Name: うつ病のマウスモデルにおける嗅覚快楽バイアスを測定するための嗅覚選好試験 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-11T13:40:00.000+00:00
Duration: 6 min 27 s
Description: 学ぶ嗅覚選好試験によるうつ病マウスモデルの嗅覚快楽バイアス評価法。マウスを用いた行動解析で感情処理の神経メカニズムと治療効果を解明する。

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すべての動物の世話と実験手順は、国内およびヨーロッパ(2010/63 / EU)のガイドラインに従い、フランス研究省(APAFiS:#16380-2018080217358599_v1;APAFIS #51636-2024101718013761_v4)。C57BL/6JRjの雄と雌のマウス(UCMSモデル)とC57BL/6NTac(CORTモデル)の雄マウス(8週齢)を社会的に飼育し(ケージあたり4-5匹)、標準条件(23 ± 1 °C、湿度40%)で14/10時間の明暗サイクル(午前7時に点灯)で維持し、餌と水 を自由に使用しました。
1. 実験のセットアップ
<ol>
	<li>アリーナの設置<ol>
		<li>灰色のプレキシガラスの壁と白い床で作られた2つのコンパートメントアリーナ(45 cm × 50 cm × 25 cm)で構成される実験セットアップを準備します。2つのコンパートメント(25 cm×45 cm)をグレーのプレキシガラスの壁(37 cm×25 cm)で分割します。</li>
		<li>穴あきペトリ皿(60 mm×15 mm、直径5 mmの7つの穴)を各コンパートメントから壁の底に置きます。</li>
		<li>両面接着剤または感圧接着剤(Blu-tackなど)を使用して、シャーレを壁に垂直に固定します。</li>
		<li>アリーナの上にカメラを設置して、動物の行動(アリーナから2 m上)を記録し、実験を通じて動物の動きを自動的に追跡します。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>臭いの選択<ol>
		<li>実験に先立って、テストする中性、陽性、および陰性の原子価を持つ臭気のリストを選択します(例については 表1 を参照してください)。</li>
		<li>選択したすべての臭気が同様の蒸気圧を持っていることを確認してください。さらに、光イオン化検出器(PID)26を使用して、一部の臭気についてアリーナ全体の拡散を評価します。</li>
		<li>それぞれの臭いを別々の日にテストします。 注:最初に中性臭いの使用を計画し、次に食欲をそそる臭いを使用し、嫌悪臭で終わることを計画して、日ごとの探索効果を最小限に抑えることをお勧めします。この順序により、あるテスト日から別のテスト日へのキャリーオーバーの影響が最小限に抑えられます。あるいは、ランダムなプレゼンテーションを使用することもできますが、すべての実験グループを同じ臭気シーケンスでテストする必要があります。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>実験群の設計<ol>
		<li>マウスを少なくとも2つの実験グループに分けます:対照マウスとうつ病のモデルを受けるマウス。同じグループの動物を同じケージに収容します。 注意:統計的有意性を得るために、各実験グループには少なくとも約7〜8人の個人が含まれている必要があります。ケージは、ケージの影響を最小限に抑えるために、動物の家の近くに配置する必要があります。</li>
		<li>選択したうつ病のモデルを使用して、関連するマウスグループでうつ病様表現型を誘導します。 注:マウスでうつ病様の行動を誘発するプロトコルを説明することは、この記事の範囲を超えています。しかし、この研究では、この嗅覚選好テストの代表的な結果として、2つの異なるモデル(予測不可能な慢性軽度ストレス[UCMS]とコルチコステロン[CORT])27,28を使用した実験を提示しています。まもなく、UCMS モデルは、数週間にわたるさまざまな異なる環境ストレス要因への曝露に依存していますが、CORT モデルは、マウスの飲料水に溶解したコルチコステロンを慢性的に投与することで構成されます (マウスの飲む量に応じて約 5 mg/kg/日)。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
2.慣れ段階
<ol>
	<li>一般的な慣れと取り扱い<ol>
		<li>到着したら、寝具を交換せずにマウスを1週間放置します。ケージに補助的な綿素材とイグルーを追加して、ストレスを軽減します。</li>
		<li>1週間後、すべてのマウスを毎日3〜4日間優しく取り扱い、できれば実験室でカップの取り扱いに慣れさせます。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>試験の実験条件<ol>
		<li>実験開始の30分前にマウスを行動試験室に移します。 注:理想的には、行動室には2つの別々の部分が含まれ、動物が一方の部分にいて、テストされたマウスがもう一方の部分で実行できるようにする必要があります。</li>
		<li>標準的な住宅条件(23±1°C、湿度40%)が維持されており、部屋に不快な音、照明、臭いがないことに注意してください。</li>
		<li>ルクスメーターを使用して、アリーナの照明を約40ルクスに設定します。アリーナ内の照明が均一であることを確認してください。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>アリーナへの慣れ<ol>
		<li>きれいな濾紙(42.5 mm)を両方のペトリ皿(60 mm×15 mm)に加えます。</li>
		<li>透明なテープを使用して、ペトリ皿の蓋を底に取り付けます(垂直に配置するため)。</li>
		<li>初日は、同じハウジングケージのすべてのマウスをアリーナに10分間静かに置き、新恐怖症を軽減します。 注意: テールで拾うことによるストレスを避けるために、常にカップの取り扱いでマウスをアリーナに入れてください。</li>
		<li>翌日、すべてのマウスを個別にアリーナに導入し、2つのコンパートメントの間だけで、動作を10分間記録します。</li>
		<li>2〜3日続けて繰り返します。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>探索基準<ol>
		<li>ペトリ皿が置かれた2つのエリア(25 cm 15 cm)を定義し、各動物が各ゾーンで過ごす時間を測定します。</li>
		<li>これらの測定値を、個々のすべての慣れステップで平均化します。</li>
		<li>各ゾーンでの平均滞在時間が 50 秒を超える場合、基準は満たされます。そうでない場合は、基準に達するまで慣れセッションを繰り返すか、動物を分析から除外します。 注:1日あたり最大2回の馴化セッション(午前と午後)を実行できます。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
3. テストフェーズ
<ol>
	<li>臭いの準備<ol>
		<li>テスト当日は、ケミカルフードの下で正しい希釈で臭いを準備します。化学構造に応じて、鉱物油または蒸留水で臭いを希釈します。汚染を避けるために、鉱物油は臭気物質から離れた別の換気された部屋に保管してください。 注:新しい実験を開始するときは、新しい鉱油のボトルを使用することをお勧めします。</li>
		<li>臭気溶液をガラスバイアルに保管します。臭気汚染を引き起こす可能性のあるプラスチックチューブ容器は避けてください。</li>
		<li>各マウスを試験する直前に、フィルターチップを使用してマイクロピペットで200μLの臭気溶液を採取し、2つのシャーレのいずれかのフィルターペーパーに置きます。</li>
		<li>2番目のペトリ皿の他の濾紙は手つかずのままにしておきます。</li>
		<li>テストルームでペトリ皿を移し、アリーナの壁に垂直に固定します。 注意:臭気混入を防ぐため、臭気溶液を実験室に用意して捨てないでください。実験中は定期的に手袋を交換してください。臭気操作中に手袋が汚染された疑いがある場合は、マウスをつかんでテストする前に手袋を交換してください。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>行動テスト<ol>
		<li>各マウスをアリーナの2つのコンパートメントの間だけに個別に配置します。</li>
		<li>10分間録画します。</li>
		<li>アリーナからマウスを取り外します。</li>
		<li>臭いのペトリ皿を取り除きます。</li>
		<li>アリーナを消毒液(エタノール70%など)で洗浄し、乾燥させます。</li>
		<li>濾紙を捨てて、次のマウスのために臭いの準備を繰り返します。</li>
		<li>理想的には、1日1つの臭いだけをテストします。最初に中性の臭気を優先的に使用し、次に正の臭気、最後に陰性の臭気を優先的に使用します ( 図 1 を参照)。 注意:実験の日を通して、ほぼ同じ時間に慣れとテストの両方のステップ を実施 します(理想的には午前9時から午後3時の間)。動物の数に長い時間が必要な場合は、日中のバイアスを避けるために、異なる実験グループを交互にテストするように注意してください。男性と女性を同じ実験でテストする必要がある場合は、性別を次々とテストすることをおすすめします。 注意: 臭いの汚染を避けるために、テストの毎日清潔なペトリ皿を使用してください。注目すべきは、穴あきペトリ皿は、適切な洗浄と臭気の除染後、いくつかの実験に再利用できます。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
4. データ分析
<ol>
	<li>行動追跡<ol>
		<li>自動追跡プログラムを使用して、テストを通じてマウスの位置を記録します。</li>
		<li>分析のためにアリーナに個別のゾーンを定義します ( 図 1 を参照)。<ol>
			<li>「臭気ゾーン」(25 cm × 15 cm)、つまり、臭いが染み込んだフィルターペーパーと一緒にペトリ皿が置かれる領域 (つまり、表面コンパートメントの約 3 分の 1 を表す臭いに最も近い領域) を定義します。</li>
			<li>「臭気ゾーン」に対して対称的であるが、ペトリ皿に臭気が追加されていない「コントロールゾーン」(25 cm×15 cm)を定義します。</li>
			<li>「臭気ゾーンの後ろ」(25 cm×30 cm)を定義します。つまり、コンパートメントの残りの部分は、臭気ペトリ皿が置かれる場所です。</li>
			<li>「ビハインドコントロールゾーン」(25 cm × 30 cm)を定義し、「ビハインドコントロールゾーン」に対して対称で、残りの無臭コンパートメントで構成されます。 注:マウスの体の中心点の追跡は、動物の嗅覚の好みを分析するのに十分です。しかし、各マウスの鼻を具体的に追跡することで、動物による嗅覚調査をより正確に説明することができます。</li>
		</ol>
		</li>
	</ol>
	</li>
	<li>快楽的な反応の読み出し<ol>
		<li>自動追跡を使用して、すべてのマウスとテストの毎日について、慣れ手順を含む次の情報を収集します。<ol>
			<li>アリーナで移動した合計距離(m)を記録します。</li>
			<li>アリーナの各ゾーンで費やした時間を記録します。</li>
			<li>アリーナの各ゾーンのエントリー数を記録します。</li>
		</ol>
		</li>
		<li>総移動距離を使用して、主な自発運動効果を評価します。</li>
		<li>さまざまな匂いに対する嗅覚の好みの違いを評価するには、主要な読み出しを使用します。<ol>
			<li>臭いゾーンで過ごした時間を使用してください。</li>
			<li>臭気ゾーンのエントリ数を使用します。</li>
			<li>匂いゾーンで過ごした時間を、慣れ中にこのゾーンで過ごした時間に正規化して計算された選好指数を使用します(正規化はすべてのグループのマウスで実行されます)。平均は臭気ゾーンで費やした時間の算術平均を指し、sdはその標準偏差を指します。 
			<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/68391/68391eq001v2.jpg" style="margin: auto;"></li>
			<li>次のように、移動距離、臭気ゾーンで費やした時間、および臭気ゾーンへのエントリ数を正規化した値の平均として計算される臭気探索インデックスを使用します。 
			<img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/68391/68391eq002.jpg" style="margin: auto;"> 
			<img alt="Equation 3" src="/files/ftp_upload/68391/68391eq003v2.jpg" style="margin: auto;"> 注:この選好指数は、必要に応じて、たとえば、臭気ゾーン と コントロールゾーンで費やした時間を比較することにより、適応させることができます。グループが慣れ中の「臭気ゾーン」の探索に大きな違いを示した場合、正規化は、すべてのグループを組み合わせたものではなく、対照グループのみに対して実行できます。</li>
		</ol>
		</li>
		<li>対照マウスおよびうつ病様マウスのこれらの読み出しを、平均の平均±標準誤差(SEM)として視覚的に表します。</li>
		<li>反復測定の二元配置分散分析(ANOVA)とそれに続く事後検定(ここでは未修正のFisherの最小有意差検定)を使用して、実験グループ、臭気(反復測定係数)、および交互作用効果因子の両方を考慮します。交互作用因子は、グループ間の差が提示されたすべての匂いで一貫しているかどうかを示します。</li>
		<li>適応テスト(Shapiro-Wilk検定、Bartlettテスト)を使用して正規性と等分散性を確認します。統計的有意性は、*p &lt; 0.05、**p &lt; 0.01、***p &lt; 0.001、****p &lt; 0.0001に設定されました。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

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</ol>

<table><tbody><tr><td>2,4,5-トリメチルチアゾール</td><td>シグマ・アルドリッチ</td><td>W332518-100G-K</td><td></td></tr><tr><td>2-トランスオクテナール</td><td>シグマ・アルドリッチ</td><td>52464-1MLの</td><td></td></tr><tr><td>ブルータック</td><td>UHUの</td><td>該当なし</td><td></td></tr><tr><td>濾紙</td><td>フィッシャーサイエンティフィック</td><td>11710125</td><td>42.5ミリメートル</td></tr><tr><td>ガラスバイアル</td><td>デュッチャー・ドミニク</td><td>958983</td><td></td></tr><tr><td>鉱油</td><td>シグマ・アルドリッチ</td><td>M5904-500MLです</td><td></td></tr><tr><td>ノルドゥス・エトヴィジョン</td><td>ノルドゥス・エトヴィジョン</td><td>バージョン 17.5</td><td>あるいは、オープンソースのICYソフトウェアまたはDeeplabcutのシングルマウストラッカーを使用することもできます</td></tr><tr><td>ペトリ皿</td><td>隼</td><td>351007</td><td>60 mm x 15 mmのペトリ皿、直径5 mmのカスタムメイドの穴が7つある</td></tr><tr><td>プレキシガラスアリーナ</td><td>カスタムメイド&nbsp;</td><td>該当なし</td><td>45 cm x 50 cm x 25 cmのプレキシガラスアリーナは、中央の37 cm x 25 cmの壁によって2つの部屋に分割されています。</td></tr></tbody></table>

うつ病のマウスモデルにおける嗅覚快楽バイアスを測定するための嗅覚選好試験

An Olfactory Preference Test for Measuring Olfactory Hedonic Biases in Mouse Models of Depression

うつ病様マウスが負の嗅覚バイアス14,29を示し、ここで説明する嗅覚選好テストのプロトコルを使用して確実に測定できることを確認するために、うつ病の2つの異なるマウスモデルで異なる匂いに対する快楽反応を評価しました。
まず、28から4週間続く予測不可能な慢性軽度ストレス(UCMS)のマウスモデル(詳細なプロトコルについては補足ファイル1を参照)を使用して、若い雌のC57BL / 6JRjマウスに抑うつ様表現型を誘導しました(図2A、B)。これらの雌マウスを嗅覚選好試験で試験し、雄マウス尿(MU、純粋)を食欲臭、2,4,5-トリメチルチアゾール(TMT、鉱物油中5%)を嫌悪臭として投与しました。平均して、すべてのマウスは、慣れ中に「コントロール」ゾーンと「匂い」ゾーンの両方で少なくとも50秒を費やし、基準を満たしました(図2C)。しかし、慣れさせることで、UCMSマウスはコントロールと比較して「コントロールゾーン」で過ごす時間が有意に長かったが、臭気が加わるゾーンについては大きな違いはないので、この差は無視できる。距離に関しては、対照マウスはMUにばく露されたとき、UCMSよりも有意に多く動きましたが、慣れ中またはTMTの存在下では動きませんでした(図2D)。最後に、快楽反応のすべての読み出し(臭気ゾーンで過ごした時間、臭気ゾーンへのエントリ数、および選好指数)は、対照とUCMSの女性との間に有意差または統計的傾向を示しています(図2E-G)。この影響は、快楽反応と自発運動反応を組み合わせた尺度である全球臭気探索指数を通じても確認できます(図2H)。したがって、一貫して、すべての読み出しは、食欲と嫌悪の両方の嗅覚刺激に反応して負の快楽バイアスを示しています。興味深いことに、感情スコアは、大量の行動テスト14に基づいて不安および抑うつ様表現型の正規化値として計算され、MUおよびTMTの両方の匂い探索指数と正の相関があり(図2I)、正および否定の匂い物質に対する行動反応と不安および抑うつ様表現型との関係を示しています。
次に、同じUCMSプロトコルを使用して、今回は雄マウスにうつ病様表現型を誘導しました。嗅覚選好試験中、これらのマウスは、食欲をそそる雌マウス尿(FU、純粋)と、以前と同様にTMTに陰性の臭気として曝露されました(図3A、B)。馴化中に4つのゾーンで費やされた時間や、テスト中に移動した距離に差はありません(図3C、D)。臭気ゾーンで費やされた時間は、コントロールと比較して、UCMSでのFUおよびTMT探索の大幅な減少を示しています(図3E)。さらに、UCMSマウスは、匂いゾーンに有意に少ない、または入る傾向があり、FUおよびTMTの両方について有意に低下した選好指数を示し(図3F、G)、抑うつ様状態における負の嗅覚バイアスを確認する。同様に、匂い探索指数は、UCMSマウスのFUおよびTMTに対する行動反応が対照群と比較して負にシフトしたことを示しており(図3H)、これらは動物の感情スコアと正の相関がある傾向があります(図3I)。
3番目の実験では、雄のC57BL / 6NTacマウスの飲料水中のコルチコステロン(CORT)の慢性投与に依存するうつ病の別のモデルに頼りましたが、対照マウスはビヒクル(Veh)溶液(10%2-ヒドロキシプロピル-ベータ-シクロデキストリン)のみを受け取ります27。CORTまたはVeh処理を4週間行った後、マウスを4日間慣らした後、中性臭気(OCT:2-trans octenal、水中1%)、陽性臭(PO:ピーナッツ油)、陰臭(TMT:2,4,5-トリメチルチアゾール、鉱物油中5%)に曝露した(図4A,B)。慣れにより、VehとCORTの間に違いはありませんでした(図4C)。しかし、両グループとも「コントロールゾーン」よりも「ニオイゾーン」で過ごす時間が有意に多かった。移動距離に差はありませんが、VehマウスがCORTよりも多く移動した陽性臭気(PO)を除きます(図4D)。重要なことに、UCMSマウスと同様に、中性で食欲をそそる匂いにさらされると、CORTマウスの匂いゾーンで過ごす時間が大幅に短縮されました(図4E)。臭気の探索の減少は、臭気ゾーンへの侵入数が大幅に減少するか、減少する傾向によっても見られます(図4F)。この場合、分析された読み出しによってグループ間の違いは明らかになりますが、これはおそらく、使用される動物の数に関連する制限と、TMT博覧会後に観察された探索時間の短さによって引き起こされる潜在的な床効果によるものです。全体として、CORTマウスでは、すべての匂い刺激について、Vehと比較して選好指数が有意に低くなっています(図4H)。最後に、すべての匂いの匂い探索指数は、動物の感情スコアと有意に相関しており(図4I)、この嗅覚選好テストが、うつ病のいくつかのマウスモデルにおける否定的な感情バイアスを評価するのに適したツールであることを改めて示しています。
最後に、観察された違いが感情的な偏見ではなく、運動活動の減少によって引き起こされる可能性を排除できます。実際、移動した総距離を評価する場合、慣れ中のグループ間で移動運動に違いはありません(図2D、 図3D、 図4D)。さらに、統計分析に基づくと、タスクエンゲージメントの一般的な減少や新規性効果も、これらのバイアスを説明することはできません。実際、嗅覚指数分析では、匂い因子の有意な影響が見られ、実験群と匂いとの間に有意な相互作用は見られませんでした。これらの結果は、うつ病様マウスが実際にこの課題を実行し、その探索の減少が各嗅覚の手がかりに特異的であることを示しています。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68391/68391fig1v2.jpg"> 
図1:嗅覚選好テストのタイムラインと設定の一般的な概略図。 マウスは最初にアリーナに慣れます。慣れの初日に、同じハウジングケージのマウスを一緒に配置して、新恐怖症を軽減します。翌日、彼らは個別にアリーナに配置されます。慣れた後、チャンバーの1つに臭いが加わります。中性の臭気が最初に優先的にテストされ、次に正の臭気、最後に否定的な臭気がテストされます。分析のために、アリーナは4つの異なるゾーンに分割できます。Biorenderで作成。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68391/68391fig1v2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68391/68391fig2v2.jpg"> 
図2:うつ病のUCMS雌マウスモデルにおける負の嗅覚バイアス。 (A,B)研究のタイムラインと実験グループ: 対照マウスと UCMS (予測不可能な慢性軽度ストレス) 雌マウスは、嗅覚選好試験で陽性 (MU: 雄マウス尿、純粋) および陰性 (TMT: 2,4,5-トリメチルチアゾール、鉱油中 5%) で試験されます。Biorenderで作成。(C)UCMSマウスは、慣れ中の対照と比較して、「対照ゾーン」で平均して有意に長い時間を過ごし、「背後の臭ゾーン」で過ごす時間が少なかった（グループ）F(1, 12) = 74.03, p &lt; 0.0001;ゾーン: F(2.434, 29.21) = 7.688, p = 0.0012;交互作用: F(3, 36) = 5.148, p = 0.0046)。(D)MUに曝露された場合、UCMSで移動した総距離は大幅に減少しましたが、Habituation(Hab)およびTMTでは移動しませんでした(グループ:F(1、12)= 4.664、p = 0.0518;臭気:F(1.871、22.45)= 4.846、p = 0.0195;交互作用: F(2, 24) = 4.797, p = 0.0177)。(E)UCMSマウスは、MUおよびTMTの探索に費やした時間が大幅に短縮されました(グループ:F(1, 12) = 24.39, p = 0.0003;臭気:F(1、12)= 59.69、p &lt; 0.0001;交互作用: F(1, 12) = 2.267, p = 0.1580)。(F)UCMSマウスは、臭気ゾーンよりも少ない値に入ったか、または匂いゾーンに入る傾向がありました(グループ:F(1、12)= 9.279、p = 0.0102;臭気:F(1、12)= 5.100、p = 0.0433;交互作用: F(1, 12) = 1.649, p = 0.2233)。(G)MUおよびTMTの選好指数は、UCMSマウスで有意に減少します(グループ:F(1, 12) = 24.39, p = 0.0003;臭気:F(1、12)= 59.69、p &lt; 0.0001;交互作用: F(1, 12) = 2.267, p = 0.1580)。(H)MUおよびTMTの臭気探索指数は、UCMSマウスで大幅に減少します（F(1,12)= 14.71、p = 0.0024;臭気:F(1,12)= 0、p &gt; 0.9999;交互作用: F(1, 12) = 0.02630, p = 0.8739)。(I) MUとTMTの匂い探索指数は、どちらも動物の感情スコアと正の相関がある(MU: Pearson R2 = 0.4837, F(1,12) = 11.24, **p = 0.0058;TMT: Pearson R2 = 0.5340, F(1,12) = 13.75, **p = 0.0030)。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68391/68391fig2v2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68391/68391fig3v2.jpg"> 
図3:うつ病のUCMS雄マウスモデルにおける負の嗅覚バイアス。 (A,B)研究のタイムラインと実験グループ: 対照マウスと UCMS 雄マウスは、嗅覚選好試験で陽性 (FU: 雌マウス尿、純粋) と陰性の臭気 (TMT: 2,4,5-トリメチルチアゾール、鉱油中 5%) でテストされます。Biorenderで作成。(C) 慣れを通じてアリーナの異なるゾーンで費やされた時間には、平均して差はありません(グループ:F(1, 13) = 3.921, p = 0.0693;ゾーナー = F(1.688, 21.94) = 34.57, p &lt; 0.0001;交互作用: F(3, 39) = 0.7385, p = 0.5355)。(D)コントロールとUCMSの間で移動した合計距離に違いはありません(グループ:F(1、13)= 2.313、p = 0.1522;臭気:F(1.722、22.38)= 1.746、p = 0.1998;交互作用: F(2, 26) = 0.8806, p = 0.4266)。(E)FUおよびTMTを用いた臭気ゾーンの探索に費やされた時間は、UCMSマウスで大幅に短縮されました（グループ）F(1, 13) = 6.808, p = 0.0216;臭気:F(1,13)= 16.21、p = 0.0014;交互作用: F(1, 13) = 0.3304, p = 0.5753)。(F)UCMSマウスは、TMTの臭気ゾーンに有意に少ない回数で入り、FUの傾向がありました(グループ:F(1、13)= 6.572、p = 0.0236;臭気:F(1,13)= 3.784、p = 0.0737;交互作用: F(1, 13) = 0.2145, p = 0.6509)。(G)UCMSマウスの選好指数は、FUおよびTMTで有意に低下します(グループ:F(1,13)= 6.808、p = 0.0216;臭気:F(1,13)= 16.21、p = 0.0014;交互作用: F(1, 13) = 0.3304, p = 0.5753);(H)UCMSの臭気探査指数は、両方の臭気で大幅に減少します(グループ:F(1、13)= 12.42、p = 0.0037;臭気:F(1、13)= 0.002580、p = 0.9603;交互作用: F(1, 13) = 0.5804, p = 0.4598)。(I)FUとTMTの匂い探索指数は、動物の感情スコアと正の相関がある傾向があります（FU:ピアソンR2 = 0.2573、F(1, 13)= 4.504、p = 0.0536;TMT: Pearson R2 = 0.2266, F(1, 13) = 3.809, p = 0.0729)。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68391/68391fig3v2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68391/68391fig4v2.jpg"> 
図4:うつ病のCORT雄マウスモデルにおける負の嗅覚バイアス (A,B) 研究のタイムラインと実験グループ:VehおよびCORT雄マウスは、中性(OCT:trans-2-octenal、水中1%)、陽性(PO:ピーナッツ油、純粋)、および陰性の臭気(TMT:2,4,5-トリメチルチアゾール、鉱油中5%)で嗅覚選好試験でテストされました。VehマウスとCORTマウスには、実験の全期間中、それぞれビヒクルおよびビヒクル+コルチコステロン溶液を投与します。.Biorenderで作成。(C) 慣れ中にアリーナの異なるゾーンで過ごした平均時間 (グループ: F(1, 10) = 0.07588, p = 0.7886;ゾーン:F(2.224、22.24)= 6.939、p = 0.0036;交互作用: F(3, 30) = 0.7033, p = 0.5575)。(D)馴化(Hab)とさまざまな臭気(グループ:F(1, 10) = 4.193, p = 0.0678;臭気:F(3、30)= 11.80、p &lt; 0.0001;交互作用: F(3, 30) = 1.489, p = 0.2375)。(E)CORTマウスは、OCTおよびPOについてVehよりも臭気ゾーンで過ごす時間が短い(グループ:F(1, 10) = 5.094, p = 0.0476;臭気:F(2、20)= 28.87、p &lt; 0.0001;交互作用: F(2, 20) = 3.841, p = 0.0388)。(F)CORTマウスは、Vehと比較して臭気ゾーンに入る回数が少ないか、または匂いゾーンに入る傾向が少なかった（グループ）F(1,10)= 6.832、p = 0.0259;臭気:F(2、20)= 2.738、p = 0.0889;交互作用: F(2, 20) = 0.2902, p = 0.7512)。(G) CORT qmiceは、OCTおよびPOの下位選好指数を表示します(グループ:F(1, 10) = 5.895, p = 0.0356;臭気:F(2、20)= 20.83、p &lt; 0.0001;交互作用: F(2, 20) = 1.437, p = 0.2611)。(H)臭気探索指数は、すべての臭気についてUCMSマウスで大幅に減少します(グループ:F(1、10)= 12.35、p = 0.0056;臭気:F(2、20)= 0.04381、p = 0.9572;交互作用: F(2, 20) = 0.3622, p = 0.7006)。(I)各匂いの匂い探索指数は、動物の感情スコアと正の相関があります(OCT:ピアソンR2 = 0.5601、F(1、10)= 12.73、**p = 0.0051;PO: ピアソン R2 = 0.4495, F(1, 10) = 8.165, *p = 0.0170;TMT: Pearson R2 = 0.5061, F(1, 10) = 10.25, **p = 0.0095)。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68391/68391fig4v2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>名前</td>
			<td>略称</td>
			<td>希釈</td>
			<td>原子価</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2,4,5-トリメチルチアゾール</td>
			<td>TMTの</td>
			<td>5%の鉱物油</td>
			<td>－</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-トランスオクテナール</td>
			<td>10月</td>
			<td>1%の水</td>
			<td>ニュートラル</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>雌マウスの尿</td>
			<td>フー</td>
			<td>清い</td>
			<td>＋</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>オスのマウス尿</td>
			<td>ミュー</td>
			<td>清い</td>
			<td>＋</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ピーナッツオイル</td>
			<td>発注書</td>
			<td>清い</td>
			<td>＋</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
表1:中性、正、負の原子価を持つ臭気の例。
補足ファイル1:4週間の予測不可能な慢性軽度のストレスに対するプロトコル。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68391/Supplementary%20File%201.docx" target="_blank">このファイルをダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>

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嗅覚機能の障害は、パーキンソン病、アルツハイマー病、ハンチントン病を含む多くの神経変性疾患に共通する特徴です。本稿では、神経変性疾患のマウスモデルにおける嗅覚能力の測定に使用できる、マウスの嗅覚弁別と検出を評価するための一連の試験について述べる。...

神経変性疾患のマウスモデルのための嗅覚アッセイ

この原稿は、げっ歯類の嗅覚系を調べるためのプロトコルを説明しています。嗅覚馴染/嗅覚異常試験により、研究者は、マウスが繰り返し提示される匂いに慣れるかどうか、およびマウスが新しい匂いを嗅いだときに馴染み消すかどうかを判断できます。...

マウスにおける臭気差別と馴化のためのテスト

私たちは、マウスにおけるシンプルで偏りのない嗅覚テストを提示します。このプロトコルを使用すると、嗅覚の識別、好み、回避、および水と比較した新しい匂いに対する感受性を...

シンプルでコンピュータ支援嗅覚テストマウス用

マウスにおける食物選好度の社会的伝達の調査のためのプロトコルを提案する.この手順では、可能な限りアプリケーションの長所と例えば、広告マウス...

食品の好み行動の社会的伝達の評価

ここでは、匂い弁別学習をテストする連想学習タスクにマウスを養成します。このプロトコルでは、脳の学習誘起構造変化に関する研究も可能です。...

嗅覚学習とマウスにおける差別の客観的かつ再現性のあるテスト

うつ病の慢性絶望マウスモデル(CDM)は、反復的な強制水泳セッションと、読み出しとしての別の遅延水泳段階からなる。これは、少なくとも4週間安定な慢性抑うつ様状態の誘導のための適切なモデルを表し、亜慢性および急性治療介入を評価するために修正可能である。...

うつ病の動物モデル - 慢性絶望モデル(CDM)

この記事では、新しいマウス判断バイアスプロトコルの詳細な説明を提供します。この嗅覚掘り作業の情動状態に対する感受性の証拠も実証され、多様な研究分野にわたるその有用性が議論される。...

嗅覚掘削作業によるマウス判定バイアスの評価

昆虫の嗅覚システムは、アンテナ上にあるすべての嗅覚受容体の神経細胞（ORNs）から、個々に収容されたものからの応答を加算しているelectroantennograms（EAG）と、単一感覚子記録（SSR）の形で記録嗅覚誘発応答のためのユニークな機会を提供するそれぞれ感覚器、。...

蛾嗅覚系の電気生理学的測定

ケージド化合物の光分解は、様々な生理活性化合物の濃度の急激かつローカライズされた増加の生産を可能にする。ここでは、解離マウス嗅神経細胞における嗅覚情報伝達の研究のためのケージドcAMPまたはケージのCaの光分解を組み合わせたパッチクランプ記録を取得する方法を示します。...

嗅神経細胞の繊毛のケージド化合物のフラッシュフォトリシス

学ぶ嗅覚選好試験によるうつ病マウスモデルの嗅覚快楽バイアス評価法。マウスを用いた行動解析で感情処理の神経メカニズムと治療効果を解明する。

うつ病のマウスモデルにおける嗅覚快楽バイアスを測定するための嗅覚選好試験

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