Name: ナチュラルキラー細胞活性化の迅速なラベルフリー分析のためのフィールド展開可能なレンズフリーイメージングプラットフォーム (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-08T14:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 34 s
Description: 学ぶレンズフリーイメージングを用いたナチュラルキラー細胞のラベルフリー迅速解析法。30秒で単一細胞レベルの活性化を定量化し、免疫機能モニタリングを効率化する革新的プラットフォームです。

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<table><tbody><tr><td>1.7 mLマイクロ遠心チューブ</td><td>アクシゲン</td><td>MCT-175-C</td><td>滅菌、DNase/RNaseフリー</td></tr><tr><td>アッセイスライド</td><td>メタイミュネテック</td><td>AS050-G</td><td>Cellytics システム専用スライド 50 枚のスライドを箱に入り</td></tr><tr><td>ソフトウェア付きCellyticsシステム</td><td>メタイミュネテック</td><td>CS001</td><td>レンズ不要のシャドウイメージングプラットフォーム</td></tr><tr><td>遠心分離機(スイングバケットローター)</td><td>ラボジーン</td><td>1580R型</td><td>300&ndash;500回G範囲</td></tr><tr><td>CMOSイメージセンサー</td><td>Cellytics デバイスに付属</td><td>統合</td><td>回折イメージングに使用</td></tr><tr><td>サイトスピン遠心分離機</td><td>ナスココリア</td><td>TXT3 サイト遠心分離機</td><td>サイトスピン染色用</td></tr><tr><td>デジタル加熱ブロック(37°C;C)</td><td>ダイハン・サイエンティフィック</td><td>DHです。WHB00349</td><td>細胞インキュベーション用</td></tr><tr><td>ELISAキット(IFN-&ガンマ;)</td><td>R&Dシステム</td><td>DIF50C</td><td>ヒトIFN-&ガンマ;ELISAキット</td></tr><tr><td>グアバeasyCyteフローサイトメーター</td><td>ミリポール</td><td>0500-5005</td><td>CD107a発現解析用</td></tr><tr><td>ヘマ3ステータスパック</td><td>サーモフィッシャー</td><td>122-911</td><td>サイトスピン染色用</td></tr><tr><td>IL-12(組換えヒト)</td><td>R&Dシステム</td><td></td><td>ASCの構成要素</td></tr><tr><td>IL-2(組換えヒト)</td><td>ペプロテック</td><td>200-02</td><td>ASCの構成要素</td></tr><tr><td>磁気分離ラック</td><td>メタイミュネテック</td><td>M13R8</td><td>ビーズ分離用</td></tr><tr><td>顕微鏡スライド</td><td>マリエンフェルト</td><td>1000612</td><td>サイトスピン調製用</td></tr><tr><td>NKアクティベーションキット</td><td>メタイミュネテック</td><td>MIT2301V、MIT2301A</td><td>NK細胞活性化用</td></tr><tr><td>NK Sep キット</td><td>メタイミュネテック</td><td>MIT2301-500</td><td>NK細胞単離用</td></tr><tr><td>PEマウス抗ヒトCD107a、100テスト</td><td>BDバイオサイエンス</td><td>555801</td><td>CD107a発現解析用</td></tr><tr><td>ピンホールアパーチャ</td><td>Cellytics デバイスに付属</td><td>統合</td><td>LSIT照明経路で使用</td></tr><tr><td>ピペット (2&ndash;20 & マイクロ;L、20&ndash;200 & マイクロ;L)</td><td>アクシゲン</td><td>T-200-Y</td><td>調節可能な音量</td></tr><tr><td>シャドウキャリブレーションスライド</td><td>メタイミュネテック</td><td>AS050-G</td><td>デバイスキャリブレーション用 1つのアッセイスライドボックスに1つのキャリブレーションスライド</td></tr><tr><td>ボルテックスミキサー</td><td>メルク&nbsp;</td><td>SI-0246A</td><td>再サスペンション用</td></tr></tbody></table>

ナチュラルキラー細胞活性化の迅速なラベルフリー分析のためのフィールド展開可能なレンズフリーイメージングプラットフォーム

Field-Deployable Lens-Free Imaging Platform for Rapid Label-Free Analysis of Natural Killer Cell Activation

このプロトコルに従って、LSITプラットフォームは、細胞の形態学的変化に基づいてNK細胞活性化の定量的でラベルフリーの評価を可能にします。 図2A は、ASCの有無にかかわらず、2時間インキュベーション後の健康なドナーからの初代NK細胞のHema-3染色サイトスピン調製物を示しています。ASCによる活性化は、ビヒクル(刺激されていない)コントロールと比較して、主に細胞の拡大と内部の複雑さまたは粒度の増加など、顕著な変化をもたらします。これらの変化は影回折パターンの形でキャプチャされ、統合ソフトウェアを使用してLSITプラットフォームによって分析され、各セルの主要な形態計測パラメータが抽出されます(図2B)。このプロトコルは、異なるNK細胞の活性化状態を効果的に区別し、全体的な自然免疫機能の評価を可能にします。
シャドウパラメータの再現性を評価するために、ビヒクルとASC刺激の両方の条件下で900を超える個々のNK細胞を分析しました。ASC活性化NK細胞の影画像は、...

Natural killer (NK) cells are important effectors of innate immunity that eliminate virus-infected and malignant cells. Monitoring NK cell activity is ...

field-deployable-lens-free-imaging-platform-for-rapid-label-free

Research

JoVE Journal

Bioengineering

バイオエンジニアリング（生体工学）

細胞のLensfreeオンチップのイメージングと特性が示されている。このオンチップ細胞イメージングのアプローチは、リソースの乏しい環境のために特に適し、医療診断およびハイスループット細胞生物学のアプリケーション向けのコンパクトで費用効果の高いツールを提供します。...

細胞のLenslessオンチップイメージングは​​、ハイスループット細胞生物学および医学診断のための新しいツールを提供します。

ここで、我々は、マウスの足蹠にホーミング白血球を研究する非侵襲的二光子（2P）顕微鏡のアプローチを説明します。私たちは、組織イメージングの準備の技術的側面を議論し、実行してデータ収集するための初期設定から典型的な実験を通してリーダーを歩く。...

白血球ホーミングと移行の非侵襲的イメージング in vivoで</em

このビデオでは、生きたT細胞と抗原提示細胞との間の相互作用を可視化するための格子ライトシート顕微鏡法について説明します。この方法では、相互作用する細胞ペアに極薄の格子ライトシートを集束させて一連の2次元画像を取得し、それらを組み合わせて高解像度の4次元画像を取得し、細胞間相互作用の時空間ダイナミクスを明らかにします。...

生細胞における受容体-リガンド相互作用を可視化するための格子ライトシート顕微鏡法

このビデオは、支持脂質二重膜(SLB)上のナチュラルキラー(NK)細胞における免疫学的シナプスの形成を視覚化する技術を示しています。SLBは、最初に蛍光色素でタグ付けされたNK細胞活性化受容体リガンドで標識され、続いてNK細胞とインキュベートされます。続いて、重合アクチンおよびパーフォリン陽性溶解顆粒について細胞を染色します。このアプローチにより、STED(Stimulated Emission...

担持脂質二重膜上におけるNK細胞免疫学的シナプス形成の超解像イメージング

ここでは、2色STEDナノスによってガラス上で要約NK細胞の細胞傷害性免疫シナプスを撮像するためのプロトコルを示す。この方法を用いて、我々は、サブ100nmシナプスタンパク質の分解能と細胞骨格を得た。...

デュアルカラータイム·ゲーティッド誘導放出枯渇（STED）ナノスによる免疫シナプスの可視化

ここでは、免疫学的シナプスを形成するガラス支持脂質二重膜技術と、誘導放出枯渇(STED)顕微鏡の超解像イメージング技術の組み合わせについて説明します。このプロトコルの目標は、これら 2...

グラスサポート平面脂質二重層上のナチュラルキラー細胞免疫シナプスの超解像イメージング

細胞間の通信は、細胞内外の様々な生理活性を制御するために重要です。本稿では、単一細胞分泌物の時空間的な性質を測定するためのプロトコルについて説明します。これを達成するためには、学際的なアプローチは、生細胞イメージングとラベルフリーnanoplasmonic検知を統合が使用されます。...

単一細胞分泌物の時空間イメージング用ラベルフリー技術

レンズ無料ビデオ顕微鏡は、インキュベーターの中に直接培養細胞を監視することが出来ます。ここで集録し、解析を培養 HeLa 細胞の 2.7 日間の長い取得するために使用完全なプロトコルについて述べる、2.2 x 10 のデータセットにつながる個々 の細胞の形態や 10584...

レンズ無料のビデオ顕微鏡、付着性細胞培養の定量的解析

定量位相イメージングと機械学習アルゴリズムを用いたリンパ球サブタイプの無料のラベル識別のためのプロトコルについて述べる。リンパ球の 3 D の屈折断層の測定は、細胞の種類を識別するための機械学習アルゴリズムで分析します個々 のセル、3 D...

ラベル無料三次元定量的な位相画像を用いたリンパ球サブタイプの同定と機械学習

このプロトコルの目的は、ラティス光シート顕微鏡を使用して、生細胞の表面受容体ダイナミクスを4次元的に可視化する方法を示すことを目的としています。ここで、CD4+一次T細胞上のT細胞受容体が示されている。...

格子光シート顕微鏡による表面T細胞受容体ダイナミクスの可視化4次元的な研究

学ぶレンズフリーイメージングを用いたナチュラルキラー細胞のラベルフリー迅速解析法。30秒で単一細胞レベルの活性化を定量化し、免疫機能モニタリングを効率化する革新的プラットフォームです。

ナチュラルキラー細胞活性化の迅速なラベルフリー分析のためのフィールド展開可能なレンズフリーイメージングプラットフォーム

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