うつ病のマウスモデルにおける嗅覚快楽バイアスを測定するための嗅覚選好試験

感情処理における否定的なバイアスは、うつ病性障害の大きな特徴です。このバイアスは、病気の生理病理学をよりよく理解するために特に興味深いものです。ここでは、うつ病の雄と雌の両方のマウスモデルにおいて、さまざまな原子価に関連する匂いを使用して、生来の匂い評価を信頼できる評価するためのプロトコルを提案します。

マウスモデルにおける快楽バイアスの評価は、誘発されたうつ病様表現型をより適切に評価するために、また、原子価割り当てのこれらの変化の背後にある神経メカニズムを調査するためのツールとしても不可欠です。全体として、このプロトコルは、うつ病の根底にあるメカニズムと治療効果を理解するためのトランスレーショナルリサーチに新しい道を提供します。将来的には、これらの感情処理の混乱と潜在的な性特異的メカニズムの背後にある脳回路を、これらの経路に対する抗うつ薬の作用とともに解読しようとします。

まず、灰色のプレキシガラスの壁と白い床を備えた 45 センチメートル x 50 センチメートル x 25 センチメートルの 2 コンパートメント アリーナを使用して実験セットアップを準備します。37センチメートル×25センチメートルの灰色のプレキシガラスの壁を使用して、アリーナを25センチメートル×45センチメートルの2つの等しい区画に分割します。穴あきシャーレを接着剤で固定し、各コンパートメントの壁の底に置きます。

次に、両面接着剤またはブルータックを使用して、各ペトリ皿をアリーナの壁に垂直に固定します。次に、アリーナから 2 メートル上にカメラを配置して動物の行動を記録し、実験中の動物の動きを自動的に追跡できるようにします。次に、マウスを少なくとも2つの実験グループ、対照マウスと試験群マウスに分けます。

実験開始の30分前に各マウスを行動試験室に移します。ルクスメーターを使用して、アリーナの照明を約 40 ルクスに設定し、照明が均一に分散されていることを確認します。次に、アリーナの2つのペトリ皿のそれぞれに42.5ミリメートルのきれいなろ紙を追加します。

初日は、ネオフォビアを減らすために、同じハウジングケージのすべてのマウスをアリーナに10分間そっと入れます。テスト当日、正しい希釈液を使用して、化学フードの下でガラスバイアルに臭いを準備します。化学的性質に応じて、臭気剤を鉱物油または蒸留水で希釈します。

各マウスをテストする直前に、フィルターチップ付きのマイクロピペットを使用して、ボンネットの下に200マイクロリットルの臭気溶液を収集します。ペトリ皿の1つのろ紙に溶液を分配します。もう一方のペトリ皿の2番目のろ紙は処理せずに残します。

シャーレを試験室に移します。次に、それらをアリーナの壁に垂直に固定します。各マウスを 2 つのコンパートメントの間の中央にあるアリーナに個別に配置します。

オーバーヘッドカメラを使用して10分間行動を記録します。観察期間が終了したら、闘技場からマウスを取り外します。臭いを取り除く ペトリ皿 アリーナから。

次に、70%エタノール消毒液を使用してアリーナを洗浄し、完全に乾燥させます。使用済みのろ紙を捨て、次のマウス用の次の臭気サンプルを準備します。自動追跡ソフトウェアを使用して、テスト全体を通してマウスの位置を記録します。

分析のためにアリーナ内の個別のゾーンを定義します。慣れ中、すべてのマウスは匂いゾーンとコントロールゾーンの両方で少なくとも50秒を過ごし、適切なタスクへの関与を示しています。重要なのは、UCMSに曝露されたマウスは、対照よりも同じ時間臭気ゾーンで過ごしたことです。

他のゾーンでは多少の違いが観察される可能性がありますが。対照雌マウスは、雄の尿にさらされたときにUCMSの雌よりも有意に動きましたが、慣れまたはTMT曝露中は動きませんでした。快楽反応のすべての測定値は、対照女性と UCMS 女性の間で有意差または統計的傾向を示しています。

この効果は、快楽反応と自発運動反応を組み合わせた尺度である Global Odor Exploration Index を通じても見られます。Odor Exploration Indexは、雌マウスの雄尿とTMTの両方の感情スコアと正の相関がありました。雄マウスでは、慣れ中またはテスト中の移動距離に違いは観察されませんでした。

臭気ゾーンで費やす時間は、対照と比較して、UCMS における女性の尿と TMT 探索の大幅な減少を示しています。UCMSマウスは、臭気ゾーンに入ることが有意に少なく、または入る傾向があり、女性の尿とTMTの両方に対する選好指数が大幅に低下します。匂い探索指数は、対照と比較して、UCMSマウスの雌の尿とTMTに対する負のシフト行動反応を示しており、これは動物の感情スコアと正の相関がある傾向があります。