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2025年5月23日
2025年5月23日
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最近の研究では、 C-グリコシドの代謝におけるヒト腸内細菌叢酵素の役割が強調されています。ここでは、分析化学技術(LC-MS/MS および NMR)と構造生物学的アプローチを統合して、これらの C-グリコシド代謝酵素の構造および酵素反応鎖を系統的に特徴付けるための包括的な方法論を紹介します。
Chapters in this video
0:00
Introduction
0:19
Construction of Expression Vector
1:23
Purification of Protein
2:56
Circular Dichroism (CD) Spectrum Data Collection
3:37
Protein Crystal Growth and Optimization
4:27
Data Collection and Structure Determination of Protein Crystals
5:14
Monitoring of DgpA/B/C Activity by HPLC
6:39
Monitoring of DgpA Activity with 2,6-dichlorophenol indophenol (DCPIP) Assay
7:15
Determination of Inhibition Rate of Glucose on the C-glycosidic Bond Cleavage Reaction of Puerarin
7:51
Determination of Kinetic Parameters
8:38
Preparation of Reaction Intermediate Product
9:13
Characterization of Reaction Intermediate Product with LC-MS
9:58
Characterization of Reaction Intermediate Product with NMR
10:40
Representative Results
12:52
Conclusion
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