Name: ヘリコバクター・ピロリおよび抗生物質耐性を検出するための胃粘膜定量的ポリメラーゼ連鎖反応解析 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-03-07T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 23 s
Description: 学ぶ 胃粘膜qPCRを用いたHelicobacter pyloriと抗生物質耐性の迅速検出法。正確な診断により治療戦略を改善し、臨床現場での感染症管理に貢献します。

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<ol><li>Sharndama, H. C., Mba, I. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Helicobacter+pylori%3A+an+up-to-date+overview+on+the+virulence+and+pathogenesis+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Braz+J+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Helicobacter pylori: an up-to-date overview on the virulence and pathogenesis mechanisms.</a> Braz J Microbiol. 53 (1), 33-50 (2022).</li>
<li>Ravikumara, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Helicobacter+pylori+in+children%3A+think+before+you+kill+the+bug%5BTitle%5D)+AND+%22Therap+Adv+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">Helicobacter pylori in children: think before you kill the bug.</a> Therap Adv Gastroenterol. 16 (6), 1-10 (2023).</li>
<li>Reshetnyak, V. I., Burmistrov, A. I., Maev, I. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Helicobacter+pylori%3A+Commensal%2C+symbiont+or+pathogen%5BTitle%5D)+AND+%22World+J+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">Helicobacter pylori: Commensal, symbiont or pathogen.</a> World J Gastroenterol. 27 (7), 545-560 (2021).</li>
<li>Al-Ouqaili, M. T. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Study+of+vacuolating+cytotoxin+A+%28vacA%29+genotypes+of+ulcerogenic+and+non-ulcerogenic+strains+of+Helicobacter+pylori+and+its+association+with+gastric+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Saudi+J+Biol+Sci%22%5BJournal%5D)">Study of vacuolating cytotoxin A (vacA) genotypes of ulcerogenic and non-ulcerogenic strains of Helicobacter pylori and its association with gastric disease.</a> Saudi J Biol Sci. 30 (12), 103867(2023).</li>
<li>Hussein, R. A., Al-Ouqaili, M. T. S., Majeed, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+between+alcohol+consumption%2C+cigarette+smoking%2C+and+Helicobacter+pylori+infection+in+Iraqi+patients+submitted+to+gastrointestinal+endoscopy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Emerg+Med+Trauma+Acute+Care%22%5BJournal%5D)">Association between alcohol consumption, cigarette smoking, and Helicobacter pylori infection in Iraqi patients submitted to gastrointestinal endoscopy.</a> J Emerg Med Trauma Acute Care. 6, 12(2022).</li>
<li>Thrift, A. P., Wenker, T. N., El-Serag, H. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+burden+of+gastric+cancer%3A+Epidemiological+trends%2C+risk+factors%2C+screening+and+prevention%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Clin+Oncol%22%5BJournal%5D)">Global burden of gastric cancer: Epidemiological trends, risk factors, screening and prevention.</a> Nat Rev Clin Oncol. 20 (5), 338-349 (2023).</li>
<li>Liou, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Screening+and+eradication+of+Helicobacter+pylori+for+gastric+cancer+prevention%3A+The+Taipei+global+consensus%5BTitle%5D)+AND+%22Gut%22%5BJournal%5D)">Screening and eradication of Helicobacter pylori for gastric cancer prevention: The Taipei global consensus.</a> Gut. 69 (12), 2093-2112 (2020).</li>
<li>Gao, T. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+burden+and+risk+in+the+Chinese+population+aged+55+years+and+above%3A+A+systematic+analysis+and+comparison+with+the+USA+and+Western+Europe%5BTitle%5D)+AND+%22J+Glob+Health%22%5BJournal%5D)">Cancer burden and risk in the Chinese population aged 55 years and above: A systematic analysis and comparison with the USA and Western Europe.</a> J Glob Health. 14, 04014(2024).</li>
<li>Hussein, R. A., Al-Ouqaili, M. T. S., Majeed, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+of+Helicobacter+pylori+infection+by+invasive+and+non-invasive+techniques+in+patients+with+gastrointestinal+diseases+from+Iraq%3A+A+validation+study%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Detection of Helicobacter pylori infection by invasive and non-invasive techniques in patients with gastrointestinal diseases from Iraq: A validation study.</a> PLoS One. 16 (8), e0256393(2021).</li>
<li>Thung, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Review+article%3A+The+global+emergence+of+Helicobacter+pylori+antibiotic+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Aliment+Pharmacol+Ther%22%5BJournal%5D)">Review article: The global emergence of Helicobacter pylori antibiotic resistance.</a> Aliment Pharmacol Ther. 43 (4), 514-533 (2016).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mutations+in+the+antibiotic+target+genes+related+to+clarithromycin%2C+metronidazole+and+levofloxacin+resistance+in+Helicobacter+pylori+strains+from+children+in+China%5BTitle%5D)+AND+%22Infect+Drug+Resist%22%5BJournal%5D)">Mutations in the antibiotic target genes related to clarithromycin, metronidazole and levofloxacin resistance in Helicobacter pylori strains from children in China.</a> Infect Drug Resist. 13 (1), 311-322 (2020).</li>
<li>Saranathan, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Helicobacter+pylori+Infections+in+the+Bronx%2C+New+York%3A+Surveying+antibiotic+susceptibility+and+strain+lineage+by+whole-genome+sequencing%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Helicobacter pylori Infections in the Bronx, New York: Surveying antibiotic susceptibility and strain lineage by whole-genome sequencing.</a> J Clin Microbiol. 58 (3), e01591-e01619 (2020).</li>
<li>Malfertheiner, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Management+of+Helicobacter+pylori+infection+-+The+Maastricht+IV%2F+Florence+consensus+report%5BTitle%5D)+AND+%22Gut%22%5BJournal%5D)">Management of Helicobacter pylori infection - The Maastricht IV/ Florence consensus report.</a> Gut. 61 (5), 646-664 (2012).</li>
<li>Palma, G. Z. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Occurrence+of+mutations+in+the+antimicrobial+target+genes+related+to+levofloxacin%2C+clarithromycin%2C+and+amoxicillin+resistance+in+Helicobacter+pylori+isolates+from+Buenos+Aires+city%5BTitle%5D)+AND+%22Microb+Drug+Resist%22%5BJournal%5D)">Occurrence of mutations in the antimicrobial target genes related to levofloxacin, clarithromycin, and amoxicillin resistance in Helicobacter pylori isolates from Buenos Aires city.</a> Microb Drug Resist. 23 (3), 351-358 (2017).</li>
<li>Zhang, L., Zhao, M., Fu, X. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gastric+microbiota+dysbiosis+and+Helicobacter+pylori+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Gastric microbiota dysbiosis and Helicobacter pylori infection.</a> Front Microbiol. 14, 1153269(2023).</li>
<li>Peng, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gastric+juice-based+real-time+PCR+for+tailored+Helicobacter+Pylori+treatment%3A+A+practical+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Gastric juice-based real-time PCR for tailored Helicobacter Pylori treatment: A practical approach.</a> Int J Med Sci. 14 (6), 595-601 (2017).</li>
<li>Weingart, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensitivity+of+a+novel+stool+antigen+test+for+detection+of+Helicobacter+pylori+in+adult+outpatients+before+and+after+eradication+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Sensitivity of a novel stool antigen test for detection of Helicobacter pylori in adult outpatients before and after eradication therapy.</a> J Clin Microbiol. 42 (3), 1319-1321 (2004).</li>
<li>Chi, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rapid+and+high-throughput+multiplex+genetic+detection+assay+for+detection%2C+semi-quantification+and+virulence+genotyping+of+Helicobacter+pylori+in+non-invasive+oral+samples%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Infect+Microbiol%22%5BJournal%5D)">A rapid and high-throughput multiplex genetic detection assay for detection, semi-quantification and virulence genotyping of Helicobacter pylori in non-invasive oral samples.</a> Front Cell Infect Microbiol. 13, 1267288(2023).</li>
<li>Zhang, Y. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validation+of+a+high-throughput+multiplex+genetic+detection+system+for+Helicobacter+pylori+identification%2C+quantification%2C+virulence%2C+and+resistance+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Validation of a high-throughput multiplex genetic detection system for Helicobacter pylori identification, quantification, virulence, and resistance analysis.</a> Front Microbiol. 7, 1401(2016).</li>
<li>Gisbert, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Empirical+or+susceptibility-guided+treatment+for+Helicobacter+pylori+infection%3F+A+comprehensive+review%5BTitle%5D)+AND+%22Therap+Adv+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">Empirical or susceptibility-guided treatment for Helicobacter pylori infection? A comprehensive review.</a> Therap Adv Gastroenterol. 13, 1756284820968736(2020).</li>
<li>Bénéjat, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+PCR+for+Helicobacter+pylori+diagnosis.+The+best+tools+available%5BTitle%5D)+AND+%22Helicobacter%22%5BJournal%5D)">Real-time PCR for Helicobacter pylori diagnosis. The best tools available.</a> Helicobacter. 23 (5), e12512(2018).</li>
<li>Vasapolli, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+assessment+of+H.+pylori+infection+to+guide+molecular+antibiotic+resistance+testing%3A+A+combined+endoscopy-gastric+juice+analysis+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Aliment+Pharmacol+Ther%22%5BJournal%5D)">Real-time assessment of H. pylori infection to guide molecular antibiotic resistance testing: A combined endoscopy-gastric juice analysis approach.</a> Aliment Pharmacol Ther. 61 (3), 465-471 (2025).</li>
<li>Hussein, R. A., Al-Ouqaili, M. T. S., Majeed, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+of+clarithromycin+resistance+and+23SrRNA+point+mutations+in+clinical+isolates+of+Helicobacter+pylori+isolates%3A+Phenotypic+and+molecular+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Saudi+J+Biol+Sci%22%5BJournal%5D)">Detection of clarithromycin resistance and 23SrRNA point mutations in clinical isolates of Helicobacter pylori isolates: Phenotypic and molecular methods.</a> Saudi J Biol Sci. 29 (1), 513-520 (2022).</li>
<li>Wang, Y. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+systematic+review+and+meta-analysis+of+genotypic+methods+for+detecting+antibiotic+resistance+in+Helicobacter+pylori%5BTitle%5D)+AND+%22Helicobacter%22%5BJournal%5D)">A systematic review and meta-analysis of genotypic methods for detecting antibiotic resistance in Helicobacter pylori.</a> Helicobacter. 23 (2), e12467(2018).</li>
<li>Egli, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+the+diagnostic+performance+of+qPCR%2C+Sanger+sequencing%2C+and+whole-genome+sequencing+in+determining+clarithromycin+and+levofloxacin+resistance+in+Helicobacter+pylori%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Infect+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Comparison of the diagnostic performance of qPCR, Sanger sequencing, and whole-genome sequencing in determining clarithromycin and levofloxacin resistance in Helicobacter pylori.</a> Front Cell Infect Microbiol. 10, 596371(2020).</li>
<li>Liu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relationship+between+Helicobacter+pylori+infection+and+colorectal+polyp%2Fcolorectal+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22World+J+Gastrointest+Surg%22%5BJournal%5D)">Relationship between Helicobacter pylori infection and colorectal polyp/colorectal cancer.</a> World J Gastrointest Surg. 16 (4), 1008-1016 (2024).</li>
<li>Oliver, A. S., Wu, F., Chen, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+gastric+microbiota+in+gastric+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Gut+Microbes%22%5BJournal%5D)">The role of gastric microbiota in gastric cancer.</a> Gut Microbes. 11 (5), 1220-1230 (2020).</li>
<li>Hulten, K. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+culture+with+antibiogram+to+next-generation+sequencing+using+bacterial+isolates+and+formalin-fixed%2C+paraffin+embedded+gastric+biopsies%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Comparison of culture with antibiogram to next-generation sequencing using bacterial isolates and formalin-fixed, paraffin embedded gastric biopsies.</a> Gastroenterology. 161 (5), 1433-1442 (2021).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>バスインキュベータ</td><td>ーALLSHENG</td><td>MK2000-2</td><td>一定の温度環境を提供します</td></tr><tr><td>バイオセーフティキャビネット</td><td>ハイアール</td><td>HR1500-<img alt="方程式1" src="/files/ftp_upload/67704/67704eq01.jpg" style="margin: auto;">B2</td><td></td></tr><tr><td>Centrifuge</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>THERMO ST16R</td><td>チューブの壁に残った液体を遠心分離します。</td></tr><tr><td>Chelex-100 </td><td>シグマ</td><td>C7901</td><td>樹脂</td></tr><tr><td>胃鏡 生検鉗子</td><td>ボストン・サイエンティフィック・コーポレーション</td><td></td><td>胃粘膜のサンプリング</td></tr><tr><td>ヘリコバクター・ピロリ 23S rRNA遺伝子およびgyrA遺伝子変異検出キット</td><td>江蘇モール・バイオサイエンス</td><td>CFDA 20223400137</td><td>ピロリ菌Mおよび薬剤耐性遺伝子(クラリスロマイシンおよびキノロン)のためのqPCR検出キット核</td></tr><tr><td>酸抽出試薬</td><td>Jiangsu Mole Bioscience</td><td>SEDA 20150076</td><td>DNA抽出用</td></tr><tr><td>SDSソフトウェア</td><td>Applied Biosystems</td><td>7300/7500</td><td>データ解析</td></tr><tr><td>サーモシルサーモフィ</td><td>ッシャーサイエンティフィック</td><td>ABI 7500</td><td>ピロリ菌および薬剤耐性遺伝子(クラリスロマイシンおよびキノロン)のqPCR検出用</td></tr> ボル<tr><td>テックスミキサー</td><td>JOANLAB</td><td>VM-5005</td><td>混合試薬用</td></tr></tbody></table>

ヘリコバクター・ピロリおよび抗生物質耐性を検出するための胃粘膜定量的ポリメラーゼ連鎖反応解析

Gastric Mucosa Quantitative Polymerase Chain Reaction Analysis for Detecting Helicobacter pylori and Antibiotic Resistance

qPCRによる胃組織におけるピロリ菌感染と抗生物質耐性の評価 ピロリ菌を同定するためのqPCRアッセイは、尿素A遺伝子を標的として実施し、23S rRNAおよびgyrA遺伝子の特異的変異を調べることにより、抗生物質耐性を確認しました(表1)。3つのグループすべてのCT値で表される品質保証データは、許容範囲内に収まり、テスト時にサンプルが標準状態にあったことを示し、結果の信頼性を確保しました。この研究では、実験デザインの信頼性を確認するために、結果が異なる5つのサンプル(A、B、C、E、Fとラベル付け)を選択しました(図2)。H.ピロリ菌の検査で陽性となったサンプル「A」は、H.ピロリ菌の検出可能な範囲内にしかCT値を示しておらず、患者が両方の抗生物質に感受性があることを示唆しており、どちらの薬剤による治療も成功する可能性を示して...

Helicobacter pylori is a main pathogen that infects nearly half of the global population and is threatening public health due to its increasing antibiotic ...

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Medicine

医学

このプロトコルは、ストリングテストを通じて ヘリコバクターピロリ...

定量的ポリメラーゼ連鎖反応(qPCR)に基づく ヘリコバクターピロリ 感染と抗生物質耐性の迅速診断

このプロトコルは、定量的ポリメラーゼ連鎖反応と組み合わせた非侵襲的な便サンプリングを採用して、 ヘリコバクターピロリ...

便定量ポリメラーゼ連鎖反応解析による ヘリコバクター・ピロリ 菌感染と抗生物質耐性の検出

ヘリコバクター・ピロリの診断法は数多くありますが、その中でも量子ドット免疫蛍光法はヘリコバクター・ピロリを迅速にタイピングして検出することができ、臨床治療の決定の基礎となります。この記事では、ヘリコバクター・ピロリ菌のタイピングと検出における量子ドット技術の応用価値について詳しく説明します。...

量子ドットラベリング技術を用いた ヘリコバクター・ピロリ の病原性の迅速検出とタイピング

ダブル抗体サンドイッチ検出技術による ヘリコバクター・ピロリ 菌感染の糞便抗原の迅速検出

定量的PCRを用いて、我々は十分に確立されたニワトリCAMモデルは定量的に遠隔臓器へのヒト腫瘍細胞の転移を分析するために使用できる方法を示します。...

鳥類胚のモデルを使用して、がんの転移の定量的解析

胃バイパスラットモデルを用いて多数の研究が最近ルー-en-Y法胃バイパス操作の基礎となる生理学的メカニズムを明らかにするために行われている。この記事では、この実験的なツールの利点と限界を理解することが私たちの公開胃バイパスラットモデルの技術的および実験の詳細を示し、議論することを目指しています。...

ラットにおけるルー-en-Y法胃バイパス手術

質量分析法の進歩により、組織の宿主におけるタンパク質発現および変更のハイスループット解析を可能にした。細胞下分画と疾患モデルと組み合わせることで、定量的質量分析法とバイオインフォマティクス、生物学的システムに新しい特性を明らかにすることができます。本明細書に記載される方法は、心臓病の設定でクロマチン関連タンパク質を解析し、他に容易に適用可能である...

病におけるクロマチンプロテオームの定量的解析

複雑な組織塊、器官からの腫瘍に、種々の細胞成分から構成されている。我々は、タンパク質の発現に基づいて細胞起源だけでなく、電池特性を解読するスペクトルアンミキシングに続くマルチパラメータ免疫蛍光染色と組み合わせたマルチ蛍光標識トランスジェニックマウスを利用して組織内の細胞の表現型の寄与を明らかにした。...

細胞の起源、タイプ、および相互作用の可視化のための蛍光組織移植に続いて定量的マルチスペクトル解析

大動脈洞と上行大動脈の精密切片化と組織化学的および免疫組織化学的分析を組み合わせて、マウスモデルのアテローム性動脈硬化病変を定量化し、特徴付ける手順について説明します。...

マウス大動脈洞におけるアテローム性動脈硬化症の病変の定量分析とキャラクタリゼーション

早期の胃癌では、手術の目的は原発腫瘍を含む遠位胃を正確に切除することです。これを行うには、特に完全腹腔鏡手術において、腫瘍の正確な局在化が重要です。このプロトコルは、腹腔鏡下胃亜全摘術における術中胃内視鏡検査の手順を説明しています。...

胃腺癌のための腹腔鏡下手術で腫瘍局在化のための術中胃内視鏡

学ぶ 胃粘膜qPCRを用いたHelicobacter pyloriと抗生物質耐性の迅速検出法。正確な診断により治療戦略を改善し、臨床現場での感染症管理に貢献します。

ヘリコバクター・ピロリおよび抗生物質耐性を検出するための胃粘膜定量的ポリメラーゼ連鎖反応解析

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