Name: 腫瘍細胞の1型従来の樹状細胞様細胞への扱い可能な in vivo 再プログラミング (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-01T14:35:00.000+00:00
Duration: 10 min 4 s
Description: 学ぶ 腫瘍細胞のin vivo再プログラミングによる1型樹状細胞様細胞への変換法。マウスモデルを用いて免疫コールド腫瘍をホットに変換し、抗腫瘍免疫を誘導する革新的な免疫療法アプローチを探索する。

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<ol><li>Oliveira, G., Wu, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamics+and+specificities+of+T+cells+in+cancer+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">Dynamics and specificities of T cells in cancer immunotherapy.</a> Nat Rev Cancer. 23 (5), 295-316 (2023).</li>
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<li>Reardon, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Randomized+phase+3+study+evaluating+the+efficacy+and+safety+of+nivolumab+vs+bevacizumab+in+patients+with+recurrent+glioblastoma%3A+CheckMate+143%5BTitle%5D)+AND+%22Neuro+Oncol%22%5BJournal%5D)">Randomized phase 3 study evaluating the efficacy and safety of nivolumab vs bevacizumab in patients with recurrent glioblastoma: CheckMate 143.</a> Neuro Oncol. 19 (suppl_3), iii21-iii21 (2017).</li>
<li>Sharma, P., Hu-Lieskovan, S., Wargo, J. A., Ribas, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primary%2C+adaptive%2C+and+acquired+resistance+to+cancer+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Primary, adaptive, and acquired resistance to cancer immunotherapy.</a> Cell. 168 (4), 707-723 (2017).</li>
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<li>Heras-Murillo, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunotherapy+with+conventional+type-1+dendritic+cells+induces+immune+memory+and+limits+tumor+relapse%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Immunotherapy with conventional type-1 dendritic cells induces immune memory and limits tumor relapse.</a> Nat Commun. 16 (1), 3369(2025).</li>
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<li>Spranger, S., Dai, D., Horton, B., Gajewski, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor-residing+Batf3+dendritic+cells+are+required+for+effector+T+cell+trafficking+and+adoptive+T+cell+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Tumor-residing Batf3 dendritic cells are required for effector T cell trafficking and adoptive T cell therapy.</a> Cancer Cell. 31 (5), 711-723.e4 (2017).</li>
<li>Hubert, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IFN-III+is+selectively+produced+by+cDC1+and+predicts+good+clinical+outcome+in+breast+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Immunol%22%5BJournal%5D)">IFN-III is selectively produced by cDC1 and predicts good clinical outcome in breast cancer.</a> Sci Immunol. 5 (46), eaav3942(2020).</li>
<li>Mahadevan, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Type+I+conventional+dendritic+cells+facilitate+immunotherapy+in+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Type I conventional dendritic cells facilitate immunotherapy in pancreatic cancer.</a> Science. 384 (6703), eadh4567(2024).</li>
<li>Ascic, E., Pereira, C. -F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcription+factor-mediated+reprogramming+to+antigen-presenting+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Genet+Dev%22%5BJournal%5D)">Transcription factor-mediated reprogramming to antigen-presenting cells.</a> Curr Opin Genet Dev. 90, 102300(2025).</li>
<li>Silk, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cross-presentation+of+tumour+antigens+by+human+induced+pluripotent+stem+cell-derived+CD141%2B+XCR1%2B+dendritic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Cross-presentation of tumour antigens by human induced pluripotent stem cell-derived CD141+ XCR1+ dendritic cells.</a> Gene Ther. 19 (10), 1035-1040 (2012).</li>
<li>Nair, S., Archer, G. E., Tedder, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+generation+of+human+dendritic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Immunol%22%5BJournal%5D)">Isolation and generation of human dendritic cells.</a> Curr Protoc Immunol. Chapter 7, 7.32.1-7.32.23 (2012).</li>
<li>Makino, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+cDC-like+cells+from+human+induced+pluripotent+stem+cells+via+Notch+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunother+Cancer%22%5BJournal%5D)">Generation of cDC-like cells from human induced pluripotent stem cells via Notch signaling.</a> J Immunother Cancer. 10 (1), e003827(2022).</li>
<li>Balan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Large-scale+human+dendritic+cell+differentiation+revealing+Notch-dependent+lineage+bifurcation+and+heterogeneity%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Large-scale human dendritic cell differentiation revealing Notch-dependent lineage bifurcation and heterogeneity.</a> Cell Rep. 24 (7), 1902-1915.e6 (2018).</li>
<li>Kirkling, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Notch+signaling+facilitates+in+vitro+generation+of+cross-presenting+classical+dendritic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Notch signaling facilitates in vitro generation of cross-presenting classical dendritic cells.</a> Cell Rep. 23 (12), 3658-3672.e6 (2018).</li>
<li>Ascic, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+dendritic+cell+reprogramming+for+cancer+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">In vivo dendritic cell reprogramming for cancer immunotherapy.</a> Science. 386 (6719), eadn9083(2024).</li>
<li>Rosa, F. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+reprogramming+of+fibroblasts+into+antigen-presenting+dendritic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Immunol%22%5BJournal%5D)">Direct reprogramming of fibroblasts into antigen-presenting dendritic cells.</a> Sci Immunol. 3 (30), 1-16 (2018).</li>
<li>Rosa, F. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+transcriptional+profiling+informs+efficient+reprogramming+of+human+somatic+cells+to+cross-presenting+dendritic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Immunol%22%5BJournal%5D)">Single-cell transcriptional profiling informs efficient reprogramming of human somatic cells to cross-presenting dendritic cells.</a> Sci Immunol. 7 (69), eabg5539(2022).</li>
<li>Zimmermannova, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Restoring+tumor+immunogenicity+with+dendritic+cell+reprogramming%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Immunol%22%5BJournal%5D)">Restoring tumor immunogenicity with dendritic cell reprogramming.</a> Sci Immunol. 8 (85), eadd4817(2023).</li>
<li>Bouquet, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RapaCaspase-9-based+suicide+gene+applied+to+the+safety+of+IL-1RAP+CAR-T+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">RapaCaspase-9-based suicide gene applied to the safety of IL-1RAP CAR-T cells.</a> Gene Ther. 30 (9), 706-713 (2023).</li>
<li>Huangfu, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+pluripotent+stem+cells+from+primary+human+fibroblasts+with+only+Oct4+and+Sox2%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Induction of pluripotent stem cells from primary human fibroblasts with only Oct4 and Sox2.</a> Nat Biotechnol. 26 (11), 1269-1275 (2008).</li>
<li>Rojas, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Personalized+RNA+neoantigen+vaccines+stimulate+T+cells+in+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Personalized RNA neoantigen vaccines stimulate T cells in pancreatic cancer.</a> Nature. 618 (7963), 144-150 (2023).</li>
<li>Guan, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemical+reprogramming+of+human+somatic+cells+to+pluripotent+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Chemical reprogramming of human somatic cells to pluripotent stem cells.</a> Nature. 605 (7909), 325-331 (2022).</li>
<li>Ferreira, A. G., Zimmermannova, O., Kurochkin, I., Ascic, E., Åkerström, F., Pereira, C. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reprogramming+cancer+cells+to+antigen-presenting+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Bio+Protoc%22%5BJournal%5D)">Reprogramming cancer cells to antigen-presenting cells.</a> Bio Protoc. 13 (22), 1-25 (2023).</li>
<li>Cabrita, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tertiary+lymphoid+structures+improve+immunotherapy+and+survival+in+melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Tertiary lymphoid structures improve immunotherapy and survival in melanoma.</a> Nature. 577 (7791), 561-565 (2020).</li>
<li>Ng, K. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibodies+against+endogenous+retroviruses+promote+lung+cancer+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Antibodies against endogenous retroviruses promote lung cancer immunotherapy.</a> Nature. 616 (7957), 563-573 (2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0.45 & ミュー;m 低タンパク質結合フィルター、150 mLボトルトップ真空フィルター</td><td>フィッシャーサイエンティフィック</td><td>15983297</td><td></td></tr><tr><td>2-メルカプトエタノール 50 mM</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>31350010</td><td></td></tr><tr><td>抗マウスCD45モノクローナル抗体(クローン:30-F11)、ラットIgG2b、&kappa;</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>14-0451-82</td><td></td></tr><tr><td>B6.SJL-PtprcaPepcb/BoyCrl (CD45.1)</td><td>ジャクソン研究所</td><td>002014</td><td></td></tr><tr><td>BD マイクロファイン U-100 インスリンシリンジ (0.5 mL)</td><td>フィッシャーサイエンティフィック</td><td>11395751</td><td></td></tr><tr><td>C57BL/6Jマウス</td><td>ジャクソン研究所</td><td>000664</td><td></td></tr><tr><td>コラゲナーゼD</td><td>シグマ・アルドリッチ</td><td>11088882001</td><td></td></tr><tr><td>50mlコニカルチューブで使用するためのCorning Falconセルストレーナー</td><td>シグマ・アルドリッチ</td><td>CLS352340</td><td></td></tr><tr><td>コーニングカバーグラス 24 x 50 mm&nbsp;</td><td>シグマ・アルドリッチ</td><td>CLS2975245</td><td></td></tr><tr><td>DAPI(4',6-ジアミジノ-2-フェニルインドール、二塩酸塩)</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>D1306</td><td></td></tr><tr><td>DNase I</td><td>シグマ・アルドリッチ</td><td>10104159001</td><td></td></tr><tr><td>eBioscience 固定可能生存率色素 eFluor 450</td><td>インビトロゲン</td><td>65-0863-14</td><td></td></tr><tr><td>eBioscience IHC 抗原検索液 - 低 pH (10x)</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>00-4955-58</td><td></td></tr><tr><td>ウシ胎児血清 (FBS)</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>A5256701</td><td></td></tr><tr><td>Fluoromount-G 封入剤</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>00-4958-02</td><td></td></tr><tr><td>GFP抗体 [Alexa Fluor 594]</td><td>ノバスバイオロジカルズ</td><td>NB600-308AF594</td><td></td></tr><tr><td>Gibco DMEM/栄養混合物 F-12 (DMEM/F-12)</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>31331028</td><td></td></tr><tr><td>Gibco MEM 非必須アミノ酸溶液 (100x)</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>11140035</td><td></td></tr><tr><td>Gibco Opti-MEM I</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>11058021</td><td></td></tr><tr><td>ギブコ ロズウェル パーク メモリアル インスティテュート (RPMI) 1640 ミディアム</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>52400025</td><td></td></tr><tr><td>ギブコピルビン酸ナトリウム(100 mM)</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>11360070</td><td></td></tr><tr><td>Gibco トリパン ブルー ソリューション、0.4%</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>15250061</td><td></td></tr><tr><td>グルタMAXサプリメント&nbsp;</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>35050061</td><td></td></tr><tr><td>ヤギ抗ラット IgG (H+L) 交差吸着二次抗体、ポリクローナル、Alexa Fluor 488</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>A-11006</td><td></td></tr><tr><td>HEK 293T細胞</td><td>ATTCの</td><td>CRL-11268</td><td></td></tr><tr><td>臭化ヘキサジメトリン(ポリブレン)</td><td>シグマ・アルドリッチ</td><td>H9268</td><td></td></tr><tr><td>ハイクローン・ダルベッコの高グルコース改良イーグル培地(DMEM)</td><td>サイトバ</td><td>SH30243.01</td><td></td></tr><tr><td>HyClone ペニシリン ストレプトマイシン 100x 溶液 (Pen/Strep)</td><td>サイトバ</td><td>SV30010</td><td></td></tr><tr><td>HyClone リン酸緩衝生理食塩水 (PBS)</td><td>サイトバ</td><td>SH30028.02</td><td></td></tr><tr><td>ケタミノール獣医。注射液 100 mg/mL</td><td>MSDアニマルヘルススウェーデン</td><td>QN01AX03</td><td></td></tr><tr><td>ミクロトームブレード - C35</td><td>PFMメディカル</td><td>207500005</td><td></td></tr><tr><td>マウス抗CD45.2(104)、表面、APC、モノクローナル</td><td>バイオレジェンド</td><td>109814</td><td></td></tr><tr><td>マウス抗MHCII(M5/114.15.2)、表面、PE-Cy7、モノクローナル</td><td>バイオレジェンド</td><td>107630</td><td></td></tr><tr><td>ノーマルゴートセラム</td><td>アブカム</td><td>アブ7481</td><td></td></tr><tr><td>ノーマルラット血清(無菌)</td><td>アブカム</td><td>AB7488</td><td></td></tr><tr><td>オープントップ薄肉ポリプロピレンチューブ</td><td>ベックマン・コールター・ライフサイエンス</td><td>326823</td><td></td></tr><tr><td>パラホルムアルデヒド、16% w/v aq. soln.、メタノールフリー</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>043368.9メートル</td><td></td></tr><tr><td>pFUW-tetO-Batf3、モノシストロンカセットエンコードマウスBatf3</td><td>アドジーン</td><td>139837</td><td></td></tr><tr><td>pFUW-tetO-Irf8、モノシストロンカセットエンコードマウスIrf8</td><td>アドジーン</td><td>139838</td><td></td></tr><tr><td>pFUW-tetO-Pu.1、モノシストロンカセットエンコードマウスPu.1</td><td>アドジーン</td><td>139839</td><td></td></tr><tr><td>プラスミド pMD2.G</td><td>アドジーン</td><td>12259</td><td></td></tr><tr><td>プラスミドpsPAX2</td><td>アドジーン</td><td>12260</td><td></td></tr><tr><td>プラスミドSFFV-eGFP(eGFP)</td><td>社内クローン作成</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>プラスミドSFFV-mCherry(mCherry)</td><td>社内クローン作成</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>プラスミド SFFV-PIB-eGFP、&nbsp;マウスPU.1、IRF8、およびBATF3(PIB)&nbspをコードするポリシストロンカセット。</td><td>社内クローン作成</td><td>-</td><td>リプログラミングに使用されるコンストラクトとベクターは、Asgard Therapeuticsとの材料譲渡契約に基づいて入手できます</td></tr><tr><td>ポリエチレンイミン(PEI)、リニア、MW 25000、トランスフェクショングレード</td><td>ポリサイエンス</td><td>23966</td><td></td></tr><tr><td>ReadyProbes 疎水性バリアパップペン</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>R3777</td><td></td></tr><tr><td>酪酸ナトリウム</td><td>シグマ・アルドリッチ</td><td>303410</td><td></td></tr><tr><td>蔗糖</td><td>シグマ・アルドリッチ</td><td>S7903</td><td></td></tr><tr><td>SuperFrost Plus 接着顕微鏡スライド</td><td>エプレディア</td><td>J1800AMNZ</td><td></td></tr><tr><td>Tissue-Tek OCTコンパウンド</td><td>サクラファインテック</td><td>4583</td><td></td></tr><tr><td>TrypLE Express Enzyme (1x) フェノールレッド不使用</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>12604021</td><td></td></tr><tr><td>TT Cryomold Intermediate、正方形 (15 x 15 x 5 mm)</td><td>サクラファインテック</td><td>4566</td><td></td></tr><tr><td>超純度 0.5 M EDTA、pH 8.0</td><td>インビトロゲン</td><td>15575020</td><td></td></tr><tr><td>ザイソル獣医。注射液 20 mg/mL</td><td>VMファーマ</td><td>QN05CM92</td><td></td></tr><tr><td>YUMM1.7細胞</td><td>アンティネオ</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

腫瘍細胞の1型従来の樹状細胞様細胞への扱い可能な in vivo 再プログラミング

Tractable In Vivo Reprogramming of Tumor Cells to Type 1 Conventional Dendritic Cell-like Cells

扱いやすいin vivoリプログラミングプロトコルの概略図を図1に示します。まず、cDC1 指示リプログラミング因子 PU.1、IRF8、BATF3 をコードするポリシストロン レンチウイルス ベクター SFFV-PIB-IRES-eGFP (PIB-eGFP) を作製し、続いて HEK 293T パッケージング細胞株の内部リボソーム侵入部位 (IRES) と増強された緑色蛍光タンパク質 (eGFP) を作製しました。レンチウイルスを介した免疫原性を制御するために、複数のクローニング部位(MCS)とIRES-eGFPを含むが、リプログラミング因子を除外した空のSFFV-MCS-eGFP(eGFP)ベクターを作製しました。ウイルス産生後、レンチウイルス含有上清を回収し、超遠心分離により濃縮しました。形質導入(eGFP+)細胞と形質導入されていない細胞(eGFP-)の比率を1:1に達成するために必要な量を決定するためにウイルスを機能的に滴定し、形質導入後3日目に評価しました。次に、得られたウイルス量を使用して、選択したがん細胞株を-1日目に形質導入しました。24時間後、細胞を採取し、皮下に移植して腫瘍を確立しました。この戦略により、形質導入された細胞がTME内でin vivoでcDC1様細胞に再プログラムされることが保証されました。生着後の指定された時点で、in vivo リプログラミング効率を定量化するための解離腫瘍細胞のフローサイトメトリーや、TME の変化を特徴付けるための凍結保存された腫瘍切片の免疫蛍光染色など、下流の分析のために腫瘍を切除および処理しました。
まず、高いレンチウイルス力価の産生を確実にするために、トランスフェクション前にHEK 293T細胞を監視し、70〜80%のコンフルエントに達することを目標とし、24時間後に蛍光顕微鏡によるeGFP発現によるトランスフェクション効率を評価しました(図2A)。次に、トランスフェクションの48時間後と60時間後にウイルス含有培地を収集し、超遠心分離し、-80°Cでアリコートで保存しました(図2B)。次に、YUMM1.7黒色腫細胞において、eGFP+ とeGFP- 細胞の比率を1:1にするために必要な最適なウイルス量を決定しました。6ウェルプレートにウェルあたり10個の5 YUMM1.7細胞を播種し、レンチウイルスの体積を増やして細胞を形質導入し、24時間後にウイルス含有上清を新鮮なDMEM / F12完全培地に置き換えました(図2C)。3日目に、蛍光顕微鏡でeGFP発現を評価し、フローサイトメトリーによるeGFP + 細胞の正確なパーセンテージの定量化に進みました(図2C)。eGFP+ とeGFP- 細胞の比率を定量化するために、生きた単一細胞をゲートして、死んだ細胞とダブレットを除外しました(図2D)。産生されたレンチウイルスバッチの最適量は、PIB-eGFPと対照eGFPウイルスの両方について、105 YUMM1.7細胞あたり2 μLとして決定され、それぞれ50.0 ± 0.3%および63.0 ± 0.9%のeGFP+ 細胞が得られました(図2E)。
次に、in vivoリプログラミング効率を評価するために、蛍光標識(mCherry+)がん細胞株(YUMM1.7-mCherry)を作製しました。これにより、フローサイトメトリー分析で生mCherry+細胞をゲーティングすることで、がん細胞と間質細胞または免疫細胞を区別できるようになりました(図3A、B)。次に、YUMM1.7-mCherry細胞を105細胞あたり2 μLのPIB-eGFPまたは対照eGFPウイルスで形質導入し、1:1のeGFP+とeGFP-の比率を達成しました。CD45.1マウスに腫瘍あたり1.6×106細胞を皮下移植し、比較のために細胞のアリコートを保持してin vitroで培養しました。フローサイトメトリー、ゲーティングライブmCherry+ eGFP+およびCD45.1-細胞によってリプログラミング効率を評価し、eGFPまたはmCherryを飲み込んだ宿主免疫細胞を除外しました(図3B)。1日目から9日目にかけて、CD45.2および/またはMHC-II発現の段階的な獲得を観察し、部分的に再プログラムされたcDC1様細胞(CD45.2 + MHC-II-またはCD45.2-MHC-II+)および完全に再プログラムされたcDC1様細胞(CD45 + MHC-II+)をマークしました(図3C)。マウスがん細胞のin vivoのリプログラミングは、in vitro条件と比較して9日目にcDC1様細胞の割合が高いことを検証しました(9.54 ± 1.54% CD45+ MHC-II+ in vivo vs. 4.72 ± 1.1% CD45+ MHC-II+ in vitro<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68739/68739fig1.jpg"> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68739/68739fig1large.jpg" target="_blank"></a><img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68739/68739fig2.jpg"> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68739/68739fig2large.jpg" target="_blank"></a><img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68739/68739fig3.jpg"> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68739/68739fig3large.jpg" target="_blank"></a><img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68739/68739fig4.jpg"> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68739/68739fig4large.jpg" target="_blank"></a>

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