Name: Drosophila melanogasterにおける神経回路の光遺伝学的操作のための行動アッセイ (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-02-07T14:50:00.000+00:00
Duration: 7 min 39 s
Description: 学ぶ光遺伝学的操作法でDrosophila melanogasterの神経回路を制御し、温度嗜好性や味覚応答などの行動を解析する手法です。CsChrimsonとGtACR2を用いて神経活性を精密に操作し、意思決定メカニズムを解明します。

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</ol>

<table><tbody><tr><td>1000 mA LEDドライバー</td><td>Luxeon Star</td><td>3021-D-E-1000</td><td></td></tr><tr><td>5 mL VWR培養チューブ、プラスチック、デュアルポジションキャップ付き</td><td>VWR</td><td>60818-664</td><td></td></tr><tr><td>780 ロングパスフィルター/ IR 780 nm 100 mm x 100 mm</td><td>Lee</td>フィルターBH <td>#LE8744</td><td>約47 x 100にカットしてプラスチックカバーに適合</td></tr><tr><td>Agfabric 6.5フィートx 15フィート 昆虫バグネット 植物、野菜、花、果物</td><td>を保護するためのガーデンネットホームデポ</td><td>EIBNW6515</td><td></td></tr><tr><td>オールトランスレチナール</td><td>シグマ-アルドリッチ</td><td>116-31-4</td><td></td></tr><tr><td>アルミニウムプレート(30.5 cm x 30.5 cm x 0.6 cm)</td>アマゾン<td>から購入した</td><td>アマゾン</td><td></td></tr><tr><td>ブラックプラスチックボックス</td><td>LI-COR</td><td>929-97101</td><td></td></tr>塩化<tr><td>カルシウムアンヒドロ25GR</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>AC297150250 CX405 Exmor R CMOSセンサー付きハンディカム</td><td>SONY</td><td>HDR-CX405</td><td></td></tr><tr><td>Elmer's &ldquo;学校のり」</td><td>エルマー</td><td></td><td></td></tr><tr><td>エチルアルコール、ピュア(200プルーフ)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E7023</td><td></td></tr><tr><td>Fisherbrand Isotempホットプレートスターラー</td><td>フィッシャーサイエンティフィック</td><td>SP88850200</td><td></td></tr><tr><td>フライライン:Gr5a-Gal4</td><td>ブルーミントンショウジョウバエストックセンター</td><td>57592</td><td></td></tr><tr><td>フライライン:Gr66a-Gal4</td><td>ブルーミントンショウジョウバエストックセンター</td><td>57670</td><td></td></tr><tr><td>フライライン:HC-Gal4 (II)</td><td>Dr. Marco Gallio Lab</td><td></td><td>親切な贈り物</td></tr><tr><td>フライライン: UAS-CsChrimson</td><td>Bloomington Drosophila Stock Center</td><td>55136</td><td></td></tr><tr><td>フライライン: UAS-GtACR2/TM6B</td><td>Dr. Quentin Gaudry Lab</td><td></td><td>親切な贈り物</td></tr><tr><td>Flystuff 62-101 黄色いコーンミール (11.3 Kg)、黄色、11.3 Kg/単位</td><td>Genesee Scientific</td><td>62-101</td><td></td></tr><tr><td>Flystuff 62-107 Inactive Dry Yeast, 10 Kg, Nutritional Flake, 10 Kg/Unit</td><td>Genesee Scientific</td><td>62-107</td><td></td></tr><tr><td>Flystuff 66-103 Nutri-Fly Drosophila Agar, Gelidium, 100 Mesh, 5 kg (11.02 lbs)/Unit</td><td>Genesee Scientific</td><td>66-103</td><td></td></tr><tr><td>FreeMascot OD 8+ 190 nm&ndash;420 nm / 600 nm&ndash;1100nm波長バイオレット/レッド/赤外線レーザー安全メガネ&nbsp;</td><td>フリーマスコット&nbsp;</td><td></td><td>Amazon</td></tr><tr><td>GoProから購入したB08LGMQ65S、Hero8、Black</td><td>GoPro</td><td>6365359</td><td></td></tr><tr><td>LEEフィルター100回。100 mm 赤外線 #87 赤外線ポリエステルフィルター</td><td>B&H Photo</td><td>LE8744</td><td></td></tr><tr><td>ロングパスフィルター、色ガラス、50.8 x 50.8 mm、830 nm カットオン、RG830</td><td>ニューポート</td><td>FSQ-RG830</td><td></td></tr><tr><td>メチル 4-ヒドロキシ安息香酸、99%、Thermo Scientific Chemicals</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック&nbsp;</td><td></td><td></td>126960025</tr><tr><td>MicroWell Mini Tray 60ウェル、ロープロファイル NS PS</td><td>サーマルサイエンティフィック&nbsp;</td><td>NUNC 439225</td><td>蓋は「プラスチックカバー」として使用されていますオ</td></tr><tr><td>リンパスプラスチック24-160RS、1000&マイクロ;L オリンパス エルゴノミクス ピペットチップ 低結合、ラック、滅菌、8 ラック 96 チップ/ユニット</td><td>エッペンドルフ</td><td>24-160RS</td><td></td></tr><tr><td>パラフィルム M シーリング フィルム</td><td>ヒースロー サイエンティフィック</td><td>HS234526B</td><td>4 インチ x 125 フィート</td></tr><tr><td>塩化カリウム、ACS、99.0-100.5%、&nbsp;</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック&nbsp;</td><td></td><td></td>AA1159530</tr><tr><td>Prism</td><td>GraphPad</td><td>Version 9</td><td>データ解析ソフトウェア</td></tr><tr><td>Samco Graduated Transfer Pipettes</td><td>Thermo Fisher Scientific&nbsp;</td><td>225</td><td>3 mL</td></tr><tr><td>スライド</td><td>フィッシャーサイエンティフィック</td><td>12-544-2</td><td>&nbsp;5 mm x 75 mm x 1.0 mm</td></tr><tr><td>実体顕微鏡</td><td>OLYMPUS</td><td>CZ61</td><td></td></tr><tr><td>発泡スチロールボックス (高さ 27 cm、幅 22 cm、長さ 16 cm)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>ショ糖</td><td>Fisher Scientific</td><td>225911</td><td></td></tr><tr><td>表面温度プローブ</td><td>Fluke</td><td>80PK-3A</td><td></td></tr><tr><td>シリンジ</td><td>BD Integra</td><td>305270</td><td></td></tr><tr><td>テート&ライル457デキストロース、テート&ライル、パウ、テイト&ライル457デキストロース、テート&ライル、パウダー、50ポンド/ユニット</td><td>ジェネシーサイエンティフィック</td><td>62-113</td><td></td></tr><tr><td>トレーサブル キャリブレーション済み ビッグディジット 熱電対温度計</td><td>cple-parmer</td><td>&nbsp;UX-91210-07</td>フィ<td>ッシャーブランドトレーサブルBigDigitタイプK温度計</td></tr>トリプル<tr><td>青色LED</td><td>右舷LEDをダウンロード</td><td>07007-PB000-D</td><td>470nm</td></tr><tr><td>トリプル赤色LED右舷</td><td>LEDをダウンロード07007-PD000-F</td><td></td><td>627nm</td></tr><tr><td>タイゴンPVCクリアチューブ1/4 "ID、3/8"OD、5フィート長さ&nbsp;</td><td>マクマスター・カー・サプライ・カンパニー&nbsp;</td><td>6516T21&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Univivi IRイルミネーター、850nm 12 LED広角IRイルミネーター、ナイトビジョン用</td><td>Univivi</td><td>4331910725</td><td></td></tr><tr><td>Wakefield Thermal 25.4 mmラウンドヒートシンクスターLEDボード - 882-100AB</td><td>Wakefield-Vette</td><td>882-100AB</td><td></td></tr><tr><td>ワイヤレスプレゼン</td><td>ターDinoFireストア</td><td>B01410YNAM</td><td>Amazonから購入</td></tr></tbody></table>

drosophila melanogasterにおける神経回路の光遺伝学的操作のための行動アッセイ

Behavioral Assays for Optogenetic Manipulation of Neural Circuits in Drosophila melanogaster

シングルフライブルーライト光光学サーモタクティック位置選好アッセイ ATR補給なしのルームライト(ルームライト、ATR-)、ATR補給ありのルームライト(ルームライト、ATR+)、ATR補給なしのブルーライト(青、ATR-)、ATR補給ありのブルーライト(青、ATR+)の4つの条件がテストされました。最初の 3 つの条件がコントロールとして機能しました。対照実験では、ハエは31°C側を避けました。ATRを添加した青色光では、ハエは25°Cから31°Cの間で選好性を示さず、GtACR2活性化によるHCニューロンの阻害が成功したことを示しています(図2A)。
シングルフライ赤色光光遺伝学的位置選好アッセイ ATR補給なしのルームライト(ルームライト、ATR -)、ATR補給ありのルームライト(ルームライト、ATR +)、ATR補給なしの赤色ライト(赤、ATR -)、ATR補給ありの赤色ライト(赤、ATR+)の4つの条件がテストされました。最初の 3...

Drosophila melanogasterにおける神経回路の光遺伝学的操作のための行動アッセイ

Optogenetics has become a fundamental technique in neuroscience, enabling precise control of neuronal activity through light stimulation. This study ...

behavioral-assays-for-optogenetic-manipulation-neural-circuits

Research

JoVE Journal

Neuroscience

神経科学

Optogeneticsは、特定のオプシンを発現するように遺伝子操作されたニューロンを操作するための光の使用を可能にします。その光の活性化はニューロンの状態の変化を引き起こします。ここでは、オプシンChannelrhodopsin2を使用したショウジョウバエの光遺伝学的アプローチについて説明します。このプロトコルの例は、ハエの脱出行動の背後にあるニューロン回路を研究するためのオプトジェネティクスアッセイセットを特徴としています。...

ショウジョウバエオプトジェネティクス:神経回路を操作する方法

このビデオは、嗅覚ニューロン(ORN)の光遺伝学的刺激に応答したショウジョウバエの幼虫のナビゲーション行動の研究を示しています。ORNで光感受性イオンチャネルを発現するトランスジェニックショウジョウバエの幼虫は、行動領域内のアガロース上に配置されます。光による光遺伝学的刺激によりチャネルが開き、脳への信号伝達をトリガーする陽イオン流入を引き起こし、ナビゲーション行動が記録されます。...

嗅覚ニューロンの光遺伝学的刺激に対するショウジョウバエ幼虫のナビゲーション行動

遺伝的にコードされoptogeneticツール内の特定の神経細胞の非侵襲的な操作を可能に...

で逃避行動のOptogenetic刺激<em&gt;キイロショウジョウバエ</em

ここでは、ショウジョウバエの幼虫のために明暗選好テストを記述します。このアッセイは、光センシングと処理photobehaviorの自然免疫と概日規制に関する情報を提供します。...

に自然免疫とサーカディアン規制Photobehaviorを勉強する光プアッセイ<em&gt;ショウジョウバエ</em&gt;幼虫

ここ半無傷でモータ出力の変化（筋収縮）を監視しながら、我々は運動神経活動のoptogenetic操作のためのプロトコルを記述...

半無傷でレーザー照射による神経活動のOptogeneticの摂動<em&gt;ショウジョウバエ</emイン·モーション&gt;幼虫

このビデオの記事では、我々は大人のフルーツキイロショウジョウバエを飛んでの嗅覚に依存する食品の検索行動に空腹や満腹の効果を測定するための自動化されたアッセイを説明します。...

での採餌行動のためのシングル·フライアッセイショウジョウバエ

ここでは、最大100匹のビネガーフライ（Drosophila...

のコンピュータ追跡することによってアッセイ嗅覚行動<em&gt;ショウジョウバエ</em&gt; 4象限オルファクトメーターで

このプロトコルは、その嗅覚ニューロンの同時光刺激に対する応答のショウジョウバエ幼虫のナビゲーション動作を分析します。630 nm の波長の光は、赤いシフト チャネル ロドプシンを表現する個々...

嗅覚ニューロンの光刺激に対する応答のショウジョウバエ幼虫の行動を追跡

このプロトコルは、ショウジョウバエ幼虫の光戦術挙動を調査するための光スポットアッセイを導入する。このアッセイでは、光刺激として光スポットが生成され、幼虫光回避のプロセスが赤外線光ベースのイメージングシステムによって記録される。...

ショウジョウバエの幼虫フォトタキスの分析のための光スポットベースアッセイ

本プロトコールは、OCT画像化および光遺伝学的心臓ペーシングのために、心臓においてeNpHR2.0またはReaChRオプシンを発現するショウジョウバエメラノガスターの生成を記載する。ショウジョウバエOCTイメージングおよび心拍調節のための詳細な指示は、異なる発達段階における生きた動物における回復可能な心停止、徐脈、および頻脈のシミュレーションを含む、報告されている。...

ショウ ジョウバエのメラノガスター モデルの開発による心機能のイメージングと光遺伝学的制御

このプロトコルは、従来の哺乳類モデルに代わるものとして、自発運動機能障害の定量化を通じてショウジョウバエの神経毒性を評価するためのハイスループットで費用対効果の高い方法を提供します。これは、高感度で再現性があり、倫理的に有利なモデルを使用して、医薬品化合物、環境剤、または遺伝子組み換えの神経毒性効果を評価することを目的としています。...

神経毒性のリードアウトとしての Drosophila melanogaster の自発運動機能障害の行動解析

学ぶ光遺伝学的操作法でDrosophila melanogasterの神経回路を制御し、温度嗜好性や味覚応答などの行動を解析する手法です。CsChrimsonとGtACR2を用いて神経活性を精密に操作し、意思決定メカニズムを解明します。

Drosophila melanogasterにおける神経回路の光遺伝学的操作のための行動アッセイ

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