Name: 近位管上皮細胞における低酸素症/再酸素化損傷のモデル化 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-11-21T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 23 s
Description: 学ぶ近位管上皮細胞を用いた低酸素症・再酸素化損傷のin vitroモデル構築法。カスパーゼ-3活性やミトコンドリア呼吸機能の測定により、腎虚血再灌流障害のメカニズム解明と治療標的の同定を支援します。

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<table><tbody><tr><td>384ウェルqPCRプレート</td><td>応用バイオシステム</td><td>4309849</td><td></td></tr><tr><td>遠心分離機</td><td>オルトアルレサ</td><td>Biocen22R</td><td></td></tr><tr><td>クロロホルム</td><td>VWR</td><td>0757-500ML</td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F12</td><td>ギブコ</td><td>21331020</td><td></td></tr><tr><td>表皮成長因子</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>E9644</td><td></td></tr><tr><td>エタノール</td><td>パンリアック・アプリケム</td><td>141086.1214</td><td></td></tr><tr><td>FCS</td><td>バイオウエスト</td><td>S181B-500</td><td></td></tr><tr><td>加熱ブロック</td><td>エッペンドルフ</td><td>サーモミキサーC</td><td></td></tr><tr><td>ヒドロコルチゾン</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>H0135</td><td></td></tr><tr><td>低酸素インキュベーター</td><td>メマート</td><td>ICO 50メダル</td><td></td></tr><tr><td>IFN-γ;</td><td>ProspecBIo</td><td>CYT-358</td><td></td></tr><tr><td>インキュベーター</td><td>メマート</td><td>ICO 105</td><td></td></tr><tr><td>イソプロパノール</td><td>VWR</td><td>0918-1L</td><td></td></tr><tr><td>ITSe</td><td>ギブコ</td><td>41400045</td><td></td></tr><tr><td>L-グルタミン</td><td>ギブコ</td><td>25030081</td><td></td></tr><tr><td>マルチチャネルピペット</td><td>エッペンドルフ</td><td>3125000052</td><td></td></tr><tr><td>非CO2インキュベーター</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>PCRプライマー</td><td>ユーロフィンズ・ゲノミクス</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ペニシリン - ストレプトマイシン</td><td>ギブコ</td><td>15140-122</td><td></td></tr><tr><td>qPCRマスターミックス</td><td>NZYTech</td><td>MB22303</td><td></td></tr><tr><td>リアルタイムqPCRシステム</td><td>応用バイオシステム</td><td>クアントスタジオ5</td><td></td></tr><tr><td>逆転写マスターミックス</td><td>NZYTech</td><td>MB12502</td><td>酵素ミックスを含む</td></tr><tr><td>RNAseフリーの水</td><td>ハイクローン</td><td>SH3053802</td><td></td></tr><tr><td>シーホースXFセルミトストレステストキット</td><td>アジレント</td><td>103015-100</td><td>オリゴマイシン、FCCP、アンチマイシンA、ロテノンを含む</td></tr><tr><td>シーホース XF DMEM ミディアム</td><td>アジレント</td><td>103575-100</td><td></td></tr><tr><td>シーホースXFグルコース</td><td>アジレント</td><td>03577-100</td><td></td></tr><tr><td>シーホースXFグルタミン</td><td>アジレント</td><td>103579-100</td><td></td></tr><tr><td>シーホースXFピルバート</td><td>アジレント</td><td>103578-100</td><td></td></tr><tr><td>シーホース XFe96アナライザー</td><td>アジレント</td><td>S7800BR</td><td></td></tr><tr><td>シーホース XFe96 フラックスパック</td><td>アジレント</td><td>103792-100</td><td>XFe96細胞培養マイクロプレートおよびXFe96センサーカートリッジを含みます</td></tr><tr><td>サーマルサイクラー</td><td>バイオ・ラッド</td><td>T100サーマルサイクラー</td><td></td></tr><tr><td>トリイオドチロニン</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>T5516</td><td></td></tr><tr><td>トリゾール</td><td>インビトロジェン</td><td>15596026</td><td></td></tr><tr><td>UV-Vis分光光度計</td><td>デノヴィックス</td><td>DS-11</td><td></td></tr></tbody></table>

近位管上皮細胞における低酸素症/再酸素化損傷のモデル化

Modeling Hypoxia/Reoxygenation Injury in Proximal Tubular Epithelial Cells

Kidney transplantation accounts for approximately 60%-65% of all transplanted solid organs. Most donor kidneys are obtained from deceased individuals, ...

modeling-hypoxiareoxygenation-injury-proximal-tubular-epithelial

Research

JoVE Journal

Biology

生物学

呼吸と酸化的リン酸化により、細胞生存率に関連するミトコンドリア機能に対するプロテインキナーゼC（PKC）アイソザイムの活性化の効果を説明する。アプローチは、選択的に初代細胞培養や細胞のミトコンドリアの機能とエネルギー状態を決定するために種々のアッセイにおけるPKCアイソザイムを過剰発現するアデノウイルスの手法を適応します。...

腎細胞内のミトコンドリアの機能と細胞生存率の評価を過剰発現するプロテインキナーゼCアイソザイム

出典:Alluri, H., et.al.血液脳関門機能障害を研究するためのIn Vitro虚血再灌流損傷モデルとしての酸素-グルコース欠乏と再酸素化。J. Vis. Exp.

酸素-グルコース欠乏と再酸素化が細胞間相互作用に及ぼす影響

虚血再灌流(IR)損傷は、高い罹患率と死亡率と関連しています。ここで説明する酸素-グルコース欠乏および再酸素化(OGD-R)のin...

などの酸素グルコース欠乏および再酸素化<em&gt;インビトロ</em&gt;虚血再灌流傷害モデル血液脳関門の機能障害を研究するための

このプロトコルは、分離し腎作用前のヴィヴォ、ミトコンドリアの生体エネルギーを含む評価するためにその後サブ培養することができますマウス主要な腎尿細管細胞を特徴付けるコスト効率の高いアプローチを提供します。...

マウスの主な腎尿細管上皮細胞の分離と性質、高スループットの細胞フラックスの解析

このプロトコルは、極性が逆の小腸炎を利用し、頂端表面へのアクセスを可能にする頂端外壊死性腸炎(NEC)-in-a-dishモデルを記述する。NEC関連上皮破壊を検出するための免疫蛍光染色プロトコールと、NECインディッシュプロトコルに供するアピカルアウトエンテロイドの生存率を決定する方法を提供します。...

インビトロ 壊死性腸炎の頂端外腸炎モデル

ここでは、腎皮質からヒト腎尿細管上皮細胞(HRTEC)の初代培養物を取得し、細胞外マトリックス(3D-HRTEC)上で単層および三次元培養を開発するためのプロトコルについて説明します。...

ヒト腎尿細管上皮細胞初代培養の単分子膜および三次元条件での培養

私たちは、ヒト腎臓全体を処理して一次腎近位尿細管上皮細胞を単離および培養するための最適化されたプロトコルと、これらの細胞を3次元、マイクロ流体、微生理学的プラットフォームで適用して腎近位尿細管を再現するためのプロトコールを提示します。...

初代ヒト近位尿細管上皮細胞の単離と腎近位尿細管の微生理学的モデルの作成におけるそれらの使用

自己組織化型ヒト心臓オルガノイド(hCOs)は、ヒトの心臓発生や疾患をモデル化するための新興システムです。ここでは、低酸素再酸素化によるhCOの生成および損傷の方法論と、損傷後の予想される組織学的および機能的転帰の詳細を提供します。...

自己組織化ヒト心型心肌における低酸素再酸素損傷モデル

ここでは気液界面上で差別化された成長を含むヒト気管支気道組織の外植片から初代ヒト気管支上皮細胞を成長させるための詳細な方法について説明します。このメソッドは、人間の肺の健康と疾患における気道上皮の役割を調査するための主要な細胞の豊富なソースを提供します。...

外植片から成長した初代ヒト気管支上皮細胞

Chirpが長い非コードRNAのゲノム結合部位（lncRNAs）をマッピングするための新規かつ迅速な手法である。メソッドは、lncRNAバインドされたゲノムサイトの列挙を許可するアンチセンスタイルオリゴヌクレオチドの特異性を利用しています。...

RNA精製によってクロマチンの単離（チャープ）

学ぶ近位管上皮細胞を用いた低酸素症・再酸素化損傷のin vitroモデル構築法。カスパーゼ-3活性やミトコンドリア呼吸機能の測定により、腎虚血再灌流障害のメカニズム解明と治療標的の同定を支援します。

近位管上皮細胞における低酸素症/再酸素化損傷のモデル化

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