Name: 表皮ケラチノサイト増殖動態を研究するためのタイムラプス写真によるライブセルイメージング (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-06T13:20:00.000+00:00
Duration: 7 min 21 s
Description: 学ぶタイムラプス写真によるライブセルイメージング法で、ヒト表皮ケラチノサイトの系譜追跡と増殖動態を解析する手法。幹細胞と前駆細胞の挙動を可視化し、乾癬や加齢に関連する疾患治療への応用を目指す。

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<ol><li>Mateu, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+differences+between+neonatal+and+adult+fibroblasts+and+keratinocytes%3A+Donor+age+affects+epithelial-mesenchymal+crosstalk+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Functional differences between neonatal and adult fibroblasts and keratinocytes: Donor age affects epithelial-mesenchymal crosstalk in vitro.</a> Int J Mol Med. 38 (4), 1063-1074 (2016).</li>
<li>Handl, J., Čapek, J., Majtnerová, P., Báčová, J., Roušar, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+repeated+passaging+on+the+susceptibility+of+human+proximal+tubular+HK-2+cells+to+toxic+compounds%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Res%22%5BJournal%5D)">The effect of repeated passaging on the susceptibility of human proximal tubular HK-2 cells to toxic compounds.</a> Physiol Res. 69 (4), 731-738 (2020).</li>
<li>Moran, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+human+keratinocyte+cell+lines+for+barrier+studies%5BTitle%5D)+AND+%22JID+Innov%22%5BJournal%5D)">Characterization of human keratinocyte cell lines for barrier studies.</a> JID Innov. 1 (2), 100018(2021).</li>
<li>Seo, M. -D., Kang, T. J., Lee, C. H., Lee, A. -Y., Noh, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HaCaT+keratinocytes+and+primary+epidermal+keratinocytes+have+different+transcriptional+profiles+of+cornified+envelope-associated+genes+to+T+helper+cell+cytokines%5BTitle%5D)+AND+%22Biomol+Ther%22%5BJournal%5D)">HaCaT keratinocytes and primary epidermal keratinocytes have different transcriptional profiles of cornified envelope-associated genes to T helper cell cytokines.</a> Biomol Ther. 20 (2), 171-176 (2012).</li>
<li>Jahn, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Different+immortalized+keratinocyte+cell+lines+display+distinct+capabilities+to+differentiate+and+reconstitute+an+epidermis+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Different immortalized keratinocyte cell lines display distinct capabilities to differentiate and reconstitute an epidermis in vitro.</a> Exp Dermatol. 33 (1), e14985(2024).</li>
<li>Xiao, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short+cell+cycle+duration+is+a+phenotype+of+human+epidermal+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">Short cell cycle duration is a phenotype of human epidermal stem cells.</a> Stem Cell Res Ther. 15 (1), 76(2024).</li>
<li>Hirose, T., Kotoku, J., Toki, F., Nishimura, E. K., Nanba, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Label-free+quality+control+and+identification+of+human+keratinocyte+stem+cells+by+deep+learning-based+automated+cell+tracking%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Label-free quality control and identification of human keratinocyte stem cells by deep learning-based automated cell tracking.</a> Stem Cells. 39 (8), 1091-1100 (2021).</li>
<li>Roshan, A., Murai, K., Fowler, J., Simons, B. D., Nikolaidou-Neokosmidou, V., Jones, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+keratinocytes+have+two+interconvertible+modes+of+proliferation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Human keratinocytes have two interconvertible modes of proliferation.</a> Nat Cell Biol. 18 (2), 145-156 (2016).</li>
<li>Abegaze, B., Ijeh, N., Vittimberga, B., Ghadially, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generating+primary+cultures+for+the+purpose+of+keratinocyte+live+cell+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Generating primary cultures for the purpose of keratinocyte live cell imaging.</a> J Vis Exp. , In Press (2024).</li>
<li>Piedrafita, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+single-progenitor+model+as+the+unifying+paradigm+of+epidermal+and+esophageal+epithelial+maintenance+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">A single-progenitor model as the unifying paradigm of epidermal and esophageal epithelial maintenance in mice.</a> Nat Commun. 11 (1), 1429(2020).</li>
<li>Ścieżyńska, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+culture+of+human+primary+keratinocytes-a+methods+review%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Isolation and culture of human primary keratinocytes-a methods review.</a> Exp Dermatol. 28 (2), 107-112 (2019).</li>
<li>Mansoury, M., Hamed, M., Karmustaji, R., Al Hannan, F., Safrany, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+edge+effect%3A+A+global+problem.+The+trouble+with+culturing+cells+in+96-well+plates%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Rep%22%5BJournal%5D)">The edge effect: A global problem. The trouble with culturing cells in 96-well plates.</a> Biochem Biophys Rep. 26, 100987(2021).</li>
<li>Malin-Mayor, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+reconstruction+of+whole-embryo+cell+lineages+by+learning+from+sparse+annotations%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Automated reconstruction of whole-embryo cell lineages by learning from sparse annotations.</a> Nat Biotechnol. 41 (1), 44-49 (2023).</li>
<li>Waliman, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+cell+lineage+reconstruction+using+label-free+4D+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Automated cell lineage reconstruction using label-free 4D microscopy.</a> Genetics. 228 (2), iyae135(2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>96ウェルイメージロックプレート</td><td>サルトリウス</td><td>BA-04856</td><td>96ウェルプレートを使用する場合、機械対応のマイクロプレートを推奨します。</td></tr><tr><td>24ウェルプレート</td><td>コーニング</td><td>3524</td><td>24ウェルプレートを使用する場合、機械対応のマイクロプレートを推奨します。</td></tr><tr><td>アンホテリシンB、50 mL</td><td>コーニング</td><td>30-003-CF</td><td>5倍(原装100倍)に希釈すればPSAは5倍、メディア交換は1倍</td></tr><tr><td>エピライフ、50mL</td><td>ギブコ</td><td>MEP1500CA</td><td>S7を加え、プリモシンを考えます</td></tr><tr><td>IncuCyte S3</td><td>サルトリウス</td><td>4637</td><td>イメージャー(Zoom/SX5対応の代替品)</td></tr><tr><td>ペニシリン/ストレプトマイシン、100 mL</td><td>コーニング</td><td>30-002-Cl</td><td>5倍に薄めてください(100倍のストックで提供されています)</td></tr><tr><td>プリモシン</td><td>インビボジェン</td><td>ANT-PM-05</td><td>500mLの培地につき1mL</td></tr><tr><td>補遺 シーズン7</td><td>ギブコ</td><td>S0175</td><td>エピライフに追加</td></tr></tbody></table>

表皮ケラチノサイト増殖動態を研究するためのタイムラプス写真によるライブセルイメージング

Live Cell Imaging with Time Lapse Photography to Study Epidermal Keratinocyte Proliferation Kinetics

Live-cell imaging is an evolving and somewhat challenging method to study keratinocyte behavior in vitro. Historically, keratinocyte division behavior was ...

live-cell-imaging-with-time-lapse-photography-to-study-epidermal

Research

JoVE Journal

Biochemistry

生物化学

リアルタイムでイメージング胚組織では、長期間にわたって挑戦されています。ここでは、高い空間分解能と時間分解能で長時間ニワトリ脊髄の細胞とサブ細胞の変化を監視するためのアッセイを示す。この手法は、神経系や胚の他の地域に適応することができます。...

開発神​​経上皮における細胞挙動の高解像度のライブイメージング

我々は、気孔の分化を文書化、開発の数日間にわたって表皮の共焦点イメージングのための植物の子葉を固定化するためにチャンバースライドやメディアを使用してプロトコルを記述します。フルオロフォアタグ付きタンパク質は、細胞分裂や細胞型分化の過程でそれらの可能な役割の理解を深め、表現と細胞内局在によって動的に追跡することができます。...

の長期、高分解能共焦点タイムラプスイメージング<em&gt;シロイヌナズナ子葉</em発芽過程&gt;表皮

タイムラプスイメージングは​​、特定の行動のパラメータと異なる遺伝的病変の間に相関があるかどうかを判断するために乳癌リスクの遺伝子改変モデルマウス由来の初代前腫瘍性乳腺上皮細胞の挙動を評価するために使用される。...

乳がんの遺伝子改変マウスモデル由来の初代前癌乳腺上皮細胞のタイムラプスイメージング

このプロトコルは、単一細胞の解像度で、生体内で 、リアルタイムで多細胞相互作用の延長タイムラプスイメージングを実行するための多光子顕微鏡の使用を記載しています。...

腫瘍微小環境におけるリアルタイム多細胞ダイナミクスの拡張タイムラプス生体内イメージング

ここでは、TIP60 枯渇 MCF10A 乳房の上皮細胞を用いた創傷治癒のアッセイで細胞遊走のリアルタイム モニタ リングを提案します。生細胞イメージング...

乳腺上皮細胞移行 TIP60 の一時的な枯渇後のライブ イメージング

形態学的変化は、活性化後の免疫応答性線維芽細胞で起こり、細胞募集の変化を促進する。遺伝子組み換え線維芽細胞特異的タンパク質1(FSP1)-creと組み合わせて2光子イメージングを利用する。tdTomatoフロキセドストップフロキシング(TB/TB)マウスラインと緑色蛍光タグ付きリポ多糖-FITCは、真皮線維芽細胞におけるリポ多糖類の非常に特異的な取り込みおよび生体内の形態変化を示すことができる。...

皮膚における遺伝的にタグ付けされたレポーター細胞の生体内2色2光子イメージング

ここでは、スピンドル形成と人工的進行のダイナミクスを評価するプロトコルを提示する。当社のタイムラプスイメージングの応用により、ユーザーは、人芽細胞の様々な段階で細胞を同定し、人芽細胞の欠陥を追跡および同定し、抗マイト薬への曝露時にスピンドルダイナミクスと人工細胞の運命を分析することができます。...

水動紡錘摂動後のメタフェイズタイミングと細胞運命のダイナミクスを評価するライブ細胞イメージング

ここでは、3D懸濁液培養における表皮スフェロイドの系統的培養のためのプロトコルについて説明する。このプロトコルは、様々な上皮組織タイプで使用し、いくつかのヒト疾患および状態のモデリングのための幅広い用途を有する。...

ケラチノサイト幹細胞の可塑性をモデル化する高スループット表皮球面培養システムの確立

このプロトコルは、倒立共焦点顕微鏡を使用して生体内イメージングを簡素化する新しいツールを提供します。...

倒立共焦点顕微鏡での上皮組織動態を長期モニタリングするための合理化された生体内イメージングアプローチ

反復漂白拡張多重性(IBEX)と市販のヌクレオチド標識アッセイ(Click-iT...

組織サンプル中の皮膚細胞の表現型と増殖状態を評価するためのハイスループットイメージングおよび分析ワークフロー

このプロトコールは、生細胞イメージングで使用するための新たに得られた(継代0)ケラチノサイトの培養を概説しています。...

ケラチノサイト生細胞イメージングのための初代培養物の生成

学ぶタイムラプス写真によるライブセルイメージング法で、ヒト表皮ケラチノサイトの系譜追跡と増殖動態を解析する手法。幹細胞と前駆細胞の挙動を可視化し、乾癬や加齢に関連する疾患治療への応用を目指す。

表皮ケラチノサイト増殖動態を研究するためのタイムラプス写真によるライブセルイメージング

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