Name: 出芽酵母 γ-セクレターゼによるアミロイドベーターゼ産生に影響を与える遺伝子、突然変異、および化学物質をスクリーニングするためのアルツハイマー病のモデル (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-24T12:50:00.000+00:00
Duration: 11 min 57 s
Description: 学ぶアルツハイマー病のγ-セクレターゼ調節メカニズム。出芽酵母を用いた再構成系でFAD関連変異の影響を解析し、抑制変異や化学修飾因子をスクリーニングしてAbeta42産生を低減する方法です。

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<ol><li>Wolfe, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unrvaling+the+complexity+of+%CE%B3-secretase%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Unrvaling the complexity of γ-secretase.</a> Semin Cell Dev Biol. 105, 3-11 (2020).</li>
<li>Selkoe, D. J., Hardy, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+amyloid+hypothesis+of+Alzheimer%27s+disease+at+25+years%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">The amyloid hypothesis of Alzheimer's disease at 25 years.</a> EMBO Mol Med. 8 (6), 595-608 (2016).</li>
<li>Zhou, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Notch+Signaling+pathway%3A+architecture%2C+disease%2C+and+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Signal+Transduct+Target+Ther%22%5BJournal%5D)">Notch Signaling pathway: architecture, disease, and therapeutics.</a> Signal Transduct Target Ther. 7 (1), 95(2022).</li>
<li>Takasugi, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+presenilin+cofactors+in+the+gamma-secretase+complex%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">The role of presenilin cofactors in the gamma-secretase complex.</a> Nature. 422 (6930), 438-441 (2003).</li>
<li>Wolfe, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two+transmembrane+aspartates+in+pre-senilin-1+required+for+presenilin+endoproteolysis+and+gamma-secretase+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Two transmembrane aspartates in pre-senilin-1 required for presenilin endoproteolysis and gamma-secretase activity.</a> Nature. 398 (6727), 513-517 (1999).</li>
<li>Valdez-Gaxiola, C. A., Rosales-Leycegui, F. R., Gaxiola-Rubio, A., Moreno-Ortiz, J. M., Figuera, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early-+and+late-onset+Alzheimer%27s+disease%3A+two+sides+of+the+same+coin%5BTitle%5D)+AND+%22Diseases%22%5BJournal%5D)">Early- and late-onset Alzheimer's disease: two sides of the same coin.</a> Diseases. 12 (6), 110(2024).</li>
<li>Nordvall, G., Lundkvist, J., Snadin, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gamma-secretase+modulators%3A+a+promising+route+for+the+treatment+of+Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Mol+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Gamma-secretase modulators: a promising route for the treatment of Alzheimer's disease.</a> Front Mol Neurosci. 16, 129740(2023).</li>
<li>Sun, L., Li, X., Shi, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+biology+of+intramembrane+proteases%3A+mechanistic+insights+from+rhomboid+and+S2P+to+%CE%B3-secretase%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Struct+Biol%22%5BJournal%5D)">Structural biology of intramembrane proteases: mechanistic insights from rhomboid and S2P to γ-secretase.</a> Curr Opin Struct Biol. 37, 97-107 (2016).</li>
<li>Bruckner, A., Polge, C., Lentze, N., Auerbach, D., Schlattner, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Yeast+two-hybrid%2C+a+powerful+tool+for+systems+biology%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Yeast two-hybrid, a powerful tool for systems biology.</a> Int J Mol Sci. 10 (6), 2763-2788 (2009).</li>
<li>Futai, E., Yagishita, S., Ishiura, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nicastrin+is+dispensable+for+gamma-secretase+protease+activity+in+the+presence+of+specific+mutations%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Nicastrin is dispensable for gamma-secretase protease activity in the presence of specific mutations.</a> J Biol Chem. 284 (19), 13013-13022 (2009).</li>
<li>Yagishita, S., Futai, E., Ishiura, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+reconstitution+of+gamma-secretase+activity+using+yeast+microsomes%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Res+Commun%22%5BJournal%5D)">In vitro reconstitution of gamma-secretase activity using yeast microsomes.</a> Biochem Biophys Res Commun. 377 (1), 141-145 (2008).</li>
<li>Futai, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Suppressor+mutations+for+presenilin+1+familial+Alzheimer+Disease+mutants+modulate+%CE%B3-secretase+activities%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Suppressor mutations for presenilin 1 familial Alzheimer Disease mutants modulate γ-secretase activities.</a> J Biol Chem. 291 (1), 435-446 (2016).</li>
<li>Futai, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advanced+yeast+models+of+familial+Alzheimer+disease+expressing+FAD-linked+presenilin+to+screen+mutations+and+%CE%B3-secretase+modulators%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Advanced yeast models of familial Alzheimer disease expressing FAD-linked presenilin to screen mutations and γ-secretase modulators.</a> Methods Mol Biol. 2049, 403-417 (2019).</li>
<li>Gietz, R. D., Schiestl, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transforming+yeast+with+DNA%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Transforming yeast with DNA.</a> Methods Mol Cell Biol. 5 (5), 255-269 (1995).</li>
<li>Inoue, H., Nojima, H., Okayama, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+efficiency+transformation+of+Escherichia+coli+with+plasmids%5BTitle%5D)+AND+%22Gene%22%5BJournal%5D)">High efficiency transformation of Escherichia coli with plasmids.</a> Gene. 96 (1), 23-28 (1990).</li>
<li>Sanger, F., Nicklen, S., Coulson, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DNA+sequencing+with+chain-terminating+inhibitors%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">DNA sequencing with chain-terminating inhibitors.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 74 (12), 5463-5467 (1977).</li>
<li>Imai, S., Cai, T., Yoshida, C., Tomita, T., Futai, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Specific+mutations+in+presenilin+1+cause+conformational+change+in+%CE%B3-secretase+to+modulate+amyloid+%CE%B2+trimming%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biochem%22%5BJournal%5D)">Specific mutations in presenilin 1 cause conformational change in γ-secretase to modulate amyloid β trimming.</a> J Biochem. 165 (1), 37-46 (2019).</li>
<li>Watanabe, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Specific+mutations+in+Aph1+cause+%CE%B3-secretase+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Specific mutations in Aph1 cause γ-secretase activation.</a> Int J Mol Sci. 23 (1), 507(2022).</li>
<li>Suzuki, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Specific+mutations+near+the+amyloid+precursor+protein+cleavage+site+increase+%CE%B3-secretase+sensitivity+and+modulate+amyloid-%CE%B2+production%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Specific mutations near the amyloid precursor protein cleavage site increase γ-secretase sensitivity and modulate amyloid-β production.</a> Int J Mol Sci. 24 (4), 3970(2023).</li>
<li>Zinser, E., Daum, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+biochemical+characterization+of+organelles+from+the+yeast%2C+Saccharomyces+cerevisiae%5BTitle%5D)+AND+%22Yeast%22%5BJournal%5D)">Isolation and biochemical characterization of organelles from the yeast, Saccharomyces cerevisiae.</a> Yeast. 11 (6), 493-536 (1995).</li>
<li>Imamura,, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+gamma-secretase+activity+by+helical+beta-peptide+foldamers%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Chem+Soc%22%5BJournal%5D)">Inhibition of gamma-secretase activity by helical beta-peptide foldamers.</a> J Am Chem Soc. 131 (21), 7353-7359 (2009).</li>
<li>Han, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((OCIAD2+activates+%CE%B3-secretase+to+enhance+amyloid+%CE%B2+production+by+interacting+with+nicastrin%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Mol+Life+Sci%22%5BJournal%5D)">OCIAD2 activates γ-secretase to enhance amyloid β production by interacting with nicastrin.</a> Cell Mol Life Sci. 71 (13), 2561-2576 (2014).</li>
<li>Self, W. K., Holtzman, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emerging+diagnostics+and+therapeutics+for+Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Emerging diagnostics and therapeutics for Alzheimer's disease.</a> Nat Med. 29, 2187-2199 (2023).</li>
<li>Solopova, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fatal+iatrogenic+cerebral+%CE%B2-amyloid-related+arteritis+in+a+woman+treated+with+lecanemab+for+Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Fatal iatrogenic cerebral β-amyloid-related arteritis in a woman treated with lecanemab for Alzheimer's disease.</a> Nat Commun. 14 (1), 8220(2023).</li>
<li>Zhang, Y., Chen, H., Li, R., Sterling, K., Song, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amyloid+%CE%B2-based+therapy+for+Alzheimer%27s+disease%3A+challenges%2C+successes+and+future%5BTitle%5D)+AND+%22Signal+Transduct+Target+Ther%22%5BJournal%5D)">Amyloid β-based therapy for Alzheimer's disease: challenges, successes and future.</a> Signal Transduct Target Ther. 8 (1), 248(2023).</li>
<li>Xia, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%CE%B3-Secretase+and+its+modulators%3A+twenty+years+and+beyond%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Lett%22%5BJournal%5D)">γ-Secretase and its modulators: twenty years and beyond.</a> Neurosci Lett. 701, 162-169 (2019).</li>
<li>Muttenthaler, M., King, G. F., Adams, D. J., Alewood, P. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trends+in+peptide+drug+discovery%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Drug+Discov%22%5BJournal%5D)">Trends in peptide drug discovery.</a> Nat Rev Drug Discov. 20 (4), 309-325 (2021).</li>
<li>Souza, J. M., Goncalves, B. D. C., Gomez, M. V., Vieira, L. B., Ribeiro, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+toxins+as+therapeutic+tools+to+treat+neurodegenerative+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Animal toxins as therapeutic tools to treat neurodegenerative disease.</a> Front Pharmacol. 9, 145(2018).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td><強い>抗体<強い></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>抗アミロイド&ベータ;(N)(82E1)抗体</td><td>IBL</td><td>カタログ#10323</td><td></td></tr><tr><td>抗Aph1a抗体、245-265(C末端)抗体</td><td>バイオレジェンド</td><td>キャット# 823101</td><td></td></tr><tr><td>抗FLAG(M2)抗体</td><td>シグマ</td><td>猫#F3165</td><td></td></tr><tr><td>抗Gal4抗体</td><td>シグマ</td><td>カテゴリー# G9293</td><td></td></tr><tr><td>抗HA(12CA5)抗体</td><td>シグマ</td><td>カタログ#11 583 816 001</td><td></td></tr><tr><td>抗ニカストリン抗体</td><td>ケミコン</td><td>カタログ# AB5890</td><td></td></tr><tr><td>抗PGK1抗体(22C5D8)</td><td>アブカム</td><td>Cat# ab197960</td><td></td></tr><tr><td>抗PS1 N末端(G1Nr)またはループ抗体(GIL)抗体</td><td>高杉 et.al、J. Biol. Chem., 277, 50198-50205</td><td></td><td></td></tr><tr><td>反ラビット&nbsp;IgG、HRP結合抗体</td><td>細胞シグナル伝達</td><td>カタログ#7074</td><td></td></tr><tr><td>抗モルモット IgG-HRP</td><td>サンタクルーズ・バイオテクノロジー</td><td>Cat# sc-2438</td><td></td></tr><tr><td>抗マウスIgG、HRP結合抗体</td><td>細胞シグナル伝達</td><td>カテゴリー#7076</td><td></td></tr><tr><td><強力株>細菌性および酵母株<強力></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td><エム>大腸菌DH5&α;</td><td>インビトロジェン</td><td>キャット# 18265017</td><td></td></tr><tr><td><>S. cerevisiae PJ-69-4A</td><td>ジェームズ・P. 他他著、遺伝学 144:1425-1436(1996年)</td><td></td><td></td></tr><tr><td><強>化学物質、ペプチド、組換えタンパク質<強></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>(3,5-ジフルオロフェニルセチル)-Ala-Phg-OBut (DAPT)</td><td>ペプチド研究所</td><td>猫番号# 3219-v</td><td></td></tr><tr><td>アミロイド&βタンパク質(ヒト、1-38)</td><td>ペプチド研究所</td><td>猫番号# 4484-v</td><td></td></tr><tr><td>アミロイド&ベータタンパク質(ヒト、1-40)</td><td>ペプチド研究所</td><td>カタログ#4307-v</td><td></td></tr><tr><td>アミロイド&ベータタンパク質(ヒト、1-42)</td><td>ペプチド研究所</td><td>Cat#4349-v</td><td></td></tr><tr><td>アミロイド&βタンパク質(ヒト、1-43)</td><td>ペプチド研究所</td><td>Cat#4370-v</td><td></td></tr><tr><td>抗痛薬、ジヒドロ塩酸塩</td><td>ペプチド研究所</td><td>猫#4062</td><td></td></tr><tr><td>アプロチニン</td><td>シグマ</td><td>カタログ# A1153</td><td></td></tr><tr><td>チャプソ</td><td>道津島</td><td>カタログ#343-05163</td><td></td></tr><tr><td>キモスタチン</td><td>シグマ</td><td>カタログ# C7268</td><td></td></tr><tr><td>ジイソプロピルフルオロリン酸塩(DIFP)</td><td>和子化学</td><td>カタログ# 049-18921</td><td></td></tr><tr><td>L685,458</td><td>ペプチド研究所</td><td>カタログ#4394-v</td><td></td></tr><tr><td>ルププチン</td><td>ペプチド研究所</td><td>猫#4041</td><td></td></tr><tr><td>N-p-トシル-L-フェニルアラニンクロロメチルケトン(TPCK)</td><td>シグマ</td><td>猫#T4376</td><td></td></tr><tr><td>N&alpha;-p-トシル-L-リシンクロロメチルケトン(TLCK)</td><td>シグマ</td><td>カタログ# T7254</td><td></td></tr><tr><td>o-ニトロフェニル&β;-D-ガラクトピラノシド(ONPG)</td><td>シグマ</td><td>カタログ# N1127</td><td></td></tr><tr><td>p-アミノベンザミジン(pABA)、ジヒドロ塩酸塩</td><td>シグマ</td><td>キャット# 857661</td><td></td></tr><tr><td>ペプスタチンA</td><td>シグマ</td><td>カタログ#P5318</td><td></td></tr><tr><td>フェナントロリン(PNT)</td><td>シグマ</td><td>猫#P9375</td><td></td></tr><tr><td>フェニルメチルスルホニルフッ化物(PMSF)</td><td>シグマ</td><td>カタログ#P7626</td><td></td></tr><tr><td>ホスファチジルコリン(PC)、卵黄、タイプXVI-E</td><td>シグマ</td><td>カタログ#P3556</td><td></td></tr><tr><td>Taq DNAポリメラーゼ</td><td>宝</td><td>Cat# R001A</td><td></td></tr><tr><td>ティオルファン</td><td>シグマ</td><td>猫#T6031</td><td></td></tr><tr><td><ストロング>市販アッセイキット、その他の材料、器具</ストロング></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>ベータグローアッセイシステム</td><td>プロメガ</td><td>猫 #E4720</td><td></td></tr><tr><td>バイオラッドタンパク質アッセイキット</td><td>バイオ・ラッド</td><td>キャット#5000001</td><td></td></tr><tr><td>ガラスビーズ、酸洗い(425-600 & mu;m)</td><td>シグマ</td><td>猫#G8772</td><td></td></tr><tr><td>ImageQuant LAS4000</td><td>GEヘルスケア</td><td>ImageQuant LAS4000</td><td></td></tr><tr><td>QuikChange サイト指向変異誘発キット</td><td>アジレント</td><td>キャット# 200518</td><td></td></tr></tbody></table>

出芽酵母 γ-セクレターゼによるアミロイドベーターゼ産生に影響を与える遺伝子、突然変異、および化学物質をスクリーニングするためのアルツハイマー病のモデル

Saccharomyces cerevisiae Models of Alzheimer's Disease to Screen Genes, Mutations, and Chemicals Affecting Amyloid Beta Production by &#947;-Secretase

&#947;-Secretase is a protease complex embedded in the cell membrane, consisting of the catalytic presenilin subunits (PS1 or PS2) and three additional ...

saccharomyces-cerevisiae-models-alzheimer-s-disease-to-screen-genes

Research

JoVE Journal

Neuroscience

神経科学

トランスジェニックを用いてアッセイするβ-アミロイドの毒性 C.エレガンスモデル

ここではでプラスミド過剰発現の画面を説明...

ハイスループット酵母プラスミドの過剰発現の画面

私たちは、ワームでamylopathiesの側面を研究するための方法を説明...

A<em&gt;線虫（Caenorhabditis elegans）</emAmylopathyの研究のための&gt;モデルシステム

細胞表面タンパク質の輸送を比較的容易に研究されているが、細胞内タンパク質の輸送を可視化することははるかに困難です。ここでは、光活性化GFPを組み込んだコンストラクトを使用して、正確にダウンストリームの区画にゴルジ体からのアミロイド前駆体タンパク質に従い、その隙間に従うようにする方法を実証します。...

光活性化GFPでAPPの細胞内輸送をイメージング

私たちは、アルツハイマー病のげっ歯類モデルにおいて単核食細胞によって脳アミロイドβ（Aβ）食作用のインシリコモデリング （q3DISM） で定量的な3Dのための方法論を開発しました。この方法は、 インビボで実質的に任意の食イベントの定量のために一般化することができます。...

定量的3Dインシリコモデリング（q3DISM）

ここでは、βアミロイドーシスおよびタウオパチーのトランスジェニックマウスモデルにおける認知および機能的運動行動に対するインビボでの有効性を示す化合物をスクリーニングするために用いることができる、段階的な行動スクリーニングアプローチを記載する。これらの方法は、短期および作業記憶課題における活性について化合物をスクリーニングするために最適化される。...

アミロイド-βおよびタウのトランスジェニックマウスモデルにおける自発的交互作用の評価、新規対象の認識および肢の把握Neuropathology

我々 は正常に 2 つの基質特異的 γ-セクレターゼ アッセイを生成されます。ここに提示両方のセルベースのアッセイは、ホタル ルシフェラーゼ レポーターのアウトプットを介して γ...

Γ セクレターゼによるアミロイド前駆体タンパク質と細胞を用いたルシフェラーゼ レポーター アッセイ プラットフォーム ノッチ胸の谷間の定量的測定

マトリックス支援レーザー脱離/イオン化に基づくイメージング質量分析法 (MALDI 分子研) 分子イメージングは、生体試料中の複数検体の同時マッピングをことができます。ここでは、アルツハイマー病、脳アミロイドアンギオパチー サンプル MALDI IMS を使用しての脳組織のアミロイド β タンパク質の可視化と検出のためのプロトコルを提案する.

マトリックス支援レーザー脱離イオン化質量顕微鏡を用いたひと脳のアミロイド β の堆積物の可視化

このプロトコル ヒストン翻訳後修飾 (PTM) ALS およびパーキンソン病に関連するタンパク質の過剰発現に関連して発生するレベルのゲノム変化を特徴づける実験手順の概要を説明します。出芽酵母のモデル。SDS ページの分離後個々...

酵母神経変性認知症予備モデルにおけるヒストン翻訳後修飾変化の特性

このプロトコルは、細胞を固定化するアルギネートの急速な物理的ゲル化による細胞封入方法を示す。得られたマイクロビーズは、時間をかけてアミロイドβの制御および持続的な分泌を可能にし、インビトロおよびインビボモデルで分泌されたアミロイドβの効果を研究するために使用することができる。...

アルツハイマー病のモデリングに用いられるアミロイドβ分泌アルギン酸マイクロビーズの製造

パーキンソン病の病態を研究・理解するためには、α-シヌクレインの in vivo...

ヒト化酵母モデルを用いたα-シヌクレインの毒性と凝集の研究法

学ぶアルツハイマー病のγ-セクレターゼ調節メカニズム。出芽酵母を用いた再構成系でFAD関連変異の影響を解析し、抑制変異や化学修飾因子をスクリーニングしてAbeta42産生を低減する方法です。

出芽酵母 γ-セクレターゼによるアミロイドベーターゼ産生に影響を与える遺伝子、突然変異、および化学物質をスクリーニングするためのアルツハイマー病のモデル

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