Name: 反復漂白法を用いた担腫瘍組織の三次元イメージングは、マルチプレキシック性アプローチを拡張します (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-04-25T13:50:00.000+00:00
Duration: 7 min 16 s
Description: 学ぶ反復漂白法を用いたマルチプレックス免疫蛍光法で、腹膜転移の三次元構造を可視化する手法です。腫瘍微小環境の免疫細胞浸潤と空間分布を解析し、免疫療法の標的発見に貢献します。

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</ol>

<table><tbody><tr><td>Alexa Fluor Plus 750 ファロイジン</td><td>Invitrogen</td><td>A30105</td><td>F-アクチン色素</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 抗ヒト CD206 (MMR) 抗体</td><td>BioLegend</td><td>321114</td><td>抗体</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 抗ヒト CD31 抗体</td><td>BioLegend</td><td>303110</td><td>抗体</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 抗ヒト CD4 抗体</td><td>BioLegend</td><td>300519</td><td></td></tr>抗体 <tr><td>Alexa Fluor 488抗ヒトHLA-DR抗体</td><td>BioLegend</td><td>307656</td><td>抗体</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488抗マウス/ヒトCD44抗体</td><td>BioLegend</td><td>103016</td><td>抗体</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 594 抗ヒトCD45抗体</td><td>BioLegend</td><td>304060</td><td></td></tr>抗体 <tr><td>Alexa Fluor 647抗カルレチニン抗体[EP1798]</td><td>Abcam</td><td>ab214244抗体</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 647抗ヒトCD3抗体</td><td>BioLegend</td><td>300416</td><td>抗体</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 647 抗ヒトCD8抗体</td><td>BioLegend</td><td>344726</td><td>抗体</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 647 抗ヒトポドプラニン抗体</td><td>BioLegend</td><td>337007</td><td>抗体</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 647 抗ビメンチン抗体</td><td>BioLegend</td><td>677807</td><td>抗体</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 647 CD68抗体 (KP1)</td><td>Santa Cruz</td><td>sc-20060AF647</td><td></td></tr>抗体 <tr><td>Alexa Fluor 750 Cytokeratin, pan抗体(AE-1/AE-3)</td><td>Novus</td><td>NBP2-33200AF750</td><td></td></tr>抗体 <tr><td>Alexa Fluor 750 ヒトα-平滑筋アクチン抗体</td>R<td>&;D</td><td>IC1420S</td><td>抗体</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 CD20 モノクローナル抗体 (L26) eBioscience</td><td>Thermo Fisher</td><td>53-0202-82</td><td>抗体</td></tr><tr><td>抗生物質 抗真菌薬</td><td>Gibco</td><td>15240096</td><td>サプリメント収穫培地</td></tr><tr><td>BioMed Clear Resin (Form 3)</td>プラットフォーム <td>+ インキュベーションプレート BSA</td>Sigma A7906-500g に使用する <td>FormLabs</td><td>RS-F2-BMCL-01</td> 樹脂</tr><tr><td></td><td></td><td></td><td>ブロッキング ソリューション コンポーネント</td></tr>スライダー CleanStation DT3&nbsp の<tr>切断に使用される鋳<td>造アクリル 1/32 インチ厚</td><td></td><td></td><td>の素材</td></tr><tr><td>。</td><td>Stratasys</td><td>DT3</td> ハイ<td>トアジャスターと外蓋コンテナ、標本の後処理</td></tr><tr><td>。</td><td>McKesson</td><td>870203</td><td>ペレーティング テーブルから準備テーブルへの組織の移動</td></tr><tr><td>CorelDraw&nbsp;</td><td>レーザー切断用のベクターベースのデザインファイルを準備するための</td><td>CorelDRAWソフトウェア Cytofix</td><td></td></tr><tr><td></td><td>BD Bioscience</td><td>554655</td><td>固定</td></tr><tr><td>ディッシュ 15 cm</td><td>ファルコン</td><td>353025</td><td>取り付け時に使用するディ</td></tr><tr><td>ッシュ ディッシュ 35 mm No. 1.5 カバースリップ 14 mm ガラス直径 コーティングなし</td><td>Matek</td><td>P35G-1.5-14-C</td><td>イメージングディッシュ</td></tr><tr><td>DMEM (グルコースなし)</td><td>Gibco</td><td>11966025</td><td>収穫培地</td></tr><tr><td>Fc Block BD</td><td>Bioscience</td><td>564220</td><td>ブロッキング溶液コンポーネント</td></tr><tr><td>Form 3B+</td><td>Formlabs</td><td>Form 3B+</td><td>プリンターはプラットフォーム + インキュベーションプレートに使用</td></tr><tr><td>Form Cure</td><td>Formlabs</td><td>FH-CU-01</td><td>プラットフォーム + インキュベーションプレートの後処理</td></tr><tr><td>Form Wash</td><td>Formlabs</td><td>FH-WA-01</td><td>プラットフォーム + インキュベーションプレート</td></tr><tr>の後処理<td>GrabCAD Print</td><td>GrabCAD</td><td>GrabCAD Stratasysプリンター用モデルを準備する</td><td>GrabCAD GrabCAD印刷</td>ソフトウェア</tr><tr><td>Hoechst 33342 10 mg/mL</td><td>Biotium</td><td>40046</td><td>核色素</td></tr><tr><td>J826 Prime 3Dプリンター</td><td>Stratasys</td><td>J826</td>プリンターは<td>高さ調節器と外蓋に使用</td></tr>されます <tr><td>LAS X</td><td>ライカ</td><td>LAS X</td><td>共焦点ソフトウェア</td></tr><tr><td>レーザー切断システム&nbsp;</td><td>ユニバーサルレーザーシステム</td>ズ<td>ULS PLS6.150D</td><td>CO2レーザー切断は、スライダーに使用</td></tr>されます <tr>水<td>素化ホウ素リチウム</td><td>STREM Chemicals</td><td>93-0397</td><td>漂白薬品</td></tr><tr><td>PBS、pH 7.4</td><td>Gibco</td><td>10010023</td><td>ベース 洗浄、ブロッキング、染色用のバッファー</td></tr><tr><td>PreForm</td><td>FormLabs</td><td>PreForm プリンター用モデルを準備するための FormLabs</td><td>PreForm</td> ソフトウェア</tr> シル<tr><td>ク縫合糸&nbsp;2-0&nbsp;</td><td>エティコン</td><td>A305。O35</td><td>プラットフォームに組織を固定</td></tr><tr><td>Stellaris 8 WLL 共焦点顕微鏡</td><td>Leica</td><td>STELLARIS 8</td><td>共焦点イメージング&nbsp;</td></tr><tr><td>シリンジフィルター</td><td></td><td></td>フィルター <td>ab溶液</td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>American Bio</td><td>AB02025-00100</td><td>透過試薬、ブロッキング溶液成分</td></tr><tr><td>Vero ContactClear</td><td>Stratasys</td><td>CTT610、</td><td>高さ調節器と外蓋に使用</td>4 KG 樹脂</tr><tr><td>加温</td>トレイ <td>スプリング USA</td><td>ST-1220</td><td>メディアとティッシュを暖かく保つ</td></tr><tr><td>水、蒸留</td><td>Gibco</td><td>15230-170</td><td>LiBH4用希釈液</td></tr></tbody></table>

反復漂白法を用いた担腫瘍組織の三次元イメージングは、マルチプレキシック性アプローチを拡張します

Three-Dimensional Imaging of Tumor-Bearing Tissue Using the Iterative Bleaching Extends Multiplexity Approach

腹膜は、腹壁の表面を覆う厚さ1mm未満の膜状構造で、腹部臓器の表面と隣接しています。これは、脂肪細胞、リンパ球、マクロファージ、線維芽細胞、血管、リンパ管が点在する表面の中皮とその下にある結合組織で構成されています。腹膜悪性腫瘍は、ほとんどの場合、腹部腫瘍転移(例えば、卵巣がんまたは胃がん)18 に起因し、または頻度は低いが、腹膜の原発腫瘍(例えば、中皮腫)19に起因します。これらのしばしば小さな(&lt; cm)腫瘍病変は非常に複雑ですが、概説された手法を使用した3D特性評価に適しています。最大5つの共焦点セクションを投影して、プラットフォームに取り付けられたサンプル全体を表示します(図4、左上隅の挿入図)。3つの一次標識抗体(AF488-CD44、AF594-CD45、およびAF647-ポドプラニン)と核色素HoechstをIBEXの1回戦(IBEX1、 図4)に使用しました。腫瘍病変は、CD44とポドプラニンに対して二重陽性であり、乳頭状中皮腫に特徴的な核の配置を示すロゼット様構造によって明らかになります。
抗ポドプラニンと抗CD44の両方が非腫瘍細胞を認識するため、腫瘍細胞は細胞形態と2つの抗体を用いて同定されました。これは、抗ポドプラニンを介したリンパ管の検出と、CD44抗体の免疫細胞のサブセットへの結合によって証明されています。次に、3D投影のレンダリングに最適化されたZステップサイズで、高解像度のタイルスキャン形式を使用して、より小さな関心領域(ROI)をキャプチャします(図5A)。プラットホームを反復染色手順で採取し、同じROIをIBEXサイクル1〜6で画像化しました。腫瘍(黄色のボックス)と腫瘍-三次リンパ構造(TLS)インターフェース(青いボックス)の代表的な画像を図5B-Mにまとめました。 
TLSの存在とCD3陽性細胞の密度は、免疫細胞の有意な浸潤20と、おそらく免疫調節薬21に対する応答性を示している。注目すべきは、図6の異なる光学セクションのスタック投影の比較で示されているように、TLSと腫瘍病変の大部分は組織の異なるZ深さに存在し、3Dイメージングの利点と、2Dイメージングを3D構造に適用した場合の潜在的な生物学の見逃しを強調しています。これらの病変の 3D 特性は、図 5 の個々の病変のボリューム レンダリングを描いたムービー ファイル (ムービー 1-12) でより明確になります。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67869/67869fig01.jpg"> 
図1:腹膜腫瘍の3Dプリンティングから3Dイメージングまでのワークフロー。 このプロトコルは、腫瘍担存腹膜組織から 3D マルチプレックス画像を調製するための一連の 5 つのステップで構成されています。(1)ティッシュレシーブプラットフォーム、イメージングアダプター部品、インキュベーションプレートの印刷(2)ティッシュの調達と取り付け手順。(3)パラホルムアルデヒドによる固定。(4)IBEX染色およびイメージングサイクル。(5)イメージングソフトウェアによる3D再構成。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67869/67869fig01large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67869/67869fig02.jpg"> 
図2:3Dイメージング用の組織インターフェースを備えたハードウェアコンポーネント。 (A)イメージングアダプター内のプラットフォームアセンブリの概略図。(B)9ウェルインキュベーションプレート。(C)イメージアダプター部品の組み立て時の写真。(D)診断腹腔鏡検査中に観察された中皮腫を含む腹膜。(E)プラットフォームへのティッシュの取り付け。(F,G)プラットフォームに取り付けられた腫瘍担存腹膜。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67869/67869fig02large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67869/67869fig03.jpg"> 
図3:IBEXサイクルのタイムライン概略図。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67869/67869fig03large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67869/67869fig04.jpg"> 
図4:IBEX1パネルを使用したインキュベーション後のプラットフォームの概要。 IBEX1パネル(Hoechst、AF488-CD44、AF594-CD45、AF647-Podoplanin)とのインキュベーション後のプラットフォーム全体の最大投影。破線の円は腫瘍を強調しています。挿入図:イメージングプラットフォームに取り付けられた腫瘍形成腹膜の写真。スケールバー:1 mm。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67869/67869fig04large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67869/67869fig05.jpg"> 
図5:選択したプラットフォーム領域の高解像度免疫蛍光画像。 (A)IBEX1パネル(Hoechst、AF488-CD44、AF594-CD45、AF647-Podoplanin)とのインキュベーション後に取得された56タイルのZスタック画像の最大投影。黄色の長方形:パネル(B-G)に示されている腫瘍病変。青色の長方形:(H-M)に示す腫瘍-三次リンパ系リンパ管構造界面。(B-G)ボリュームレンダリングの IBEX パネル 1-6 を使用した 1 つの個々の腫瘍病変。(B)IBEX1、緑:CD44、赤:CD45、シアン:ポドプラニン。(C)IBEX2、緑:CD20、赤:F-アクチン、シアン:CD3。(D)IBEX3、緑:CD8、赤:CD4、シアン:panCK。(E)IBEX4、グリーン:CD31、シアン:CD68。(F)IBEX5、緑:CD206、シアン:カルレチニン。(G)IBEX6、緑:ビメンチン、赤:HLADR。(H-M)ボリュームレンダリングのIBEXパネル1-6との1つの個々の腫瘍-三次リンパ系リンパ系構造界面。(H)IBEX1、緑:CD44、赤:CD45、シアン:ポドプラニン。(I)IBEX2、緑:CD20、赤:F-アクチン、シアン:CD3。(J)IBEX3、緑:CD4、赤:パンCK、シアン:CD8。(K)IBEX4、緑:CD31、赤:SMA、シアン:CD68。(L)IBEX5、緑:CD206、シアン:カルレチニン。(M)IBEX6、グリーン:HLADR、シアン:ビメンチン。すべてのパネル、青:Hoechst。スケールバー:(A、1 mm);(B-M、250μm)。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67869/67869fig05large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67869/67869fig06.jpg"> 
図6:シミュレートされた2Dイメージング。 リミテッド(10個の光学切片)とフルスタック(102個の光学切片)の投影を比較すると、2Dシミュレーションにおける組織コンテキストの喪失が確認されています。(A)セクション30〜40(10μm)の最大投影。(B)セクション85〜95の最大投影(10μm)。(C)セクション1〜102の最大投影(~100μm)。すべてのパネル、IBEX2(Hoechst、AF488-CD20、AF647-CD3、AF790-phalloidin)。スケールバー:200μmこの <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67869/67869fig06large.jpg" target="_blank">図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
表1:各IBEXパネルに使用した抗体。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67869/Table%201_IBEX%20panels.xlsx" target="_blank">この表をダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
動画1:IBEXパネル1 (青:Hoechst、緑:CD44、赤:CD45、シアン:ポドプラニン)による個々の病変のボリュームレンダリングのアニメーション化。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67869/Movie1_IBEX1.mp4" target="_blank">この映画をダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
動画2:IBEXパネル2 (青:Hoechst、緑:CD20、赤:F-actin、シアン:CD3)による個々の病変のボリュームレンダリングのアニメーション化。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67869/Movie2_IBEX2.mp4" target="_blank">この映画をダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
動画3:IBEXパネル3 (青:Hoechst、緑:CD8、赤:CD4、シアン:panCK)による個々の病変のボリュームレンダリングのアニメーション化。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67869/Movie3_IBEX3.mp4" target="_blank">この映画をダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
動画4:IBEXパネル4( 青:Hoechst、緑:CD31、シアン:CD68)による個々の病変のボリュームレンダリングのアニメーション化。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67869/Movie4_IBEX4.mp4" target="_blank">この映画をダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
動画5:IBEXパネル5( 青:Hoechst、緑:CD206、シアン:カルレチニン)による個々の病変のアニメーションボリュームレンダリング。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67869/Movie5_IBEX5.mp4" target="_blank">この映画をダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
動画6:IBEXパネル6( 青:Hoechst、緑:Vimentin、赤:HLADR)による個々の病変のボリュームレンダリングのアニメーション。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67869/Movie6_IBEX6.mp4" target="_blank">この映画をダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
動画7:IBEXパネル1(青:Hoechst、緑:CD44、赤:CD45、シアン:ポドプラニン)による三次リンパ系構造-病変界面のボリュームレンダリングのアニメーション化。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67869/Movie7_TLS_IBEX1.mp4" target="_blank">この映画をダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
動画8:IBEXパネル2(青:Hoechst、緑:CD20、赤:F-actin、シアン:CD3)による三次リンパ系構造-病変界面のボリュームレンダリングのアニメーション化。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67869/Movie8_TLS_IBEX2.mp4" target="_blank">この映画をダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
動画9:IBEXパネル3による三次リンパ系構造-病変界面のボリュームレンダリングのアニメーション 化(青:Hoechst、緑:CD8、赤:CD4、シアン:panCK)。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67869/Movie9_TLS_IBEX3.mp4" target="_blank">この映画をダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
動画10:IBEXパネル4(青:Hoechst、緑:CD31、赤:SMA、シアン:CD68)による三次リンパ系構造-病変界面のボリュームレンダリングのアニメーション化。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67869/Movie10_TLS_IBEX4.mp4" target="_blank">この映画をダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
動画11:IBEXパネル5(青:Hoechst、緑:CD206、シアン:カルレチニン)を用いた三次リンパ系組織-病変界面のボリュームレンダリングのアニメーション化。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67869/Movie11_TLS_IBEX5.mp4" target="_blank">この映画をダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
動画12:IBEXパネル6による三次リンパ系構造-病変インターフェースのボリュームレンダリングのアニメーション 化(青:Hoechst、緑:ビメンチン、赤:HLADR)。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67869/Movie12_TLS_IBEX6.mp4" target="_blank">この映画をダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
補足ファイル1:インキュベーションプレート用のファイルを印刷します。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67869/incubation_plate.form" target="_blank">このファイルをダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
補足ファイル2:36の個々のプラットフォームの印刷ファイル。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67869/platform_x36.form" target="_blank">このファイルをダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
補足ファイル3:高さ調整リングの印刷ファイル。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67869/SMART_imaging_heightAdjuster.STL" target="_blank">このファイルをダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
補足ファイル4:外蓋用の印刷ファイル。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67869/SMART_imaging_petriDishLid_35mm.STL" target="_blank">このファイルをダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
補足ファイル5:スライダーのレーザーカットファイル。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67869/imaging_platform_slider.DWG" target="_blank">このファイルをダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>

The spatial heterogeneity of the tumor microenvironment (TME) is a critical determinant of therapeutic response, particularly for immune-oncology agents, ...

three-dimensional-imaging-tumor-bearing-tissue-using-iterative

Research

JoVE Journal

Cancer Research

がん研究

標識された細胞の多光子顕微鏡を通して舌内に口腔癌と腫瘍浸潤の定量的なモニタリングのマウスモデルの生成に関わる技術の包括的な概要が表示されます。このシステムは、抗浸潤化合物の分子の評価と薬効のための有用なプラットフォームとして機能することができます。...

口腔扁平上皮癌の同所性マウスモデルにおける腫瘍細胞の浸潤の多光子イメージング

複雑な組織塊、器官からの腫瘍に、種々の細胞成分から構成されている。我々は、タンパク質の発現に基づいて細胞起源だけでなく、電池特性を解読するスペクトルアンミキシングに続くマルチパラメータ免疫蛍光染色と組み合わせたマルチ蛍光標識トランスジェニックマウスを利用して組織内の細胞の表現型の寄与を明らかにした。...

細胞の起源、タイプ、および相互作用の可視化のための蛍光組織移植に続いて定量的マルチスペクトル解析

造血幹細胞および前駆細胞のマーキングコンビナトリアル5蛍光タンパク質は、再生中に、骨髄の造血アーキテクチャへの洞察を提供し、共焦点および2光子顕微鏡を経由して、生体内のクローン追跡になります。この方法は、移植後の時間の大規模な期間、無傷の組織におけるスペクトル的にコード化されたHSPCs由来細胞の非侵襲的な運命のマッピングが可能になります。...

共焦点および多光子顕微鏡を用いて5蛍光タンパク質によってマーク造血幹細胞および前駆細胞の生体内でクローン追跡で

このプロトコルは、単一細胞の解像度で、生体内で 、リアルタイムで多細胞相互作用の延長タイムラプスイメージングを実行するための多光子顕微鏡の使用を記載しています。...

腫瘍微小環境におけるリアルタイム多細胞ダイナミクスの拡張タイムラプス生体内イメージング

光コヒーレンストモグラフィ...

光コヒーレンストモグラフィーを用いた三次元腫瘍回転楕円体の縦断的形態学的および生理学的監視

ここでは、同じ生体動物内での侵襲的外科的介入(例えば生検)の前後の脳腫瘍細胞の高解像度タイムラプスマルチフォトンイメージングの方法について説明する。この方法は、これらの侵襲的外科的処置が腫瘍細胞の移動、侵襲的、増殖性の行動に対する影響を単一の細胞レベルで研究することを可能にする。...

侵襲性外科生検に対する脳腫瘍細胞行動の縦腔内イメージング

がん免疫療法の時代、腫瘍微小環境ダイナミクスの解明への関心が飛躍的に高まっています。このプロトコルは、その染色およびイメージングステップに関して質量分析イメージング技術を詳述し、高度に多重化された空間分析を可能にする。...

ホルマリン固定およびパラフィン包埋組織サンプルの質量分析イメージングを用いた腫瘍微小環境の理解を広げる

ここでは、多面3次元再構成とカラードップラー融合を組み合わせた5次元超音波技術により、甲状腺の構造情報と機能情報を同期的に可視化することができます。死角を最小限に抑えることで、この方法は病変の迅速かつ正確な局在化を可能にし、診断精度を向上させ、特に初心者の開業医に利益をもたらします。...

甲状腺病変の正確かつ迅速な局在化のためのカラードップラーマッピングと統合された同期三面再構成

マウス腫瘍の定量的3D酸素マップは、パルス電子常磁性共鳴を使用して非侵襲的に画像化されました。超音波Bモードとパワードップラーは、解剖学と血管構造に使用されました。両方のモダリティからの画像を重ね合わせることで、マルチパラメトリック腫瘍解析が可能になりました。...

腫瘍低酸素症の評価:電子常磁性共鳴によるin vivo 3D酸素イメージング 

ここでは、市販の自動組織染色装置を利用した反復漂白拡張多重度(IBEX)法の適用と、チラミドシグナル増幅ベースの試薬の使用に関する最適化の考慮事項について説明します。...

反復漂白は、コア施設の染色自動化を使用して多様性を拡張します

手動IBEX法による低コストで汎用性の高い光照射技術の実装により、有意な天然自家蛍光でヒト組織の最適なイメージングが可能になります。このプロトコルでは、倒立顕微鏡、広く利用可能な試薬、および画像のアライメントと処理のためのオープンソースソフトウェアを使用して、アーカイブされた臨床サンプルからマルチプレックス化されたホールスライド画像を取得する方法を詳しく説明しています。...

反復漂白に最適化されたワークフローにより、高自家蛍光の臨床サンプルのマルチプレキシティイメージングが拡張されます

学ぶ反復漂白法を用いたマルチプレックス免疫蛍光法で、腹膜転移の三次元構造を可視化する手法です。腫瘍微小環境の免疫細胞浸潤と空間分布を解析し、免疫療法の標的発見に貢献します。

反復漂白法を用いた担腫瘍組織の三次元イメージングは、マルチプレキシック性アプローチを拡張します

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