カレンデュラ・オフィシナリスLの成長と花の発達中のフラボノイド含有量。

私たちの研究では、アクセスしやすく信頼性の高い比色法を使用して総フラボノイドを定量し、植物化学研究室でのデータ分析を容易にし、治療特性を持つ化合物の研究をサポートします。

カレンデュラに含まれるフラボノイド含有量は、最適な収穫時期を特定し、その薬用および商業的可能性を最大限に高めるために、花の発育中に研究されます。

当社のプロトコルは、少量のサンプルを使用してフラバノイドを定量し、溶媒の使用を最適化し、植物材料を使用した分析が制限される高感度で効率的なマイクロ技術です。

[講師]まず、植物材料を摂氏40度の強制空気オーブンで48時間乾燥させます。乾いたらオーブンから取り出し、乾燥させた材料を紙の封筒に移し、常温で暗所で保管します。液体窒素を使用して植物材料を凍結し、粉砕の準備をします。次に、冷凍材料を磁器乳鉢で均一な質感になるまで粉砕します。各サンプルから粉砕された材料を25ミリグラムの量りを量ってサンプルを調製します。計量した材料に500マイクロリットルの80%メタノールを加えます。フラボノイドを抽出するには、混合物を摂氏70度で1時間インキュベートします。インキュベーション後、混合物を731 gで13分間遠心分離します。次に、得られた抽出物を150マイクロリットル取り、それに37マイクロリットルの80%メタノールを加えてアリコートを調製します。50マイクロリットルの抽出物を取り、100マイクロリットルの1モル酢酸カリウムと100マイクロリットルの10%塩化アルミニウムを加えます。蒸留水を使用して混合物の総量を最大5ミリリットルにして溶液を完成させます。分光光度計の吸光度波長を415ナノメートルに設定し、溶液の吸光度を測定します。50、100、175、および350ミリグラム/ミリリットルの範囲のケルセチン溶液を調製して、検量線を生成します。検量線サンプルを調製するには、検量線の最後の点から500マイクロリットルのケルセチン溶液をピペットで取り、100マイクロリットルの10%塩化アルミニウムと100マイクロリットルの1モル酢酸カリウムを溶液に加えます。次に、1.5 ミリリットルの 80% メタノールと 2.8 ミリリットルの蒸留水を加えます。校正溶液を室温で40分間休ませます。分光光度計の吸光度波長を415ナノメートルに設定し、検量線サンプルの吸光度を測定して検量線を構築します。最後に、乾燥材料のグラムあたりのフラボノイド濃度とフラボノイド含有量を計算します。この表は、植物ごとのフラボノイド濃度とフラボノイド生産量が、カレンデュラの頭花の最初の芽形成から満開および果実の発達までどのように変化するかをまとめたものです。ステージ8から11の間に、より高いレベルの総フラボノイド濃度が観察され、がく片が分離されたつぼみから完全に開いた頭花に対応しました。がく片が結合したつぼみなどの初期段階や、老化した頭状花などの後期段階では、フラボノイド濃度は完全に開いた頭状花と比較して22%から27%低かった。この図は、花の発達段階にわたるカレンデュラの頭状花、舌状花、管状花の乾物中の総フラボノイド濃度の測定値を示しています。この結果は、さまざまな花の構造と段階間のフラボノイド濃度の変化を理解することが、カレンデュラの頭花のフラボノイド含有量を最大化するための最適な収穫時期を決定するのに役立つことを示唆しています。