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DOI: 10.3791/69057-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This protocol outlines the imaging and computational workflow for extracting and validating imaging-based chromatin and epigenetic age (ImAge). The technique allows for quantifying aging and rejuvenation at single cell resolution.
このプロトコルは、画像診断に基づくクロマチンおよびエピジェネティック年齢(ImAge)を抽出し検証するためのイメージングおよび計算ワークフローを提示します。
私たちは、単一細胞分解能で老化と若返りを定量化するために設計された、画像ベースのクロマチンおよびエピジェネティックな年齢画像を開発しました。DNAメチル化時計は生物学的年齢を推定しますが、線形回帰に依存し、大規模なコホートを必要とし、サンプルを破壊するため、高コストで大規模または縦断的な研究には適していません。まず、凍結した臓器や組織を、ドライアイスの上に置いた冷えたモルタルに移します。
凍結組織に液体窒素を流し、事前に冷やした乳棒で徹底的に粉砕し、均一な細かい粉末になるまで粉砕します。事前に冷却された金属ヘラを使い、挽いた組織を複数の管に分けます。核を抽出した後、別のチューブで同比例のトリパンブルーと混混させます。
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