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DOI: 10.3791/68370-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study investigates the use of portable long-read sequencing for determining drug-resistant tuberculosis (TB) susceptibility in resource-limited settings. The protocol aims to provide accurate results comparable to gold standard methods, enhancing accessible TB diagnostics.
このプロトコルは、ロングリードシーケンシングプラットフォームを使用して結 核菌 の18の薬剤耐性領域のターゲットディープシーケンシングに最適化され、その後、ロングリードデータ用に設計された結核固有のバイオインフォマティクスパイプラインで分析されました。
携帯型ロングリードシーケンシングが、資源制限のある環境で結核耐性感受性の結果をゴールドスタンダード法に匹敵する精度で提供できるかどうかを調査し、アクセスしやすく質の高い結核診断の進展に寄与します。バイオインフォマティクスの専門知識を持たずに臨床サンプルから直接包括的な耐性プロファイルを提供することで、薬剤耐性結核の診断ツールとしてターゲット次世代シーケンシングを活用します。長読みシーケンスを用いた当社のプロトコルは、リアルタイム耐性検出よりも迅速な処理時間とシンプルなワークフローを提供し、包括的な結核診断を促進し、最小限のインフラで資源が限られた環境でのアウトブレイク追跡を強化する可能性があります。
まず、各アンプリコンサンプルの濃度に基づいて100ナノグラムを計算し、必要な体積をクリーンなPCRチューブに移します。試料中のアンプリコンの総質量を求めるには、与えられた式を用います。ヌクレアーゼフリーの水を使って、各サンプルの総体積を12.5マイクロリットルに調整します。
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