Name: ヒト母乳由来の細胞外小胞の迅速な単離 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-11-14T12:50:00.000+00:00
Duration: 4 min 35 s
Description: 学ぶヒト母乳由来細胞外小胞の迅速単離法。超速遠心分離と比較して時間を短縮し高濃度の粒子を得る手法を学びます。細胞保護効果を持つ治療応用の可能性を探索します。

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<ol><li>Galley, J. D., Besner, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+therapeutic+potential+of+breast+milk-derived+extracellular+vesicles%5BTitle%5D)+AND+%22Nutrients%22%5BJournal%5D)">The therapeutic potential of breast milk-derived extracellular vesicles.</a> Nutrients. 12 (3), 745(2020).</li>
<li>Martin, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+breast+milk-derived+exosomes+attenuate+cell+death+in+intestinal+epithelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Innate+Immun%22%5BJournal%5D)">Human breast milk-derived exosomes attenuate cell death in intestinal epithelial cells.</a> Innate Immun. 24 (5), 278-284 (2018).</li>
<li>Hock, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Breast+milk-derived+exosomes+promote+intestinal+epithelial+cell+growth%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pediatr+Surg%22%5BJournal%5D)">Breast milk-derived exosomes promote intestinal epithelial cell growth.</a> J Pediatr Surg. 52 (5), 755-759 (2017).</li>
<li>Alexander, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exosome-delivered+microRNAs+modulate+the+inflammatory+response+to+endotoxin%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Exosome-delivered microRNAs modulate the inflammatory response to endotoxin.</a> Nat Commun. 6, 7321(2015).</li>
<li>Lasser, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+saliva%2C+plasma%2C+and+breast+milk+exosomes+contain+RNA%3A+Uptake+by+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22J+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Human saliva, plasma, and breast milk exosomes contain RNA: Uptake by macrophages.</a> J Transl Med. 9, 9(2011).</li>
<li>Chan, C. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Type+I+interferon+sensing+unlocks+dormant+adipocyte+inflammatory+potential%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Type I interferon sensing unlocks dormant adipocyte inflammatory potential.</a> Nat Commun. 11 (1), 2745(2020).</li>
<li>Miyake, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+breast+milk+exosomes+attenuate+intestinal+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatr+Surg+Int%22%5BJournal%5D)">Human breast milk exosomes attenuate intestinal damage.</a> Pediatr Surg Int. 36 (2), 155-163 (2020).</li>
<li>Gao, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+developments+in+isolating+methods+for+exosomes%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Bioeng+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Recent developments in isolating methods for exosomes.</a> Front Bioeng Biotechnol. 10, 1100892(2022).</li>
<li>Patel, G. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+analysis+of+exosome+isolation+methods+using+culture+supernatant+for+optimum+yield%2C+purity+and+downstream+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Comparative analysis of exosome isolation methods using culture supernatant for optimum yield, purity and downstream applications.</a> Sci Rep. 9 (1), 5335(2019).</li>
<li>Gandhi, J., Naik, M. N., Mishra, D. K., Joseph, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proteomic+profiling+of+Aspergillus+flavus+endophthalmitis-derived+extracellular+vesicles+in+an+in+vivo+murine+model%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Mycol%22%5BJournal%5D)">Proteomic profiling of Aspergillus flavus endophthalmitis-derived extracellular vesicles in an in vivo murine model.</a> Med Mycol. 60 (9), myac064(2022).</li>
<li>Palinski, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lysosome+purinergic+receptor+p2x4+regulates+neoangiogenesis+induced+by+microvesicles+from+sarcoma+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Dis%22%5BJournal%5D)">Lysosome purinergic receptor p2x4 regulates neoangiogenesis induced by microvesicles from sarcoma patients.</a> Cell Death Dis. 12 (9), 797(2021).</li>
<li>Tantengco, O. aG., Radnaa, E., Shahin, H., Kechichian, T., Menon, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cross+talk%3A+Trafficking+and+functional+impact+of+maternal+exosomes+at+the+feto-maternal+interface+under+normal+and+pathologic+statesdagger%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Reprod%22%5BJournal%5D)">Cross talk: Trafficking and functional impact of maternal exosomes at the feto-maternal interface under normal and pathologic statesdagger.</a> Biol Reprod. 105 (6), 15621576(2021).</li>
<li>Caruso Bavisotto, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exosomal+hsp60%3A+A+potentially+useful+biomarker+for+diagnosis%2C+assessing+prognosis%2C+and+monitoring+response+to+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Rev+Mol+Diagn%22%5BJournal%5D)">Exosomal hsp60: A potentially useful biomarker for diagnosis, assessing prognosis, and monitoring response to treatment.</a> Expert Rev Mol Diagn. 17 (9), 815-822 (2017).</li>
<li>Feng, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Latest+trend+of+milk-derived+exosomes%3A+Cargos%2C+functions%2C+and+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Nutr%22%5BJournal%5D)">Latest trend of milk-derived exosomes: Cargos, functions, and applications.</a> Front Nutr. 8, 747294(2021).</li>
<li>Li, P., Kaslan, M., Lee, S. H., Yao, J., Gao, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progress+in+exosome+isolation+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Theranostics%22%5BJournal%5D)">Progress in exosome isolation techniques.</a> Theranostics. 7 (3), 789-804 (2017).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>(H+L)HRP共役アンチマウス</td><td>バイオ・ラッド</td><td>1721011</td><td></td></tr><tr><td>(H+L)HRP共役反ウサギ</td><td>バイオ・ラッド</td><td>1706515</td><td></td></tr><tr><td>0.20シリンジフィルター</td><td>フィッシャーブランド</td><td>09-719C</td><td></td></tr><tr><td>0.70 μmのセルストレーナー</td><td>コーニング</td><td>431751</td><td></td></tr><tr><td>150万人 トリスHCL</td><td>社内制作</td><td></td><td></td></tr><tr><td>15 mLチューブ</td><td>ファルコン</td><td>352096</td><td></td></tr><tr><td>16インチフィルターエクステンションセット</td><td>B-ブラウン</td><td>FE2012F</td><td></td></tr><tr><td>1M トリスHCL</td><td>テクノヴァ</td><td>T1068</td><td></td></tr><tr><td>1倍PBS</td><td>ギブコ</td><td>10010-031</td><td></td></tr><tr><td>50 mLチューブ</td><td>ファルコン</td><td>353070</td><td></td></tr><tr><td>5倍還元サンプルバッファ</td><td>サーモ・サイエンティフィック</td><td>39000</td><td></td></tr><tr><td>アシルアミド</td><td>フィッシャー・サイエンティフc&nbsp;</td><td>BP1410-1</td><td></td></tr><tr><td>アンフォテリシンB</td><td>ギブコ</td><td>15290-018</td><td></td></tr><tr><td>AMT NanoSprint43 Mark-II カメラ</td><td>AMT</td><td></td><td></td></tr><tr><td>アンチ・アンチ</td><td>ギブコ</td><td>15240-062</td><td></td></tr><tr><td>アンチCD63</td><td>ノヴスビオ</td><td>NBP2-32830</td><td></td></tr><tr><td>アンチCD9</td><td>インビトロジェン</td><td>10626D</td><td></td></tr><tr><td>APS</td><td>サーモ・サイエンティフィック</td><td>17874</td><td></td></tr><tr><td>BCAタンパク質アッセイキット</td><td>ピアース</td><td>23227</td><td></td></tr><tr><td>ベックマン管</td><td>ベックマンはcoulter&nbsp;</td><td>344059</td><td></td></tr><tr><td>ブライトスター ECL ケミルミネッセンセント</td><td>アルカリ・サイエンティフィック</td><td>XR92</td><td></td></tr><tr><td>エクソソーム枯渇FBS</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>NC0464480</td><td></td></tr><tr><td>高速ブロッキングバッファ</td><td>ピアース</td><td>37575</td><td></td></tr><tr><td>胎児用牛血清</td><td>ライフ・テクノロジーズ</td><td>10082147</td><td></td></tr><tr><td>HSP70</td><td>インビトロジェン</td><td>MA3-006</td><td></td></tr><tr><td>ヒトインスリン</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>I9278-5ML</td><td></td></tr><tr><td>過酸化水素</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>H325-500</td><td></td></tr><tr><td>IEC-6&nbsp;</td><td>ATCC</td><td>CRL-1592</td><td></td></tr><tr><td>JEOL 1400 フラッシュ・テム</td><td>JEOL USA Inc</td><td></td><td></td></tr><tr><td>レーンマーカー減少サンプルバッファー</td><td>サーモ・サイエンティフィック</td><td>39000</td><td></td></tr><tr><td>粉ミルク</td><td>バイオワールド</td><td>30620074-1</td><td></td></tr><tr><td>ナノサイト NS 300</td><td>マルバーン・インスツルメンツ社</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ニトロセルロース膜</td><td>生命技術</td><td>88018</td><td></td></tr><tr><td>PELCOイージーグロー放電装置</td><td>テッド・ペラ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>プロテアーゼ阻害剤ミニ錠剤</td><td>ピアース</td><td>A32955</td><td></td></tr><tr><td>RIPAバッファ</td><td>ピアース</td><td>89901</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640</td><td>フィッシャー・サイエンティフc&nbsp;</td><td>11875119</td><td></td></tr><tr><td>SDS</td><td>フィッシャー・サイエンティフc&nbsp;</td><td>BP2436-200</td><td></td></tr><tr><td>T-25フラスコ</td><td>サーモ・サイエンティフィック</td><td>156367</td><td></td></tr><tr><td>TBS</td><td>社内制作</td><td></td><td></td></tr><tr><td>テメッド</td><td>バイオ・ラッド</td><td>161-0801</td><td></td></tr><tr><td>トリプシンEDTA</td><td>ギブソ</td><td>25200-056</td><td></td></tr><tr><td>トゥイーン20</td><td>サーモ・サイエンティフィック</td><td>J20605-AP</td><td></td></tr></tbody></table>

ヒト母乳由来の細胞外小胞の迅速な単離

Rapid Isolation of Human Breast Milk-Derived Extracellular Vesicles

Extracellular vesicles (EVs), nanosized particles approximately 20-1000 nm in size, are rapidly garnering attention for their therapeutic potential. ...

rapid-isolation-of-human-breast-milk-derived-extracellular-vesicles

Research

JoVE Journal

Biology

生物学

出典: ワトソン、DC、 et.al。大腸菌と他の細菌からの細胞外小胞のスケーラブルな単離と精製 J. Vis. 経験。 (2021年)このビデオは、遺伝子組み換え細菌の外膜に由来する細胞外小胞(EV)の単離と濃縮を示しています。このプロセスには、細菌を培養して EV...

細菌からの外膜由来細胞外小胞の単離と濃縮

Source: DeMarino, C., et al. Purification of High Yield Extracellular Vesicle Preparations Away from Virus. J. Vis. Exp. (2019)The video demonstrates the separation of EVs from virions and other contaminants by density gradient centrifugation, followed by capture and concentration with hydrogel nanoparticles. Washed fractions are then ready for downstream identification of those enriched in EVs.

Separation and Enrichment of Extracellular Vesicles in the Presence of Virions

このプロトコルは、わずか10μlの血清サンプルから、細胞外ベシクル（電気自動車）、細胞から放出された小さな膜状粒子を単離する方法を詳しく説明します。このアプローチは、超遠心分離の必要性を回避するアッセイ時間の数分しか必要とし、限られた容積のサンプルからのEVの単離を可能にする。...

細胞外小胞の単​​離および特徴のための紙ベースのデバイス

このプロトコルは、非接着性/間葉性乳房上皮細胞からの細胞外小胞（EVs）/エキソソームの精製、定量化および特徴づけ方法、ならびにこれらを用いて乳腺上皮細胞に乳腺形成能を転移させる方法を記載する。幹様乳腺上皮細胞に由来するEV /エキソソームは、この細胞特性をEV /エキソソームを摂取する細胞に移入することができる。...

細胞外小胞/エキソソームを介した乳腺上皮細胞と乳房管腔細胞との間の乳腺形成能の伝達

限外ろ過遠心分離法を用いたマウスの気管支肺胞洗浄液細胞小胞の分離

液体試料からのエキソソームおよび細胞外小胞の標識フリー固定化および原子間力顕微鏡(AFM)によるイメージングに関するステップバイステップの手順について説明する。AFM画像は、溶液中の小胞のサイズを推定し、他の生物物理学的特性を特徴付けるために使用されます。...

原子間力顕微鏡による細胞外小胞のイメージング

このプロトコルは、EVの降水量、密度勾配超遠心分離、粒子捕捉を組み込むことにより、高効率で歩留まりのあるビリオンから離れた細胞外小胞(EV)を分離し、合理化されたワークフローと開始の削減を可能にします。すべてのEV研究で使用するための再現可能な準備をもたらす容積の条件。...

ウイルスから離れた高収率細胞外小胞製剤の精製

ここでのプロトコルは、サイズ排除クロマトグラフィーを使用して、細胞外小胞を馴化細胞培養培地から適切に分離できることを示しています。...

馴化細胞培養培地から細胞外小胞を分離するためのサイズ排除クロマトグラフィー(英語)

このプロトコルは、ヒト臍帯由来間葉系幹細胞の小さな細胞外小胞(hUC-MSC-sEV)を、シンプルなラボスケールのベンチトップ設定で分離する方法を示しています。単離されたhUC-MSC-sEVのサイズ分布、タンパク質濃度、sEVマーカー、および形態は、それぞれナノ粒子追跡分析、BCAタンパク質アッセイ、ウェスタンブロット、および透過型電子顕微鏡によって特徴付けられます。...

ヒト間葉系幹細胞から小さな細胞外小胞を単離するための簡単なベンチトップろ過法

本研究では、密度勾配遠心分離(DGC) により...

密度勾配遠心分離法を用いたヒト糞便からの細菌細胞外小胞の単離と精製(英語)

学ぶヒト母乳由来細胞外小胞の迅速単離法。超速遠心分離と比較して時間を短縮し高濃度の粒子を得る手法を学びます。細胞保護効果を持つ治療応用の可能性を探索します。

ヒト母乳由来の細胞外小胞の迅速な単離

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