Three-dimensional Quantification of Intestinal Mucus Using Whole-mount Tissue Imaging

Wei-Lin Chen; Zi-Qi Gu; Zi-Yun Qiu; Yu-Huan Tsai

doi:10.3791/68789

JoVE Journal
Immunology and Infection

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JoVE Journal Immunology and Infection

Three-dimensional Quantification of Intestinal Mucus Using Whole-mount Tissue Imaging

ホールマウント組織イメージングを用いた腸粘液の三次元定量化

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05:10 min

September 12, 2025

DOI: 10.3791/68789-v

Wei-Lin Chen^1,2,3, Zi-Qi Gu^1,2, Zi-Yun Qiu^1,2, Yu-Huan Tsai^1,4,5,6

¹Laboratory of Host-Microbe Interactions and Cell Dynamics, Department of Medical Biotechnology and Laboratory Science, College of Medicine,Chang Gung University, ²Institute of Microbiology and Immunology,National Yang Ming Chiao Tung University, ³Program in Molecular Medicine,National Yang Ming Chiao Tung University and Academia Sinica, ⁴Graduate Institute of Biomedical Sciences, College of Medicine,Chang Gung University, ⁵Center for Molecular and Clinical Immunology,Chang Gung University, ⁶Division of General Surgery, Department of Surgery,Chang Gung Memorial Hospital

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この研究では、全マウント腸組織と多光子顕微鏡を使用して分泌された粘液を定量化し、塩化カルバモイルコリンなどの刺激に応答した粘液動態の正確な体積分析と視覚化を可能にする 3D イメージング法を提示します。

私たちの研究は、粘膜組織への微生物注入のメカニズムに焦点を当てており、粘液がこれらの相互作用を調節する上で重要な役割を果たすことを強調しています。従来の2次元粘液の定量化では、空間的・体積的な詳細が見落とされています。当プロトコルは、既存の手法で見落とされていた分子介入による構造的および分布の変化を明らかにし、正確な3D解析を可能にします。

このプロトコルはホルモンイメージングと3D定量化を組み合わせ、従来の2D評価を超えた多様な実験条件や分子介入に適用可能な、腸粘液構造の強固で再現性の高い測定を提供します。まず、6〜8週間の麻酔をかけたマウスを温熱パッドの上に置き、体温を保ちます。マウスの皮膚表面をアルコールで消毒し、左下腹部に切開をして盲腸を露出させつつ麻酔を維持させます。

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