Name: アデノ随伴ウイルスベクターの低速逆行性腎盂注射 による マウス腎臓への効果的かつ安全な遺伝子送達 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-01T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 24 s
Description: 学ぶマウス腎臓へのAAVベクター低速逆行性腎盂注射による遺伝子送達法。近位尿細管への効率的な導入と組織損傷のない安全性を確認し、腎臓研究と遺伝子治療に応用可能です。

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<table><tbody><tr><td>0.45 &mu;m PVDF シリンジフィルター</td><td>MilliporeSigma</td><td>SLHVR33RS</td><td></td></tr><tr><td>1.5 mL マイクロ遠心管&nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td>05-408-129</td><td></td></tr><tr><td>15 mL ポリプロピレンチューブ</td><td>Corning</td><td>352097</td><td></td></tr><tr><td>16% パラホルムアルデヒド (PFA)</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>15710</td><td></td></tr><tr><td>250 mL 遠心瓶</td><td>Fisher Scientific</td><td>055641S24</td><td></td></tr><tr><td>2F シリコンチューブ</td><td>Sai Infusion Technologies</td><td>SIL-2-50&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>25G バタフライ針</td><td>Medex Supply</td><td>26708</td><td></td></tr><tr><td>2-メチルブタン</td><td>MilliporeSigma</td><td>MX0760</td><td></td></tr><tr><td>2x qPCR 反応バッファー</td><td>Fisher Scientific</td><td>43-676-59</td><td>Power SYBR Green PCR Master Mix</td></tr><tr><td>30G 針</td><td>Becton-Dickinson &amp; Co</td><td>305106</td><td></td></tr><tr><td>50 mL ポリプロピレンチューブ</td><td>Corning</td><td>430291</td><td></td></tr><tr><td>5-0 モノフィラメント縫合糸</td><td>Ethicon</td><td>Y463G</td><td></td></tr><tr><td>5 M NaCl</td><td>Lonza</td><td>51202</td><td></td></tr><tr><td>6-0 吸収性縫合糸</td><td>Ethicon</td><td>J489G</td><td></td></tr><tr><td>7.5% Mini-PROTEAN TGX プレキャスト プロテインゲル、10ウェル、30 &micro;L</td><td>Bio-Rad</td><td>4561023</td><td></td></tr><tr><td>Amersham ImageQuant 800 Western ブロットイメージングシステム (Cytiva)</td><td>Cytiva</td><td>29459405</td><td></td></tr><tr><td>Amicon 100 kDa MWCO、15 mL チューブ</td><td>Millipore Sigma</td><td>UFC910024</td><td></td></tr><tr><td>抗アクアポリン 2 (AQP2) 抗体</td><td>Abcam</td><td>ab199975</td><td>集合管細胞のマーカー</td></tr><tr><td>抗 Na-K-2Cl 共輸送体 2 (NKCC2) 抗体</td><td>StressMarq Biosciences</td><td>SPC-401</td><td>厚い上行脚細胞のマーカー</td></tr><tr><td>抗ウサギ IgG Alexa Fluor 647 抗体</td><td>Jackson ImmunoResearch</td><td>111-605-144</td><td></td></tr><tr><td>抗ウィルムス腫瘍 1 (WT1) 抗体</td><td>Abcam</td><td>ab89901</td><td>ポドサイトのマーカー</td></tr><tr><td>Beckman Coulter OptiSeal チューブ、 ポリプロピレン、29.9 mL</td><td>Fisher Scientific</td><td>NC9691210</td><td></td></tr><tr><td>Beckman Coulter OPTISEAL TUBES</td><td>Fisher Scientific</td><td>NC9611575</td><td></td></tr><tr><td>Benzonase</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>1016970001</td><td></td></tr><tr><td>ウシ血清アルブミン (BSA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>5470</td><td></td></tr><tr><td>遠心超濾管</td><td>MilliporeSigma</td><td>UFC9100</td><td>Amicon 100 kDa MWCO、15 mL</td></tr><tr><td>セラミックビーズチューブ</td><td>Fisher Scientific</td><td>15-340-154</td><td></td></tr><tr><td>セシウム塩化物</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C3032-1KG</td><td></td></tr><tr><td>クランプ適用鉗子</td><td>Fine Science Tools</td><td>00071-14</td><td></td></tr><tr><td>クローズドループヒートパッド</td><td>Stryker Medical</td><td>8002-062-012</td><td></td></tr><tr><td>コットンチップアプリケーター</td><td>Puritan</td><td>806-WC</td><td></td></tr><tr><td>カバーガラス</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-541B</td><td></td></tr><tr><td>クライオスタットマイクロトーム</td><td>Tanner Scientific</td><td>TN50</td><td></td></tr><tr><td>湾曲した鉗子</td><td>Fine Science Tools</td><td>11052-10</td><td></td></tr><tr><td>湾曲型マイクロ血管クリップ</td><td>Kleinert-Kutz</td><td>65145</td><td>腎動脈および腎静脈用クランプ </td></tr><tr><td>透析カセット</td><td>Fisher Scientific</td><td>PIA52976</td><td></td></tr><tr><td>DNA 抽出キット</td><td>Qiagen</td><td>57704</td><td>QIAamp MinElute Virus Spin Kit</td></tr><tr><td>D-ソルビトール</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S6021-1KG</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco's 改良 Eagle 培養基- 高グルコース</td><td>Corning</td><td>15-013-CV</td><td>DMEM-高グルコース (4.5 g/L)</td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Fisher Scientific</td><td>15-575-020</td><td></td></tr><tr><td>エタノール</td><td>Decon Laboratories</td><td>2716GEA</td><td></td></tr><tr><td>胎児ウシ血清 (FBS)</td><td>VWR</td><td>89510-186</td><td></td></tr><tr><td>ガスタイトロングラスシリンジ</td><td>Hamilton</td><td>1710 TLL</td><td></td></tr><tr><td>グルタルアルデヒド溶液</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G6257</td><td></td></tr><tr><td>ヒートセラピーポンプ</td><td>Kent Scientific</td><td>HTP-1500</td><td></td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Sigma Aldrich</td><td>H4034-100G</td><td></td></tr><tr><td>ホイスト 33342</td><td>Invitrogen</td><td>H3570</td><td></td></tr><tr><td>ホモジェナイザー</td><td>Fisher Scientific</td><td>15-340-163</td><td></td></tr><tr><td>ヒト胚腎 (HEK) 293 細胞</td><td>Agilent</td><td>240073</td><td></td></tr><tr><td>氷バケツ</td><td>Fisher Scientific</td><td>07-210-104</td><td></td></tr><tr><td>注入シリンジポンプ</td><td>Harvard Apparatus</td><td>70-4507</td><td></td></tr><tr><td>イソフルラン</td><td>Piramal Critical Care</td><td>NDC 66794-017-10</td><td></td></tr><tr><td>L-グルタミン</td><td>Fisher Scientific</td><td>25030-081</td><td></td></tr><tr><td>液体ブロッカーペン</td><td>Ted Pella</td><td>22309</td><td></td></tr><tr><td>Lotus tetragonolobus レクチン (LTL)- フルオレスセイン</td><td>Vector Laboratories</td><td>FL-1321-2</td><td>近位尿細管のマーカー</td></tr><tr><td>塩化マグネシウム (MgCl2)</td><td>MilliporeSigma</td><td>M1028</td><td></td></tr><tr><td>メロキシカム</td><td>VetOne</td><td>NDC 86136-012-10</td><td>鎮痛剤</td></tr><tr><td>顕微鏡ガラススライド</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-550-15</td><td></td></tr><tr><td>マウンティング媒体</td><td>SouthernBiotech</td><td>0100-01</td><td></td></tr><tr><td>針ホルダー</td><td>Fine Science Tools</td><td>12501-13</td><td></td></tr><tr><td>OCT コンパウンド</td><td>Sakura Finetek</td><td>4583</td><td></td></tr><tr><td>眼科用軟膏</td><td>Bausch &amp; Lomb</td><td>NDC 24208-313-3

アデノ随伴ウイルスベクターの低速逆行性腎盂注射 による マウス腎臓への効果的かつ安全な遺伝子送達

Effective and Safe Gene Delivery to the Mouse Kidney via Slow Retrograde Renal Pelvis Injection of Adeno-Associated Virus Vectors

The development of effective in vivo tools and methods for gene delivery to the kidney is crucial for advancing basic kidney research and gene therapy for ...

effective-safe-gene-delivery-to-mouse-kidney-via-slow-retrograde

Research

JoVE Journal

Biology

生物学

このビデオでは、マウスの子犬における組換えアデノ随伴ウイルスベースの遺伝子導入を実演しています。この方法は、標的細胞における遺伝子発現の研究に役立ちます。...

組換えアデノ随伴ウイルスベースの遺伝子導入:げっ歯類モデルにおける導入遺伝子導入および心臓特異的発現のための技術

出典:Pourshafie, N., et al.げっ歯類の神経筋疾患を治療するための組換えアデノ随伴ウイルス血清型9を用いたマイクロRNAの全身送達J. Vis. Exp.

脊髄および眼球筋萎縮症マウスモデルにおける組換えアデノ随伴ベクターの注入

起源の臓器への癌細胞の移植は、新規治療法を評価するための有用な前臨床モデルとして役立つことができる。 MB49膀胱癌細胞は、膀胱内注入後の膀胱内に成長させることができる。このプロトコルは、腫瘍移植およびアデノウイルス引渡しのために、マウスの膀胱のカテーテル法を示しています。...

遺伝子送達研究のための同所膀胱癌モデル

説明されている耳介後の外科的アプローチは、失血と動物の死亡率を最小限に抑えながら、マウスの蝸牛スカラティンパニへの迅速かつ直接的な送達を可能にします。この方法は、丸い窓の膜を介して出生後のマウスに分子、薬理、およびウイルスを送達する蝸牛療法に使用できます。...

円窓膜を介してマウスインナーイヤーにウイルスにより媒介遺伝子送達のための手術方法

この論文では、マウスの心臓における遺伝子発現を操作するための組換えアデノ随伴ウイルス9（rAAV9）ベクターを調製する方法について記載しています。...

マウスハーツでの遺伝子を過剰発現またはノックダウンするrAAV9の調製

ここで我々 はマイクロ Rna 組換えアデノ随伴ウイルス血清型 9 を使用して神経筋疾患のマウスモデルでの配信をについて説明します。単一の末梢投与マウスにおける筋と運動ニューロン、miRNA の機能を検討し、治療の潜在的なin vivoする機会を提供することで持続的な miRNA...

マイクロ Rna の齧歯動物の神経筋疾患を治療する遺伝子組換えアデノ随伴ウイルス血清型 9 を使用しての全身配信

本研究の目的は、成体マウスにおける新規な遺伝子サブ送達技術を用いて、脊髄アデノ随伴ウイルス9（AAV9）媒介遺伝子送達の効力および安全性を開発および検証することであった。...

成体マウスにおける子宮頸部アデノ随伴ウイルス9（AAV9）ベクター送達

このプロトコルでは、具体的には腎臓における導入遺伝子発現を生成する腎盂を介してマウス腎臓にプラスミド DNA...

腎臓蛋白質の非ウイルス性発現の流体力学的腎盂注入

マウス膀胱の生体内で尿道カテーテル法, エレクトロポレーションによる尿路上皮細胞への DNA のプラスミッドの配信手法について述べる.膀胱疾患の土着のマウス ・...

電気穿孔法によるマウス膀胱尿路上皮にプラスミド DNA 配信法

ここでは、成体マウスにアデノ随伴ウイルス(AAV)を全身投与するためのマウス側尾静脈注射の最適化されたプロトコルについて詳しく説明します。さらに、AAV形質導入を評価するために一般的に使用されるアッセイのプロトコルについても説明します。...

成体マウスにおける側方尾静脈注射によるアデノ随伴ウイルスの一貫した送達

このプロトコルは、AAV8送達small...

アデノ随伴ウイルス血清型8(AAV8)送達低分子ヘアピンRNAの脾腔内注射による肝臓における効率的な遺伝子ノックダウン

学ぶマウス腎臓へのAAVベクター低速逆行性腎盂注射による遺伝子送達法。近位尿細管への効率的な導入と組織損傷のない安全性を確認し、腎臓研究と遺伝子治療に応用可能です。

アデノ随伴ウイルスベクターの低速逆行性腎盂注射によるマウス腎臓への効果的かつ安全な遺伝子送達

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