Name: インビトロ管腔内ゲル注入: ヒト抵抗動脈の顕微鏡分析のための高度なアプローチ (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-19T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 20 s
Description: 学ぶ 組織安定化ゲル注入法によるヒト抵抗動脈の構造・分子保存技術。免疫組織化学とin situハイブリダイゼーションで血管マーカーとmRNAの保存性を確認し、心血管疾患研究と診断開発に貢献する。

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<ol><li>Intengan, H. D., Schiffrin, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+remodeling+in+hypertension%3A+Roles+of+apoptosis%2C+inflammation%2C+and+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Vascular remodeling in hypertension: Roles of apoptosis, inflammation, and fibrosis.</a> Hypertension. 38 (3 Pt 2), 581-587 (2001).</li>
<li>Mulvany, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small+artery+remodelling+in+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Basic+Clin+Pharmacol+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Small artery remodelling in hypertension.</a> Basic Clin Pharmacol Toxicol. 110 (1), 49-55 (2012).</li>
<li>Petrie, J. R., Guzik, T. J., Touyz, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diabetes%2C+hypertension%2C+and+cardiovascular+disease%3A+Clinical+insights+and+vascular+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Can+J+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Diabetes, hypertension, and cardiovascular disease: Clinical insights and vascular mechanisms.</a> Can J Cardiol. 34 (5), 575-584 (2018).</li>
<li>Schiffrin, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+remodeling+in+hypertension%3A+Mechanisms+and+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Vascular remodeling in hypertension: Mechanisms and treatment.</a> Hypertension. 59 (2), 367-374 (2012).</li>
<li>Zieman, S. J., Melenovsky, V., Kass, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms%2C+pathophysiology%2C+and+therapy+of+arterial+stiffness%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Mechanisms, pathophysiology, and therapy of arterial stiffness.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 25 (5), 932-943 (2005).</li>
<li>Bell, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microstructure+and+mechanics+of+human+resistance+arteries%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Microstructure and mechanics of human resistance arteries.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 311 (6), H1560-H1568 (2016).</li>
<li>Intengan, H. D., Schiffrin, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+and+mechanical+properties+of+resistance+arteries+in+hypertension%3A+Role+of+adhesion+molecules+and+extracellular+matrix+determinants%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Structure and mechanical properties of resistance arteries in hypertension: Role of adhesion molecules and extracellular matrix determinants.</a> Hypertension. 36 (3), 312-318 (2000).</li>
<li>Rajendran, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+vascular+endothelium+and+human+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Biol+Sci%22%5BJournal%5D)">The vascular endothelium and human diseases.</a> Int J Biol Sci. 9 (10), 1057-1069 (2013).</li>
<li>Chistiakov, D. A., Orekhov, A. N., Bobryshev, Y. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+barrier+and+its+abnormalities+in+cardiovascular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Physiol%22%5BJournal%5D)">Endothelial barrier and its abnormalities in cardiovascular disease.</a> Front Physiol. 6, 365(2015).</li>
<li>Gurina, T. S., Simms, L. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGurina%2C+TS+%22Histology%2C+Staining%22">Histology, Staining</a>. , Statpearls Publishing. Treasure Island, FL. (2025).</li>
<li>Hillman, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Limitations+of+clinical+and+biological+histology%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Hypotheses%22%5BJournal%5D)">Limitations of clinical and biological histology.</a> Med Hypotheses. 54 (4), 553-564 (2000).</li>
<li>Taylor, A. M., Bordoni, B. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aTaylor%2C+AM+%22Histology%2C+Blood+Vascular+System%22">Histology, Blood Vascular System</a>. , Statpearls Publishing. Treasure Island, FL. (2025).</li>
<li>Nolte, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+correlation+of+2D+hard-tissue+histology+with+3D+microCT+scans+through+3C+printed+phantoms%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Spatial correlation of 2D hard-tissue histology with 3D microCT scans through 3C printed phantoms.</a> Sci Rep. 13 (1), 18479(2023).</li>
<li>Taqi, S. A., Sami, S. A., Sami, L. B., Zaki, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+artifacts+in+histopathology%5BTitle%5D)+AND+%22J+Oral+Maxillofac+Pathol%22%5BJournal%5D)">A review of artifacts in histopathology.</a> J Oral Maxillofac Pathol. 22 (2), 279(2018).</li>
<li>Torii, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histopathologic+characterization+of+peripheral+arteries+in+subjects+with+abundant+risk+factors%3A+Correlating+imaging+with+pathology%5BTitle%5D)+AND+%22JACC+Cardiovasc+Imaging%22%5BJournal%5D)">Histopathologic characterization of peripheral arteries in subjects with abundant risk factors: Correlating imaging with pathology.</a> JACC Cardiovasc Imaging. 12 (8 Pt 1), 1501-1513 (2019).</li>
<li>Brooks, S. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sickle+trait+and+alpha+thalassemia+increase+nos-dependent+vasodilation+of+human+arteries+through+disruption+of+endothelial+hemoglobin-enos+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Sickle trait and alpha thalassemia increase nos-dependent vasodilation of human arteries through disruption of endothelial hemoglobin-enos interactions.</a> Circulation. 151 (1), 8-30 (2025).</li>
<li>Chatzizisis, Y. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+endothelial+shear+stress+in+the+natural+history+of+coronary+atherosclerosis+and+vascular+remodeling%3A+Molecular%2C+cellular%2C+and+vascular+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Role of endothelial shear stress in the natural history of coronary atherosclerosis and vascular remodeling: Molecular, cellular, and vascular behavior.</a> J Am Coll Cardiol. 49 (25), 2379-2393 (2007).</li>
<li>Li, S., Liu, S., Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+of+3D+printing+in+vascularized+organ+construction%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Bioprint%22%5BJournal%5D)">Advances of 3D printing in vascularized organ construction.</a> Int J Bioprint. 8 (3), 588(2022).</li>
<li>Rengier, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3D+printing+based+on+imaging+data%3A+Review+of+medical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Comput+Assist+Radiol+Surg%22%5BJournal%5D)">3D printing based on imaging data: Review of medical applications.</a> Int J Comput Assist Radiol Surg. 5 (4), 335-341 (2010).</li>
<li>Solanki, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+importance+of+three+dimensional+coronary+artery+reconstruction+accuracy+when+computing+virtual+fractional+flow+reserve+from+invasive+angiography%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">The importance of three dimensional coronary artery reconstruction accuracy when computing virtual fractional flow reserve from invasive angiography.</a> Sci Rep. 11 (1), 19694(2021).</li>
<li>Tucker, W. D., Arora, Y., Mahajan, K. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aTucker%2C+WD+%22Anatomy%2C+Blood+Vessels%22">Anatomy, Blood Vessels</a>. , Statpearls Publishing. Treasure Island, FL. (2025).</li>
<li>Choi, J., Lee, E. J., Jang, W. B., Kwon, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+biocompatible+3D-printed+artificial+blood+vessels+through+multidimensional+approaches%5BTitle%5D)+AND+%22J+Funct+Biomater%22%5BJournal%5D)">Development of biocompatible 3D-printed artificial blood vessels through multidimensional approaches.</a> J Funct Biomater. 14 (10), 497(2023).</li>
<li>De Graaf, M. N. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiplexed+fluidic+circuit+board+for+controlled+perfusion+of+3D+blood+vessels-on-a-chip%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Chip%22%5BJournal%5D)">Multiplexed fluidic circuit board for controlled perfusion of 3D blood vessels-on-a-chip.</a> Lab Chip. 23 (1), 168-181 (2022).</li>
<li>Lapierre-Landry, M., Liu, Y., Bayat, M., Wilson, D. L., Jenkins, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Digital+labeling+for+3D+histology%3A+Segmenting+blood+vessels+without+a+vascular+contrast+agent+using+deep+learning%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Opt+Express%22%5BJournal%5D)">Digital labeling for 3D histology: Segmenting blood vessels without a vascular contrast agent using deep learning.</a> Biomed Opt Express. 14 (6), 2416-2431 (2023).</li>
<li>Abdul Sisak, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+near-infrared+organic+fluorescent+probe+for+broad+applications+for+blood+vessel+imaging+by+high-throughput+screening+via+3D-blood+vessel+models%5BTitle%5D)+AND+%22Small+Methods%22%5BJournal%5D)">A near-infrared organic fluorescent probe for broad applications for blood vessel imaging by high-throughput screening via 3D-blood vessel models.</a> Small Methods. 5 (8), e2100338(2021).</li>
<li>Yu, T., Yang, Q., Peng, B., Gu, Z., Zhu, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascularized+organoid-on-a-chip%3A+Design%2C+imaging%2C+and+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Angiogenesis%22%5BJournal%5D)">Vascularized organoid-on-a-chip: Design, imaging, and analysis.</a> Angiogenesis. 27 (2), 147-172 (2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1%フォーカス酸アルコール</td><td>統計研究所</td><td>&nbsp;SL89-1</td><td></td></tr><tr><td>10% NBS</td><td>ライカ・バイオシステムズ</td><td>3800598</td><td></td></tr><tr><td>4K顕微鏡HDMIカメラ</td><td>ハイテック・インストゥルメンツ社</td><td>HT-XP4K8MA</td><td></td></tr><tr><td>抗体希釈剤 - 背景還元法</td><td>ダコ</td><td>S3022</td><td></td></tr><tr><td>自動組織処理機など;</td><td>ライカ・バイオシステムズ</td><td>ヒストコア PEGASUS/Cat# 14048858005</td><td></td></tr><tr><td>ボンドデワックス溶液</td><td>ライカ・バイオシステムズ</td><td>AR9222</td><td></td></tr><tr><td>結合エピトープ回収溶液1</td><td>ライカ・バイオシステムズ</td><td>AR9961</td><td></td></tr><tr><td>結合エピトープ回収解2</td><td>ライカ・バイオシステムズ</td><td>AR9640</td><td></td></tr><tr><td>結合ポリマー精製検出</td><td>ライカ・バイオシステムズ</td><td>DS9800</td><td></td></tr><tr><td>ボンドポリマー精錬赤検出</td><td>ライカ・バイオシステムズ</td><td>DS9390</td><td></td></tr><tr><td>ボンドウォッシュ溶液(10倍)</td><td>ライカ・バイオシステムズ</td><td>AR9590</td><td></td></tr><tr><td>カニューレパック(ガラス)、80&ndash;100 & mu;m</td><td>DMT</td><td>製品コード:300407</td><td></td></tr><tr><td>CD31</td><td>アブカム</td><td>AB28364</td><td></td></tr><tr><td>解剖皿、大型(パイレックスガラス)、93mm</td><td>リビングシステム計測</td><td>SKU:DD-90</td><td></td></tr><tr><td>解剖皿、小型</td><td>リビングシステム計測</td><td>SKU:DD-50</td><td></td></tr><tr><td>解剖顕微鏡</td><td>ハイテック・インストゥルメンツ社</td><td>ツァイス・ステレオ・ディスカバリー.V8&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>デュモン #5 鉗子</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>品番11295-10</td><td></td></tr><tr><td>デュモン・#5SF・ピンセット</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>品番11252-00</td><td></td></tr><tr><td>エコマウント</td><td>バイオケア・メディカル</td><td>EM897L</td><td></td></tr><tr><td>エオシン</td><td>IHCワールド</td><td>IW-3100B</td><td></td></tr><tr><td>ヘマトキシリン</td><td>バイオケア・メディカル</td><td>キャテム・ミム</td><td></td></tr><tr><td>カメラを動かす</td><td>オリュンプス</td><td>DP28</td><td></td></tr><tr><td>イメージング顕微鏡</td><td>オリュンプス</td><td>BX51</td><td></td></tr><tr><td>クレブス・ヘンゼライト緩衝剤(2 mM塩化カルシウム使用)</td><td>ボストン・バイオプロダクツ社</td><td>SKU:C-10625N-200mL</td><td></td></tr><tr><td>クレブス・ヘンセライト緩衝法(カルシウムなし)</td><td>ボストン・バイオプロダクツ社</td><td>SKU:C-9906W-200mL</td><td></td></tr><tr><td>マウンティングメディア</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>4111</td><td></td></tr><tr><td>マイオグラフチャンバーとユニット</td><td>DMT</td><td>202/204CM</td><td></td></tr><tr><td>PBS(リン酸緩衝生理食塩水)</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>10010023</td><td></td></tr><tr><td>PPIB</td><td>&nbsp;ACDBio</td><td>313908</td><td></td></tr><tr><td>RNAscope 2.5 LS試薬キット-RED</td><td>ACDBio</td><td>322150</td><td></td></tr><tr><td>ステイナー</td><td>ライカ</td><td>ライカボンドRX自動システム</td><td></td></tr><tr><td>ステンレス鋼の解剖ピン</td><td>リビングシステム計測</td><td>SKU:ピン-0.1MM |ピン 0.2MM |ピン#3 |ピン-VP-1</td><td></td></tr><tr><td>サージパス・パラプラスト</td><td>ライカ・バイオシステムズ</td><td>39601006</td><td></td></tr><tr><td>ティッシュガードジェル</td><td>統計研究所</td><td>&nbsp;ティッシュガード/SKU:TG12</td><td></td></tr><tr><td>ヴァンナズスプリングシザーズ - 2mmカッティングエッジ</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>品番15000-03</td><td></td></tr><tr><td>Vannasスプリングシザー - 2.5mmカッティングエッジ</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>品番15000-08</td><td></td></tr><tr><td>Vannasスプリングシザーズ - 3mmカッティングエッジ</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>品番15000-00</td><td></td></tr><tr><td>&alpha;-SMA</td><td>アブカム</td><td>AB5694</td><td></td></tr></tbody></table>

インビトロ管腔内ゲル注入: ヒト抵抗動脈の顕微鏡分析のための高度なアプローチ

In Vitro Intraluminal Gel Infusion: An Advanced Approach for Microscopic Analysis of Human Resistance Arteries

ヒト大網組織は、臨床的に必要な腹部手術を受ける患者から採取されました。小さな抵抗動脈(直径100〜300μm)を解剖顕微鏡下で周囲の脂肪および結合組織から細心の注意を払って分離しました(図1A-C)。単離された動脈を洗浄し、カニューレ挿入に成功し、加圧のために培養ミオグラフチャンバー内のガラスカニューレに取り付けました(図1D-F)。動脈は 60-80 mmHg に加圧されても生理学的寸法と緊張を維持し、カニューレ挿入が成功したことを示しています。60〜80 mmHgの一定圧力で10%中性緩衝ホルマリンで動脈を固定すると、動脈壁と細胞成分の構造的完全性が維持されました。動脈は自然な構造を保持しており、内皮層と平滑筋層が明確に定義されています。生存率試験実験では、60 mM KClにさらされると動脈が収縮し、洗浄後に直径がベースラインに戻ることが示されました(<strong class=...

Resistance arteries, which include small arteries and arterioles, play essential roles in regulating blood pressure and tissue perfusion. Dysfunction in ...

in-vitro-intraluminal-gel-infusion-an-advanced-approach-for

Research

JoVE Journal

Biology

生物学

ザ ex vivoで</em血管反応性の調査のために>隔離された骨格微小血管の準備

我々は、ネイティブ、そのまま微小血管内皮にカルシウムシグナル伝達を可視化して操作するための準備を提示する。内皮チューブは新鮮に、骨格筋、隣接セル内との間で、生体内の形態および動的なシグナリングに保持供給マウス抵抗動脈から単離した。内皮チューブは、他の組織および器官の微小血管から調製することができる。...

マウス抵抗動脈から毛細血管内皮の管の隔離

低酸素肺血管収縮(HPV)は、肺胞低酸素肺灌流で換気に一致する重要な生理学的現象である。HPVに寄与する主要な血管セグメントは、口腔内動脈である。ここでは、直径20~100μmのマウス肺血管のHPVの分析プロトコルについて説明します。...

マウス精密切り出肺スライスを用いた低酸素肺血管収縮のビデオモルフォメトリクス解析

私たちは、マトリックスゲルプラグ血管新生アッセイの変動を用いて、マウスにおけるヒト内皮 - 周皮細胞の相互作用を研究するためのプロトコルを提示します。...

マウスにおけるマトリックスゲルプラグアッセイを用いたヒト内皮-周皮細胞の相互作用のin vivo研究で

ここで体内のクローン解析運命マッピング、大動脈植と単離平滑筋細胞の詳細を使用して萌芽期および周産期のマウス大動脈を勉強するためのプロトコル。これらの多様なアプローチは、通常開発の萌芽期および周産期の大動脈の疾患の病態形成の調査を促進します。...

体内と組織や細胞植アプローチを使用して形態形成と胚および周産期の大動脈の病因を研究するには

本稿では、ラット脳の抵抗血管での血管の機能を評価するためのビデオ顕微鏡検査のプロトコル体外について説明します。原稿もレーザー...

分離抵抗性ラットの動脈のビデオ顕微鏡を用いた血管制御機構の評価

単球は、末梢動脈疾患のコンテキストでの arteriogenesis...

単球のホーミングと末梢動脈疾患のマウスモデルにおける腫瘍関連血管新生の生体顕微鏡

同時に機械的テストを記述し、孤立の動脈壁の 3 D イメージング生きる人間の抵抗動脈とエラスチンとコラーゲンの組織およびボリュームの空間密度の定量化のためのフィジーと Ilastik...

ラベル無料蛍光顕微鏡によるライブ、人間の抵抗血管のコラーゲンとエラスチンの圧力依存性アーキテクチャを評価します。

ここでは、中隔動脈がカニュール化および加圧されるように、動脈灌流圧および流れを維持する動脈灌流圧および流れのex...

マウス心臓における毛細血管、細動脈、および周囲細胞の動的測定とイメージング

脳実質細動脈からの無傷のマウス脳内皮「チューブ」の集中的な調製は、脳血流調節を研究するために例示される。さらに、我々は、細胞内[Ca2+]および膜電位の変化を含む重要な細胞シグナル伝達経路の蛍光イメージングおよび電気生理学的測定のためのこの内皮研究モデルの実験的強みを実証する。...

マウス脳実質の動脈内皮の単離と機能解析

In vivo Cine Invascular 超音波画像は、さまざまな圧力負荷条件に対応する冠動脈断面の動きを示しています。有限要素モデルに基づいて、反復スキームを使用して、計算モデルと医用画像からの冠状動脈の動きを一致させることにより、 in vivo で冠状動脈の患者固有の機械的特性を決定しました。...

ヒト冠動脈のin vivo機械的特性を定量化するための血管内超音波画像ベース有限要素モデリングアプローチ 

学ぶ 組織安定化ゲル注入法によるヒト抵抗動脈の構造・分子保存技術。免疫組織化学とin situハイブリダイゼーションで血管マーカーとmRNAの保存性を確認し、心血管疾患研究と診断開発に貢献する。

インビトロ管腔内ゲル注入: ヒト抵抗動脈の顕微鏡分析のための高度なアプローチ

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