Name: ペンチレンテトラゾール誘発性発作の行動特性評価:ラシーンスケールを超えて (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-08T13:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 35 s
Description: 学ぶペンチレンテトラゾール誘発性発作における痙攣とミオクローヌスの行動特性評価法。コンピュータ支援ビデオ解析を用いて、従来のラシーンスケールでは捉えられない発作前後の詳細な行動を定量化し、抗てんかん薬の効果評価に活用できます。

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すべての実験手順は、リオグランデ・ド・ノルテ連邦大学の地元の倫理委員会によって承認されました(プロトコル番号043/2022、ライセンス番号307.043/2022)。このプロトコルでは、生後3ヶ月から4ヶ月までの雄C57BL/6マウスを使用し、確立されたPTZ誘導プロトコル16に従って6〜10匹の推奨サンプルサイズを使用しました。
1. 観測アリーナの準備
<ol>
	<li>表面積が10 x 10 cm以上、壁の高さが30 cm以上の正方形または円形のアリーナを使用してください。アリーナが十分に照らされていることを確認してください。必要に応じて、赤外線照明を使用して飽和画像取得を保証します(図2A)。</li>
	<li>アリーナの上に少なくとも1台のビデオカメラを置き、アリーナの床全体と壁の少なくとも10 cmを上から見下ろします(マウスの頭を切り取らずに飼育行動をキャプチャするため、 図2B)。</li>
	<li>必要に応じて、アリーナの正面から見える2台目のビデオカメラを配置します。この場合、アリーナの壁の1つが透明であることを確認してください。</li>
	<li>温度(21-24°C)と湿度(50-70%)が動物施設の条件と一致していることを確認し、温湿度計で監視し、必要に応じて調整します。</li>
	<li>アリーナの底を覆うために必要な寝具を配置し、動物が背景から見えるようにします。実験の全期間中、水と食品ペレットを自由に利用できるようにします。</li>
	<li>できれば光期の開始時(例えば、午前7時から10時の間)に実験を開始してください。実験室(900-1,100ルクス)で一貫した照明を維持し、12/12時間の明暗サイクルで、午前6時に照明を点灯します。ルクスメーターを使用して、録画アリーナに近い照明条件を確認し、均一なビデオ録画品質を確保します。</li>
	<li>カメラをビデオ録画デバイスに接続して、少なくとも24フレーム/秒(fps)のビデオを取得します。</li>
</ol>
2. PTZ溶液の調製
注:発作性行動(すなわち、けいれん)は、40 mg / kgから始まる用量で誘発できます。.大脳辺縁系発作は、60 mg / kg以上の用量で観察されます。.呼吸停止および死亡に関連する強直性発作は、通常、80 mg / kg以上の用量で観察されます。.キンドリングプロトコルには、40 mg / kgの投与量が使用されました。
用量はマウス株によって異なる場合があります。.研究課題に最も適したPTZ線量を定義するために、パイロット実験を実施することをお勧めします。
<ol>
	<li>マウスに全身注射により10 mL/kgを投与します。したがって、PTZ粉末を脱イオン水に溶解して、最終濃度の4または6 mg / mL(それぞれ40 mg / kgおよび60 mg / kgの用量)に到達します。 注:ばらつきを減らすには、実験バッチ全体に対して単一のPTZ溶液を調製します。</li>
</ol>
3. PTZの運営
<ol>
	<li>動物をアリーナに置く前に、体重計を使用して体重を測定してください。</li>
	<li>各動物に必要なPTZ溶液の量を、その体重に基づいて計算します。 注:60 mg / kgの用量と30 gの体重の場合、動物に0.3 mLの6 mg / mL PTZ溶液を注射します。.</li>
	<li>PTZ注入の少なくとも1時間前に挙動を記録します。 注:この慣れ期間は、新規性による歩行と不安を減少させますが、ベースライン活動を抽出するためにも使用できます。</li>
	<li>PTZを腹腔内(i.p.)または皮下(s.c.)に投与します15,16。皮下投与の場合は、片手で動物を固定し、肩甲骨の間の皮膚をそっとつまみます(図2C)。</li>
	<li>26 1/2Gの針に取り付けられた1mLの注射器を使用して、針を体の向きと平行に皮下腔内に挿入し、溶液を皮下腔にゆっくりと注入します。注入が完了したら、針をそっと取り外し、皮膚を針の出口に保持して、空洞の圧力によって溶液がこぼれ出ないようにします(図2C)。 注:溶液が急速に蓄積すると、注射部位からこぼれたり、針を抜くときに漏れたりする可能性があるため、注射は急ぎすぎないでください。</li>
	<li>漏れは発作性の行動の発現に影響を与えるため、メモしておいてください。同じPTZ溶液を50μL追加ですぐに注入する可能性を考慮してください。</li>
	<li>動物をアリーナに戻し、1時間の連続ビデオ録画を行います。</li>
	<li>PTZインジェクションの1時間後(またはそれ以上)に、録画を停止し、後処理(ビデオトラッキングとビヘイビアコーディング)のためにファイルをコピーします。</li>
</ol>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68112/68112fig2v2.jpg"> 
図2:実験のセットアップと注入手順(A)中央に配置された4つの透明な正方形のアリーナとトップダウンビューカメラを使用して、PTZ投与前後の行動を記録し、動物の位置を追跡しました。(B)Aに記載の設定で取得した代表的な動画1本のスナップショット。(C)PTZの皮下注射の例。針は皮下腔内の動物の肩甲骨の間に置かれます。(D)本研究で用いた行動データの取得と分析の概略図。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68112/68112fig2v2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
4. 動物福祉
<ol>
	<li>発作が5分以上続く場合は、特に繰り返し注射のプロトコル中に、細胞死や脳組織の損傷を防ぐために、動物を取り出して安楽死させます。</li>
	<li>実験期間中、毎日動物の体重を監視します。</li>
	<li>食物摂取、移動、姿勢、グルーミング、痛みや苦痛の兆候など、動物の一般的な状態を監視します。</li>
	<li>必要に応じて抗炎症治療(イブプロフェン、5 mg / kg)を投与し、痛みを管理します。.必要に応じて、補助的な食事や水を用意してください。</li>
	<li>動物が個々のサプリメントから2日以内に回復できない20%を超える体重減少、表皮病変、または薬理学的治療に反応しない慢性的な痛みや不快感の兆候を示している場合は、動物を除外します。.</li>
	<li>すべての動物を国際的および制度的な倫理ガイドラインに従って安楽死させます。</li>
</ol>
5. ソフトウェアのインストール、設定、使用
<ol>
	<li>この研究で説明する解析には、MouseLabTrack19 と Solomon Coder を使用します。それらをダウンロードして、インストール手順に従います ( 補足ファイル 1 と 補足ファイル 2 を参照)。 注: MouseLabTrack は MATLAB フレームワークで実行されますが、Solomon Coder は Windows オペレーティング システム用の実行可能ファイルです。どちらのソフトウェアもオープンソースです。</li>
	<li>WindowsのスタートメニューでSolomonをクリックするか、Solomon Coderを検索してソフトウェアを開きます。<ol>
		<li>設定ファイルが使用可能な場合( 補足ファイル3を参照)は、[ ファイル] |構成をロードします。画面には、事前定義された設定が読み込まれます。</li>
		<li>設定ファイルが利用できない場合は、<ol>
			<li>空き領域を右クリックして、新しいボタンを作成します。新しく作成したボタンを右クリックして、 設定 画面を開きます。</li>
			<li>[ボタン名] フィールドで、目的の動作を表すようにボタンの名前を変更します。</li>
			<li>[ボタン面の色] フィールドで、色を選択します。</li>
			<li>[カテゴリ] フィールドで、名前を [デフォルト] を [ビヘイビア] に変更します (これが列名になります)。</li>
			<li>ホットキーフィールドで、ビデオ分析中の動作をマークするキーボードキーを割り当てます(例:キー「1」)。</li>
			<li>(オプション)イベントが瞬間的な場合は、ホットキーの上のチェックボックスをオンにします。つまり、キーが押されて離されたときに1つのイベントが登録されます。チェックを外すと、キーが離されるまで動作は記録されたままになります。</li>
		</ol>
		</li>
		<li>ビデオを開くには、[ ファイル] |[ビデオ] を開きます。</li>
		<li>再生を押してビデオを開始します。</li>
		<li>動作が観察されたら、マウスの左ボタンをクリックするか、割り当てられたキーボードキーを押してマークします。</li>
		<li>データをカンマ区切り値 (.csv) ファイルとして保存するには、[ 分析] |出力に名前を付けて保存します。Solomon コーディング シート (.arch) を保存するには、[ ファイル] |コーディングシートを保存します。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>MouseLabTrackerを開いてロードします。<ol>
		<li>MATLABを開き、コンソールで「main()」と入力して Enterキーを押します。</li>
		<li>ビデオをロードするには、開くボタンをクリックします。読み込み後、隣接する画面には、背景が緑色のビデオと動物が白で表示されます。</li>
		<li>ビデオで分析する時間間隔を指定します。 [開始 ]をクリックして、解析の開始を設定します。 [終了 ]をクリックして、解析の終了点を設定します。 注意: 間隔が設定されていない場合、ソフトウェアはビデオ全体を分析します。</li>
		<li>トラッキング設定を構成するには、[ トラッキング設定 ] タブに移動します。<ol>
			<li>「暗いオブジェクト」/「明るい背景」を選択して、動物が背景よりも暗いことを示します。</li>
			<li>動物の数を調整するには、[ 被験者 ] に移動して、数を 1 に変更します。</li>
			<li>検出パラメータを調整するには、半径値が 30 から 40 の間になるように [しきい値] パラメータ設定を変更します。</li>
			<li>動物の色を定義するには、[ 色 ]をクリックして適切な色を選択します。</li>
			<li>アリーナを定義するには、「 Define Arena」をクリックし、アリーナの左上隅を選択してから、アリーナの右下隅を選択します。</li>
		</ol>
		</li>
		<li>追跡プロセスを開始するには、[ 追跡]をクリックします。プログレスバーが100%に達するまで待ちます。</li>
		<li>追跡が完了したら、[ Save results]をクリックして解析の出力ファイルを保存します。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
6. コーディング動作
<ol>
	<li>まず、マウスが観測アリーナに配置された後、ビデオフレームに再表示されるPTZ管理時間にタグを付けます。この瞬間は 時間ゼロとして機能し、レイテンシ計算を含む他のすべての動作の時間的基準として機能します。</li>
	<li>PTZ注射の数分後に痙攣とミオクローヌスを観察し(図3)、その後、大脳辺縁系発作の可能性を観察します。痙攣は、軸筋の短時間、一過性、速い収縮であり、両側の耳の屈曲、背筋の収縮、尾の上げ方(ストラウブの尾)、そしてまれに驚愕のジャンプ反応が含まれます(図3A)。痙攣を個別のイベントとしてコード化し、それらを持続時間のない 1 つのビデオ フレームに関連付けます。 注:けいれんの発現におけるさまざまな身体部分の多様性と組み合わせを定量化します(代表的な結果のセクションを参照)。</li>
	<li>ミオクローヌスをコードするには、200ミリ秒を超えるイベントを観察します。それらは、頭、首、および前足を含む突然の強いミオクローヌスのけいれんによって特徴付けられます。震えや体の姿勢の喪失に関連している可能性があります(図3B)。下位分類には、振戦を伴う、または前方、左向き、または右向きの姿勢の喪失を伴うミオクローヌスが含まれます。通常、持続時間の範囲は 1 秒から 2 秒です。その長さのために、ミオクローヌスは単一のイベントに対して複数の時間単位にわたるコーディングを必要とします。</li>
	<li>大脳辺縁系発作をコード化するには、Racineが記述したものに類似し、Racineスケールを使用してコード化できるイベントを観察します。通常、行動停止または凝視呪文から始まり、その後、嗅覚および味覚の自動化、口腔顔面運動、前肢および/または頭部のミオクローヌス、転倒の有無にかかわらずの飼育、野生のランニングまたはジャンプ、呼吸停止を伴う強直性発作が続きます。修正されたラシーンスケール18 を使用して、10〜15秒以上続き、けいれんやミオクローヌスと区別できる大脳辺縁発作をサブ分類します。</li>
	<li>実験プロトコルに基づく追加の行動クラスを含めることで、行動のより包括的なスクリーニングが可能になります。</li>
	<li>録画セッションの終了を 1 つの時間枠 (PTZ インジェクションの 1 時間後) でマークします。動物が強直性発作後に死亡した場合は、死亡時刻を終了マークで識別します。 注意: コーディングシートは、コーディングプロセスのどの時点でも保存でき、必要に応じてソフトウェア内で再度開き、継続的なコーディングや変更を行うことができます。</li>
</ol>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68112/68112fig3v2.jpg"> 
図3:PTZ投与後に観察された発作行動のスナップショット。 (A)PTZ注射後に最初に観察された痙攣の代表的な例です。すべてのフレームが表示されます(サンプリング30 fps)。けいれんは200ミリ秒未満続き、吻尾方向に動くことに注意してください。この例では、明白なテールリフティングは発生していません。(B)前傾に関連するミオクローヌスの代表的な例。この例では、ミオクローヌスが1秒以上持続し、複数の尾と前肢のクローヌスが発生しました。(C)大脳辺縁系発作の代表例。Racineステージ1の前に、マウスは体の姿勢の喪失を含む持続的な四肢ミオクローヌスを示しました。このシーケンスは、従来のラシーンスケールの伝統的な5つのステージすべてを示しています。この場合、マウスは 5 のスコアを受け取ります。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68112/68112fig3v2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
7. データ分析と可視化
<ol>
	<li>各行動カテゴリ(痙攣、ミオクローヌス、発作など)の最初の発生の遅延を、コーディングシートに記録された時間からPTZ注入時間を差し引くことによって計算します。</li>
	<li>各ミオクローヌスと発作の期間を計算し、それらを合計して各カテゴリの合計期間を取得します。</li>
	<li>イベントの合計数を記録時間で割ることにより、各動作の発生率を計算します。</li>
	<li>連続するイベント間の時間差を見つけることにより、各動作のイベント間間隔を計算します。</li>
	<li>該当する場合は、各レコーディングセッションにおける発作性行動の時間的分布に従ってエピソードを定義します。各エピソードの上記のパラメータを計算します。 注:発作の終了は発作後抑制期間につながり、このプロトコルのエピソードの終了を示します。発作性行動の再発は、新しいエピソードの始まりを示しています。 注:発作がない場合は、けいれんとミオクローヌスの時間分布に基づいて記録セッションを分類します。.</li>
	<li>各グループの Shapiro-Wilk 検定を使用して正規性を検定します。</li>
	<li>複数のグループ間のパラメトリック比較では、一元配置分散分析(ANOVA)検定を使用します。対応のあるデータについては、データ構造に応じて、対応のある t検定または反復測定分散分析を使用します。</li>
	<li>統計的有意性をp値0.05&lt;に設定します。さらに、p 値を 0.0001 未満に丸め、&lt;0.0001 として報告します。</li>
</ol>

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<li>Pollo, M. L. M., Gimenes, C., Covolan, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Male+rats+are+more+vulnerable+to+pentylenetetrazole-kindling+model+but+females+have+more+spatial+memory-related+deficits%5BTitle%5D)+AND+%22Epilepsy+Behav%22%5BJournal%5D)">Male rats are more vulnerable to pentylenetetrazole-kindling model but females have more spatial memory-related deficits.</a> Epilepsy Behav. 129, 108632(2022).</li>
</ol>

てんかんの行動特性評価は、てんかんの病態生理学および発作活動の研究で最も採用されている読み出しであり、新しい抗てんかん薬のスクリーニングに広く使用されています1,2。過去50年間に発表された研究のほとんどは、ロナルド・J・ラシーンが開発したプログレッシブスコアシステムを使用して、扁桃体と海馬の焚き付け中の行動発作の重症度を記述しています3。ラシーンスケールは、ラット3およびネコ4における行動と電気生理学的発作活動との間に強い相関関係を示した。この研究では、発作の行動表現を「(i)口と顔の動き、(ii)頭のうなずき、(iii)前肢のクローヌス、(iv)後ずさり、(v)後ずさりと転倒」の5つの進行性段階に分類しています3。そのシンプルさ、使いやすさ、解釈のしやすさ、採点の速さ、再現性により、てんかんや発作の研究におけるRacineスケールの使用は、現在でも拡大を続けています(図1)。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68112/68112fig1.jpg"> 
図1:Racineの1972年の研究が年間引用した数。 過去50年間で引用数が着実に増加していることに注目してください。2024 年 11 月 27 日に Web of Science で検索したところ、6,040 件の引用が見つかり、91 件のレコードに「出版年」フィールドの情報が含まれていなかったことがわかりました。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68112/68112fig1large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
その後、このスケールは、てんかんと発作を誘発する薬を使用する動物を含む、てんかんと発作の他の動物モデルに適用されました。カイニン酸誘発性発作5 およびてんかん重積状態(SE)6、ならびに局所7 および全身性ピロカルピン誘発性SE8の初期の記述では、ラシーンスケールを使用して誘発発作と自然発作の両方を定量化した。興味深いことに、これらの薬物は、電気刺激を受けた動物で観察され、ラシーンによって説明されているように、大脳辺縁系の発作を誘発しただけでなく、説明が不十分または頻度が低いさまざまな一連の行動も誘発しました9。
発作行動の多様性を把握するためのラシーンスケールの限界は、発作の焦点が大脳辺縁系以外の脳領域にある発作モデルを使用する研究者によって早期に特定されています。例えば、Garcia-Cairascoは、聴覚発作10における行動を評価するために動物行動学ツールを最初に使用した研究者の1人であり、発作性発作10,11の複雑さと時間的進行を明らかにした。最近、Ivan Solteszは、高度なビデオ深度分析と詳細な時間的符号化を使用して、電気的に燃え上がったラットの「隠れた行動指紋」を明らかにしました12。これらのアプローチに基づいて、ここでは、マウスのペンチレンテトラゾール誘発性急性発作に対する新しいコーディングシステムを紹介します。
ペンチレンテトラゾール(PTZ)は、GABA作動性神経伝達を阻害することにより発作を引き起こし13、ニューロンの興奮性の増加とニューロン集団の同期活性化をもたらします14,15。全身性PTZの単回高用量(40-80 mg / kg)の後、げっ歯類は可動性の低下、非特異的なひげの動き、全身のけいれんとミオクローヌスけいれん、口腔顔面と足のクローヌス、および本格的な大脳辺縁発作を示します16。てんかん重積状態モデルとは異なり、PTZ後の異常な行動は最大1時間続き、自然に寛解します16,17,18。以前の著者は、ラット17とマウス18のラシーンスケールの改訂版を提案しています。発作行動の多様性に新たな洞察を与えようとする試みにもかかわらず、彼らの新しいスケールには、野生走行やジャンプに関連する1つまたは2つの新しいレベル(レベル6、van Erum et al.18)と呼吸停止につながる強直性伸展(レベル7、van Erum et al.18)が組み込まれています。
このプロトコルは、PTZ 誘発性発作行動を定量化および表現するための新しいアプローチを提示し、特にけいれんとミオクローヌスに焦点を当てています。これらの行動は、全身性PTZ投与後に最も多く見られますが、発作やてんかんの研究では見過ごされがちです。したがって、このアプローチは、けいれんとミオクローヌスを特定し、それらを行動的に大脳辺縁系発作と区別するための特定の基準を提供することにより、重大な方法論のギャップに対処します。これは、けいれんとミオクローヌスが、PTZの単回投与と反復投与の両方で明確な時間的ダイナミクスを示すことを示しています。このコーディングシステムは実装が容易で、異常な活動の新しいパラメータを既存の方法論に統合し、発作発生メカニズムに関する新たな洞察を提供します。最後に、この新しい戦略は、ラボ間で発作行動の定量化を標準化し、再現性を高め、発作メカニズムの視野を広げる可能性を秘めています。

<table><tbody><tr><td>0.9%塩化ナトリウム溶液</td><td>フレゼニウス・カビ・ブラジル株式会社</td><td>74MK3168</td><td>静脈内使用のためのクローズドシステム;注射液、250 mL。</td></tr><tr><td>分析スケール</td><td>島津製作所</td><td>224年頃</td><td>最大容量:220 g、最小容量:10 mg、可読性:0.1 mg。シリアル番号:1311070096</td></tr><tr><td>カメラ</td><td>ヨルタン</td><td>ジョータン-8816AHD</td><td>IR CCDカメラ、NTSCシステム、2.0 MP解像度、3.6 mmレンズ、DC 12 V電源。</td></tr><tr><td>デジタルルクスメーター</td><td>ミニパ</td><td>MLM-1011</td><td>光の強度をルクス単位で測定します。</td></tr><tr><td>皮下注射針</td><td>デスカーパック</td><td>353101</td><td>サイズ:26.5g。</td></tr><tr><td>マウス</td><td>-</td><td>-</td><td>雄のC57BL/6野生型マウス。生後2〜3ヶ月。</td></tr><tr><td>ペンチレンテトラゾール</td><td>シグマ・アルドリッチ(メルク)</td><td>P6500-25G</td><td>粉末、中枢神経系刺激剤。購入済み:25g。保管:-25°C。</td></tr><tr><td>ソフトウェア:MouseLabTracker</td><td>&nbsp;ジュリアーノ・ビレラ</td><td>-</td><td>オープンソースソフトウェア、参考論文: DOI: 10.1016/j.jneumeth.2006.04.005. サイト: https://neuro.ufrn.br/softwares/mouselabtracker</td></tr><tr><td>ソフトウェア: Solomon Coder</td><td>アンド&aacute;s P&eacute;テル</td><td>-</td><td>オープンソースソフトウェア、v.19.08.02. サイト:&nbsp;https://solomon.andraspeter.com/</td></tr><tr><td>温湿度計</td><td>ひかり</td><td>HK-T240</td><td>温度と湿度を測定します。</td></tr></tbody></table>

ペンチレンテトラゾール誘発性発作の行動特性評価:ラシーンスケールを超えて

Behavioral Characterization of Pentylenetetrazole-induced Seizures: Moving Beyond the Racine Scale

PTZ誘発性発作時の発作挙動を詳細に説明するコーディング戦略とその能力を評価するために、最初にPTZを3回投与して試験し、C57BL/6マウスへの影響を観察しました(それぞれ40、60、80 mg / kg、N = 7、5、5)。PTZの3回の投与で観察された行動転帰は、1回の注射後に明確な用量依存的な違いを明らかにしました。40 mg / kgPTZで治療された動物はけいれんを示しましたが、大脳辺縁系発作やミオクローヌスは認められませんでした。.対照的に、60 mg/kg と 80 mg/kg で治療された動物では、一貫してけいれん、ミオクローヌス、および辺縁発作が発現しました。PTZを40mg/kgまたは60mg/kg投与した動物の死亡率は0%でした。ただし、80 mg / kgの用量では、死亡率は80%に達し、通常は強直性発作後の呼吸停止が原因です。これらの結果に基づき、単回注射と週1回注射では60mg/kg、毎日注射では40mg/kgの用量を選択しました。
次に、C57Bl/6マウス(N = 15、60 mg / kg、s.c.)に単回PTZ注射を投与し、注射後1時間の行動...

Detailed behavioral characterization of seizures is essential in animal models of epilepsy. Although various protocols exist for inducing seizures, the ...

behavioral-characterization-pentylenetetrazole-induced-seizures

Research

JoVE Journal

Neuroscience

神経科学

このビデオは、てんかん誘発性ラットのてんかん発作の脳波(EEG)記録を示しています。腹側海馬に電極を埋め込んだラットを脳波記録システムに接続し、プレキシガラスチャンバーに入れます。ラットは自由に動くことを許され、脳の活動が記録されて発作の発生を監視します。...

てんかん誘発性ラットにおけるてんかん発作の脳波記録

このビデオでは、GABA-A受容体拮抗薬であるペンチレンテトラゾール(PTZ)注射を用いてマウスでてんかんを誘発する過程を実演しています。PTZの腹腔内反復投与は、塩化物イオンの流入を阻害し、抑制性神経伝達を阻害し、発作を引き起こすニューロンの過興奮を引き起こすことにより、発作の閾値を徐々に低下させます。このプロセスは、慢性てんかんを模倣した自然発作の発散と発症をもたらします。...

マウスにおけるペンチレンテトラゾール誘発性てんかん発作モデルの確立

非拘束脳波radiotelemetryは自由に動くげっ歯類からin vivoでの長期的な脳波を記録する貴重な方法論的アプローチです。この詳細なプロトコールは、CNSのリズムとCNS関連行動の段階の信頼性の高い記録を得るために、異なる脳領域に定位硬膜外と深い脳内電極配置を説明しています。...

非拘束EEG Radiotelemetry：硬膜外とディープ脳内定位EEG電極配置

この論文は、鍼治療、てんかんモデル、およびげっ歯類の睡眠の分析の性能を示しています。鍼治療の手順とツボの特定について説明します。ピロカルピンまたはペンチレンテトラゾール(PTZ)は、てんかんを誘発するために使用されます。睡眠分析には、皮質電図(ECoG)、筋電図(EMG)、脳温度、および自発運動活動の記録が使用されます。...

鍼治療によりラットとマウスにおけるてんかんElectrocorticograms（ECoGs）の操作とスリープ

このプロトコルは pentylenetetrazole と化学的キンドリングの方法を記述しててんかんのマウス...

Pentylenetetrazole 誘起キンドリング マウス モデル

本稿では、全身ピロカルピン注射によるてんかん重積状態を誘導して無線テレメトリー...

側頭葉てんかんと脳波監視テレメーター システムを使用してマウスのピロカルピン モデル

ここでは、腹側海馬脳波との組み合わせで、てんかんと非てんかんラットのアスパラギン酸とグルタミン酸のリリースを分析する体内マイクロダイアリシス法について述べる。アスパラギン酸とグルタミン酸の細胞外濃度は、病気のさまざまな段階と相関があります。...

自由行動ラットの脳波記録中に興奮性アミノ酸の透析

てんかんのゼブラフィッシュモデルにおける行動と生理学的解析

この体系的なプロトコルは、反復的な軽度の外傷性脳損傷後の心的外傷後てんかんの新しい動物モデルを記述する。最初の部分は、変更された体重減少モデルを使用して外傷性脳損傷誘導のためのステップを詳述する。第2部では、単一および多チャンネルの脳波データ集録システムの外科的アプローチについて説明します。...

反復性びまん性外傷性脳損傷のマウスモデルにおける心的外傷後てんかんの誘導

この方法の目的は、マウスモデルにおける温熱療法または熱誘発発作をスクリーニングすることである。このプロトコルは、体温の上昇が発作につながるかどうかを判断するために、体温の継続的な監視を備えたカスタムメイドのチャンバの使用を記述しています。...

てんかんのマウスモデルにおける熱誘発発作の行動スクリーニング

プロトコルは連続的なビデオ脳波(EEG)のモニタリングと並行して行なわれるてんかんラットからの繰り返された脳脊髄液および血のコレクションを示す。これらは、さまざまな体液分子の変化と発作活動との関連性を探るのに役立ちます。...

脳波記録中のラットの側尾静脈からの脳脊髄液および血液のサンプリング

学ぶペンチレンテトラゾール誘発性発作における痙攣とミオクローヌスの行動特性評価法。コンピュータ支援ビデオ解析を用いて、従来のラシーンスケールでは捉えられない発作前後の詳細な行動を定量化し、抗てんかん薬の効果評価に活用できます。

ペンチレンテトラゾール誘発性発作の行動特性評価:ラシーンスケールを超えて

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