Name: 高密度リポタンパク質特異的リン脂質流出アッセイ (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-09-30T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 8 s
Description: 学ぶHDL機能性アッセイで心血管疾患リスクを評価する方法。蛍光リン脂質を用いた簡便な測定法により、冠動脈疾患の予測と研究・臨床応用が可能となる。

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<ol><li>Grundy, S. M., et al. 2018 AHA/ACC/AACVPR/AAPA/ABC/ACPM/ADA/AGS/APHA/ASPC/NLA/PCNA guideline on the management of blood cholesterol: A report of the american college of cardiology/american heart association task force on clinical practice guidelines. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGrundy%2C+SM+%22Circulation%22">Circulation</a>. 139 (25), e1082-e1143 (2019).</li>
<li>Zhong, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+coronary+heart+disease+in+Japanese-American+men+with+mutation+in+the+cholesteryl+ester+transfer+protein+gene+despite+increased+HDL+levels%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Increased coronary heart disease in Japanese-American men with mutation in the cholesteryl ester transfer protein gene despite increased HDL levels.</a> J Clin Invest. 97 (12), 2917-2923 (1996).</li>
<li>Madsen, C. M., Varbo, A., Nordestgaard, B. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extreme+high+high-density+lipoprotein+cholesterol+is+paradoxically+associated+with+high+mortality+in+men+and+women%3A+Two+prospective+cohort+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Heart+J%22%5BJournal%5D)">Extreme high high-density lipoprotein cholesterol is paradoxically associated with high mortality in men and women: Two prospective cohort studies.</a> Eur Heart J. 38 (32), 2478-2486 (2017).</li>
<li>Ko, D. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-density+lipoprotein+cholesterol+and+cause-specific+mortality+in+individuals+without+previous+cardiovascular+conditions%3A+The+CANHEART+study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">High-density lipoprotein cholesterol and cause-specific mortality in individuals without previous cardiovascular conditions: The CANHEART study.</a> J Am Coll Cardiol. 68 (19), 2073-2083 (2016).</li>
<li>Liu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cholesterol+efflux+capacity+is+an+independent+predictor+of+all-cause+and+cardiovascular+mortality+in+patients+with+coronary+artery+disease%3A+A+prospective+cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">Cholesterol efflux capacity is an independent predictor of all-cause and cardiovascular mortality in patients with coronary artery disease: A prospective cohort study.</a> Atherosclerosis. 249, 116-124 (2016).</li>
<li>Rosenson, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dysfunctional+HDL+and+atherosclerotic+cardiovascular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Dysfunctional HDL and atherosclerotic cardiovascular disease.</a> Nat Rev Cardiol. 13 (1), 48-60 (2016).</li>
<li>Khera, A. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cholesterol+efflux+capacity%2C+high-density+lipoprotein+function%2C+and+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Cholesterol efflux capacity, high-density lipoprotein function, and atherosclerosis.</a> N Engl J Med. 364 (2), 127-135 (2011).</li>
<li>Rohatgi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HDL+cholesterol+efflux+capacity+and+incident+cardiovascular+events%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">HDL cholesterol efflux capacity and incident cardiovascular events.</a> N Engl J Med. 371 (25), 2383-2393 (2014).</li>
<li>Sankaranarayanan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+sensitive+assay+for+ABCA1-mediated+cholesterol+efflux+using+bodipy-cholesterol%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Lipid+Research%22%5BJournal%5D)">A sensitive assay for ABCA1-mediated cholesterol efflux using bodipy-cholesterol.</a> Journal of Lipid Research. 52 (12), 2332-2340 (2011).</li>
<li>Schachtl-Riess, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lysis+reagents%2C+cell+numbers%2C+and+calculation+method+influence+high-throughput+measurement+of+HDL-mediated+cholesterol+efflux+capacity%5BTitle%5D)+AND+%22J+Lipid+Res%22%5BJournal%5D)">Lysis reagents, cell numbers, and calculation method influence high-throughput measurement of HDL-mediated cholesterol efflux capacity.</a> J Lipid Res. 62, 100125(2021).</li>
<li>Harada, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cholesterol+uptake+capacity%3A+A+new+measure+of+HDL+functionality+for+coronary+risk+assessment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Lab+Med%22%5BJournal%5D)">Cholesterol uptake capacity: A new measure of HDL functionality for coronary risk assessment.</a> J Appl Lab Med. 2 (2), 186-200 (2017).</li>
<li>Horiuchi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validation+and+application+of+a+novel+cholesterol+efflux+assay+using+immobilized+liposomes+as+a+substitute+for+cultured+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biosci+Rep%22%5BJournal%5D)">Validation and application of a novel cholesterol efflux assay using immobilized liposomes as a substitute for cultured cells.</a> Biosci Rep. 38 (2), BSR20180144(2018).</li>
<li>Lorkowski, S. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+cell-free+fluorescent+assay+for+HDL+function%3A+Low+apolipoprotein+a1+exchange+rate+associated+with+increased+incident+cardiovascular+events%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Lab+Med%22%5BJournal%5D)">A novel cell-free fluorescent assay for HDL function: Low apolipoprotein a1 exchange rate associated with increased incident cardiovascular events.</a> J Appl Lab Med. 5 (3), 544-557 (2020).</li>
<li>Denimal, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rethinking+%27good+cholesterol%27+for+cardiovascular+risk+stratification%5BTitle%5D)+AND+%22QJM%3A+An+Int+J+Med%22%5BJournal%5D)">Rethinking 'good cholesterol' for cardiovascular risk stratification.</a> QJM: An Int J Med. 117 (4), 243-245 (2023).</li>
<li>Borja, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HDL-apolipoprotein+A-I+exchange+is+independently+associated+with+cholesterol+efflux+capacity%5BTitle%5D)+AND+%22J+Lipid+Res%22%5BJournal%5D)">HDL-apolipoprotein A-I exchange is independently associated with cholesterol efflux capacity.</a> J Lipid Res. 56 (10), 2002-2009 (2015).</li>
<li>Borja, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HDL-apoa-I+exchange%3A+Rapid+detection+and+association+with+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">HDL-apoa-I exchange: Rapid detection and association with atherosclerosis.</a> PLoS One. 8 (8), e71541(2013).</li>
<li>Remaley, A. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Apolipoprotein+specificity+for+lipid+efflux+by+the+human+ABCAI+transporter%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Res+Commun%22%5BJournal%5D)">Apolipoprotein specificity for lipid efflux by the human ABCAI transporter.</a> Biochem Biophys Res Commun. 280 (3), 818-823 (2001).</li>
<li>Sato, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell-free%2C+high-density+lipoprotein-specific+phospholipid+efflux+assay+predicts+incident+cardiovascular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Cell-free, high-density lipoprotein-specific phospholipid efflux assay predicts incident cardiovascular disease.</a> J Clin Invest. 133 (18), e165370(2023).</li>
<li>Neufeld, E. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ApoA-I-mediated+lipoprotein+remodeling+monitored+with+a+fluorescent+phospholipid%5BTitle%5D)+AND+%22Biology+%28Basel%29%22%5BJournal%5D)">ApoA-I-mediated lipoprotein remodeling monitored with a fluorescent phospholipid.</a> Biology (Basel). 8 (3), 53(2019).</li>
<li>Davidson, W. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+apolipoprotein+B+depletion+on+HDL+subspecies+composition+and+function%5BTitle%5D)+AND+%22J+Lipid+Res%22%5BJournal%5D)">The effects of apolipoprotein B depletion on HDL subspecies composition and function.</a> J Lipid Res. 57 (4), 674-686 (2016).</li>
<li>Phillips, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+mechanisms+of+cellular+cholesterol+efflux%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Molecular mechanisms of cellular cholesterol efflux.</a> J Biol Chem. 289 (35), 24020-24029 (2014).</li>
<li>Oram, J. F., Yokoyama, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Apolipoprotein-mediated+removal+of+cellular+cholesterol+and+phospholipids%5BTitle%5D)+AND+%22J+Lipid+Res%22%5BJournal%5D)">Apolipoprotein-mediated removal of cellular cholesterol and phospholipids.</a> J Lipid Res. 37 (12), 2473-2491 (1996).</li>
<li>Phillips, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Is+ABCA1+a+lipid+transfer+protein%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Lipid+Research%22%5BJournal%5D)">Is ABCA1 a lipid transfer protein.</a> Journal of Lipid Research. 59 (5), 749-763 (2018).</li>
<li>Smith, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Abca1+mediates+concurrent+cholesterol+and+phospholipid+efflux+to+apolipoprotein+A-I%5BTitle%5D)+AND+%22J+Lipid+Res%22%5BJournal%5D)">Abca1 mediates concurrent cholesterol and phospholipid efflux to apolipoprotein A-I.</a> J Lipid Res. 45 (4), 635-644 (2004).</li>
<li>Ossoli, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipoprotein+X+causes+renal+disease+in+LCAT+deficiency%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Lipoprotein X causes renal disease in LCAT deficiency.</a> PLoS One. 11 (2), e0150083(2016).</li>
<li>Martínez-Beamonte, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+extra+virgin+olive+oil+high+in+bioactive+compounds+on+atherosclerosis+in+apoe-deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Nutr+Food+Res%22%5BJournal%5D)">Effect of extra virgin olive oil high in bioactive compounds on atherosclerosis in apoe-deficient mice.</a> Mol Nutr Food Res. , (2025).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1,2-ジミリストイル-sn-グリセロ-3-ホスホコリン</td><td>アヴァンティ・リサーチ</td><td>850345</td><td>14:0 PC(DMPC)クロロホルム ソルイトン</td></tr><tr><td>1,2-ジオレオイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノラミン-N-(リサミン・ロダミンBスルフォニル)(アンモニウム塩)</td><td>アヴァンティ・リサーチ</td><td>810150-C</td><td>クロロホルム溶液LRh-PE</td></tr><tr><td>接着膜</td><td>応用バイオシステム&nbsp;</td><td>4306311</td><td>マイクロアンプ透明接着フィルム&nbsp;</td></tr><tr><td>ベイ・コーポレーション高密度テフロンテープ 1/2インチ x 520</td><td>医療検査ソリューション</td><td>86732</td><td></td></tr><tr><td>ホウケイ酸ガラス管は20mmで鋭く、150mm</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>14-961-33</td><td></td></tr><tr><td>遠心分離機</td><td>サーモ・サイエンティフィック</td><td>ソーヴァルXプロシリーズ</td><td></td></tr><tr><td>クロロホルム</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>366927</td><td>HPLCに適しており、99.8%</td></tr><tr><td>コレステロールパウダー</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>C8667</td><td>3&β;-ヒドロキシ-5-コレステン、5-コレステン-3&β;-オール</td></tr><tr><td>グラッシン計量紙</td><td>コール・パーマー</td><td>&nbsp;UX-01338-02</td><td>LC-CSHの取り扱いについて</td></tr><tr><td>インキュベーションプレート</td><td>USA Scientific&nbsp;</td><td>1402-9700</td><td>TempPlate 96 ウェルセミスカート 0.2mL PCRプレート&nbsp;</td></tr><tr><td>脂質除去剤(LRA)</td><td>スペルコ</td><td>13358-U</td><td>LC-CSH</td></tr><tr><td>計測板</td><td>Greiner bio-one&nbsp;</td><td>655076</td><td>マイクロプレート、PS、96ウェル、Fボトム(煙突井戸)、黒色;フルオトラック、メッドバインディング</td></tr><tr><td>Microsoft Excel</td><td>Microsoft 365 MSO&nbsp;</td><td>バージョン2507</td><td></td></tr><tr><td>マルチフレックスピペットチップ</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>50-550-206</td><td>LC-CSH洗浄中の上澄液検査について</td></tr><tr><td>マルチラベルプレートリーダー</td><td>パーキン・エルマーとnbsp;</td><td>1420-050</td><td>Victor3 Wallac1420マルチラベルカウンター</td></tr><tr><td>生理食塩水</td><td>高品質な生物学的&nbsp;</td><td>114-055-101</td><td>複数回使用する場合、nbsp;</td></tr><tr><td>パラフィルム</td><td>コール・パーマー</td><td>HS23452</td><td>渦巻き時にガラス管トップを覆うために</td></tr><tr><td>ポリカボネート・エルレンマイヤーフラスコ</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>10-041-8</td><td>10%トリトンX溶液の場合</td></tr><tr><td>プールされたヒト血漿(血液由来)リチウムヘパリン)</td><td>イノベーティブ・リサーチ社</td><td>イプラウブリフ</td><td>参照プラズマ、陽性対照(PC)およびnbsp;</td></tr><tr><td>Surfact-Amps X 100&nbsp;</td><td>サーモ・サイエンティフィック</td><td>28314</td><td>10%トリトンX-100、蒸留水で10倍に薄めて</td></tr><tr><td>サーモミキサー</td><td>エッペンドルフ</td><td>5382000023</td><td>96ウェル熱ブロックを備えたサーモミキサーC</td></tr><tr><td>サーモミキサー・スマートブロック</td><td>エッペンドルフ</td><td>5306000006</td><td>96井戸スマートブロック</td></tr><tr><td>トランスファーピペット(3 mL、Falcon)</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>13-711-9CM</td><td>井戸の上部から泡を取り除くために</td></tr><tr><td>ボルテックスミキサー</td><td>ダイガー</td><td>3030A</td><td>上部のガラス管用アフィックスホルダー</td></tr></tbody></table>

高密度リポタンパク質特異的リン脂質流出アッセイ

High-Density Lipoprotein-Specific Phospholipid Efflux Assay

Plasma levels of high-density lipoprotein (HDL)-cholesterol (HDL-C) is currently a key metric for the clinical assessment of cardiovascular disease (CVD) ...

high-density-lipoprotein-specific-phospholipid-efflux-assay

Research

JoVE Journal

Biochemistry

生物化学

コレステロールアッセイは、培養細胞からのコレステロール流出率と細胞から放出されるコレステロールを受け入れるようにプラズマ受容体の能力を定量化するために設計されています。アッセイは、細胞内プールと細胞外受容体へのコレステロールのリリース間でのコレステロールコレステロール、平衡で細胞を標識で構成されています。...

コレステロール流出アッセイ

プロテオリポソームは、明確に定義された生化学的環境で再構成された精製チャネルとトランスポーターを研究するために使用されます。これらのタンパク質によって媒介される排出を測定するための実験的手順が示されています。プロテオリポソームを調製し、記録を行い、再構成されたタンパク質の機能特性を定量的に決定するためのデータを分析するための手順について説明します。...

プロテオリポソー​​ムベースの流出アッセイのClの単一分子特性を決定する<sup&gt; -</sup&gt;チャネルとトランスポーター

このプロトコルは、高密度リポタンパク質の小さなRNAの単離と定量化を説明しています。...

非コード小型RNA定量化のための高密度リポタンパク質の単離

多くの予測された(リン酸化)リパーゼは、その基質特異性と生理学的機能に関して十分に特徴付けられていません。ここでは、酵素活性を最適化し、天然基質を探索し、これらの酵素の生理学的機能を提案するためのプロトコルを提供します。...

リパーゼ及びホスホリパーゼ候補者のための基質特異性を定義します

私たちは、オプシンで再構成された大きな単層リポソームにおけるリン脂質のスクランブルを測定するための蛍光ベースのアッセイについて説明します。...

リン脂質スクランブラーゼ活性の蛍光ベースのアッセイ

HDL 脂質過酸化反応の定量の蛍光細胞生化学アッセイをご紹介します。この迅速かつ再現可能な測定は大規模な研究で HDL 機能を決定するため使用することができ、ヒトの疾患における HDL...

高密度リポタンパク質の脂質過酸化反応の高スループット測定用無細胞生化学的蛍光酵素試金

このプロトコルは、ライブセル イメージング細胞型システムを使用したリアルタイム流入速度と LDL コレステロールの取り込みを測定する効率的な方法を提供します。この手法は、細胞の形態およびそれ故に潜在的な細胞毒性を監視しながら LDL...

LDL コレステロールの取り込みアッセイ セルにライブセル イメージングを使用して正常性の監視

血清または血漿マクロファージ細胞モデルの in vitro におけるコレステロール排出能力の測定は、動脈硬化症のバイオ マーカーとして有望なツールです。本研究で我々 は、蛍光 NBD コレステロール排出法を標準化して 96...

高スループット Nitrobenzoxadiazole ラベル コレステロール排出アッセイ

ここでは、蛍光脂質センサーおよびリポソームを用いて、タンパク質抽出物を用いてホスファチジルセリンまたはホスファチジルイノシトール4-リン酸...

ホスファチジルセリン/ホスファチジルイノシトール4-膜間のリン酸交換の蛍光ベースの測定

ここでは、肝臓組織における脂肪滴の特性評価に最適化されたBODIPY...

肝脂肪症評価のための3D再構成による蛍光染色された脂肪滴の分析

従来の技術よりも優れた感度と分解能でリポソーム膜透過性を評価するための費用対効果の高い方法を紹介します。この技術は、新しいカプセル化されたリガンド置換反応を使用して、モデル膜のホスホリパーゼA 2...

毒PLA2の膜栄養作用に及ぼすホスファチジルイノシトールリン酸基の影響を調べるためのリポソーム膜透過性アッセイ

学ぶHDL機能性アッセイで心血管疾患リスクを評価する方法。蛍光リン脂質を用いた簡便な測定法により、冠動脈疾患の予測と研究・臨床応用が可能となる。

高密度リポタンパク質特異的リン脂質流出アッセイ

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