法。MCAOモデルを用いてcathepsin B発現とアポトーシスを解析し、新規治療標的の探索に貢献します。

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<meta charset="utf8"></head><body>ラットMCAO脳卒中モデルにおける細胞死を研究するための免疫蛍光染色

<table><tbody><tr><td>アコヤ ベクトラ ポラリス</td><td>アコヤ バイオサイエンス</td><td>N/A</td><td>ベクトラ ポラリス マルチスペクトル イメージング システム&nbsp;</td></tr><tr><td>無水エタノール</td><td>Chengdu Jinshan Chemical Reagent Co.</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>ブプレノルフィン</td><td>中国西部病院</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>カルプロフェン</td><td>中国西部病院</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>カテプシン-B 抗体</td><td>Abcam</td><td>Ab214428</td><td></td></tr><tr><td>クライオスタット</td><td>LEICA&nbsp;</td><td>LEICA CM 1950</td><td></td></tr><tr><td>デジタルカメラ</td><td>OLYMPUS</td><td>TG-7</td><td></td></tr><tr><td>ヤギ抗ラット IgG (H+L) (FITC conjugated)</td><td>Elabscience</td><td>&nbsp;E-AB-1021</td><td></td></tr><tr><td>ヤギ血清</td><td>Solarbio</td><td>SL038</td><td></td></tr><tr><td>GraphPad Prism 10 ソフトウェア</td><td>N/A</td><td>https://www.graphpad-prism.cn/?c=i&a=prismdownload_cn</td><td></td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>N/A</td><td>https://imagej.net/ij/</td><td></td></tr> <tr><td>免疫組織化学ペン</td><td>Biosharp</td><td>http://www.biosharp.cn/index/product/details/language/en/product_id/2828.html</td><td></td></tr><tr><td>InForm ソフトウェア</td><td>Akoya Biosciences</td><td>バージョン 2.6.0</td><td>マルチスペクトルイメージングシステム用システムソフトウェア&nbsp;</td></tr><tr><td>ヨードフォア消毒液</td><td>Huatian Technology Industry Co.</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>イソフルラン</td><td>RWD ライフサイエンス株式会社</td><td>https://www.rwdstco.com/inhalation-anesthesia-solutions/</td><td></td></tr> <tr>DAPI <td>Solarbio</td><td>S2110</td><td></td>ナイロンモノフィラメント<td>を含む封入剤</td></tr><tr><td></td><td>RWD Life Science Co.</td><td>https://www.rwdstco.com/</td><td></td></tr> <tr><td>最適切削温度(OCT)コンパウンド</td><td>Epredia</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>パラホルムアルデヒド</td><td>Biosharp</td><td>N/A</td><td></td></tr>リン<tr><td>酸緩衝液(PBS)</td><td>Solarbio</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Prism</td><td>GraphPad&nbsp;</td><td>バージョン 10</td><td></td></tr><tr><td>プロテイナーゼ K</td><td>Tiangen</td><td>RT403-02</td><td></td></tr><tr><td>生理食塩水</td><td>Kelun Co.</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Sprague-Dawley ラット</td><td>Huafukang Co.</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>スクロース</td><td>BioFroxx</td><td>1245GR500</td><td></td></tr><tr><td>手術器具</td><td>RWD Life Science Co.</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>TO型透明生物剤&nbsp;&nbsp;</td><td>北京ソーラーバイオサイエンス&ベジンテクノロジー株式会社</td><td>http://www.solarbio.net/</td><td></td></tr> <tr><td>塩化トリフェニルテトラゾリウム (TTC) 溶液</td><td>Solarbio</td><td>G3005</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>BioFroxx</td><td>1139ML100</td><td></td></tr><tr><td>TUNEL キット</td><td>Elabscience</td><td>&nbsp;E-CK-A321</td><td></td></tr></tbody></table>

虚血性脳卒中のラットモデルにおける免疫蛍光法による細胞死シグナル伝達の評価

Evaluating Cell Death Signaling by Immunofluorescence in a Rat Model of Ischemic Stroke

ラットは、MCAO中に120分間の虚血を受け、その後22時間の再灌流が行われます。MCAO手術中の死亡率は最小限で、再灌流期間中は約25%でした。MCAOグループでは有意な脳損傷が観察されたが、シャムグループの大脳では梗塞は観察されなかった(24.87 ± 1.21% vs. 脳全体に対する梗塞領域の合計が0%;MCAO [n = 3] 対 Sham [n = 3]、P &lt; 0.001;図1A、B)。MCAO群では、カテプシンBの免疫反応性は虚血性コアで顕著な増加を示しました（カテプシンB強度はShamの倍率として表される（カテプシンB強度:1.53 ± 0.02 vs. 1.00 ± 0.11;コア [n = 3] 対 シャム [n = 3]、P &lt; 0.01;図 2A,C) および半影皮質 (偽のフォールドとして表されるカテプシン B 強度: 1.73 ± 0.14 対 1....

Stroke is a leading cause of death and disability worldwide. Most cases of stroke are ischemic and result from the occlusion of the middle cerebral artery ...

evaluating-cell-death-signaling-immunofluorescence-rat-model-ischemic

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JoVE Journal

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神経科学

ラットにおける虚血性脳損傷の外科的誘導は、脳卒中の研究に広く使用されているモデルです。ここでは、中大脳動脈の閉塞による局所脳虚血の誘導を示す。組織染色および磁気共鳴イメージングによる結果梗塞の可視化も示されている。...

ラット中大脳動脈の血管縫合閉塞による局所脳虚血モデル

脳虚血の動物モデルは、ストロークの人間の状態をシミュレートするために開発されてきた。このプロトコルは、ラットの虚血性脳卒中のエンドセリン-1（ET-1）誘発中大脳動脈閉塞（MCAO）モデルについて説明します。加えて、重要な考慮事項、利点、およびこのモデルの欠点が議論されている。...

ラットにおけるレーザードップラー血流計の指針と虚血性脳卒中のエンドセリン-1誘発性中大脳動脈閉塞モデル

全身性低血圧と相まって、二国間の頸動脈閉塞は再現重症度と海馬への損傷、その結果、ラットの全脳虚血を生成します。動物の被験者は脳損傷の予測可能なパターンで損なわれて、彼らは便宜上回復し、死亡率は比較的低いです。...

2血管閉塞/低血圧：グローバル脳虚血のラットモデル

脳血流モニタリングは虚血性脳梗塞モデルの精度を向上することが実証されている。技術的な問題は、多くの場合、脳血管研究のためのこの必要不可欠なツールの使用を制限します。このビデオでは、最適化されたシステムは、ラットにおいて腔内中大脳動脈閉塞時の単一またはマルチサイトの血行動態モニタリングを得ることが示されている。...

腔内中大脳動脈閉塞のラット脳卒中モデルにおける脳血流モニタリングのための最適化されたシステム

私たちは、積極的な食細胞のin situラベリングにおける選択のための新しい蛍光技術を提示し、その明確なストローク中の細胞死体オフ。虚血性脳内に存在する食細胞のわずかな割合は、細胞死の隙間に参加しているための方法は、虚血に対する脳の反応を評価するために重要である。...

連結可能な蛍光プローブによる実験脳卒中における細胞死の貪食クリアランスを評価する

&gt;jove_content&lt;脳虚血による脳損傷は、非侵襲的に画像化され、注射可能な放射性プローブである18F-フルオロデオキシグルコースと組み合わせた前臨床陽電子放出断層撮影法を使用してラットで研究することができます。さらに、VOI(Volume of...

と陽電子放射断層撮影法を用いた非侵襲的イメージングとリビングラットにおける脳虚血の分析<sup&gt; 18</sup&gt; F-FDG

神経幹細胞を送達する方法は、注射液または懸濁液に適応可能で、虚血性脳卒中後に一般的な頸動脈(マウス)または外頸動脈(ラット)を介して報告される。注入された細胞は脳のパレンチマ全体に広く分布し、送達後30dまで検出することができる。...

ラットおよびマウス脳への神経幹細胞の動脈内デリバリー:脳虚血への応用

ここでは、ミニ脳卒中モデルでのフローサイトメトリー分析を使用して、虚血性脳卒中後の免疫細胞機能を評価するためのプロトコルを紹介します。この方法は、神経免疫相互作用の詳細な調査を可能にし、他の神経変性疾患の研究にも適応できるため、脳卒中病理における免疫応答の理解を深めることができます。...

ミニ脳卒中マウスモデルにおける神経免疫相互作用の単離とフローサイトメトリー評価

食品または薬剤ペア合図の応答は、禁欲期間の経過とともに増加し、これが再発の行動への感受性の増加に関連する可能性があります。ここでは詳細自己管理スクロースを持つラットではこの"渇望のインキュベーションを"評価するための手順を。...

ラットのショ糖の渇望のインキュベーションを評価するための一般的な方法

虚血性細胞死経路を研究するための性層別ニューロン培養

学ぶ虚血性脳卒中のラットモデルにおける免疫蛍光法による細胞死シグナル伝達の評価方法。MCAOモデルを用いてcathepsin B発現とアポトーシスを解析し、新規治療標的の探索に貢献します。

虚血性脳卒中のラットモデルにおける免疫蛍光法による細胞死シグナル伝達の評価

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