Name: in vitro 上皮オルガノイド-T細胞共培養システムを用いた常駐記憶CD8 T細胞分化 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-02-03T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 48 s
Description: 学ぶ上皮オルガノイドとCD8 T細胞の共培養法による常駐記憶T細胞分化のin vitro解析。マウス由来細胞を用い、フローサイトメトリーで免疫応答を評価し、女性生殖器感染症の免疫機構解明に貢献します。

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<ol><li>Rosato, P. C., Beura, L. K., Masopust, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+resident+memory+T+cells+and+viral+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Virol%22%5BJournal%5D)">Tissue resident memory T cells and viral immunity.</a> Curr Opin Virol. 22, 44-50 (2017).</li>
<li>Park, C. O., Kupper, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+emerging+role+of+resident+memory+T+cells+in+protective+immunity+and+inflammatory+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">The emerging role of resident memory T cells in protective immunity and inflammatory disease.</a> Nat Med. 21, 688-697 (2015).</li>
<li>Schenkel, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resident+memory+CD8+T+cells+trigger+protective+innate+and+adaptive+immune+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Resident memory CD8 T cells trigger protective innate and adaptive immune responses.</a> Science. 346 (6205), 98-101 (2014).</li>
<li>Ariotti, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skin-resident+memory+CD8+%2B+T+cells+trigger+a+state+of+tissue-wide+pathogen+alert%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Skin-resident memory CD8 + T cells trigger a state of tissue-wide pathogen alert.</a> Science. 346 (6205), 101-105 (2014).</li>
<li>Christo, S. N., Park, S. L., Mueller, S. N., Mackay, L. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Multifaceted+Role+of+Tissue-Resident+Memory+T+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">The Multifaceted Role of Tissue-Resident Memory T Cells.</a> Annu Rev Immunol. 42 (1), 317-345 (2024).</li>
<li>Gavil, N. V., Cheng, K., Masopust, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resident+memory+T+cells+and+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">Resident memory T cells and cancer.</a> Immunity. 57 (8), 1734-1751 (2024).</li>
<li>Christo, S. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Discrete+tissue+microenvironments+instruct+diversity+in+resident+memory+T+cell+function+and+plasticity%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Immunol%22%5BJournal%5D)">Discrete tissue microenvironments instruct diversity in resident memory T cell function and plasticity.</a> Nat Immunol. 22 (9), 1140-1151 (2021).</li>
<li>Pan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Survival+of+tissue-resident+memory+T+cells+requires+exogenous+lipid+uptake+and+metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Survival of tissue-resident memory T cells requires exogenous lipid uptake and metabolism.</a> Nature. 543, 252-256 (2017).</li>
<li>Hasan, M. H., Beura, L. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+interactions+in+resident+memory+T+cell+establishment+and+function%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Immunol%22%5BJournal%5D)">Cellular interactions in resident memory T cell establishment and function.</a> Curr Opin Immunol. 74, 68-75 (2022).</li>
<li>Ulibarri, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epithelial+organoid+supports+resident+memory+CD8+T+cell+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Epithelial organoid supports resident memory CD8 T cell differentiation.</a> Cell Rep. 43 (8), 114621(2024).</li>
<li>Evrard, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+protein+expression+profiling+resolves+circulating+and+resident+memory+T+cell+diversity+across+tissues+and+infection+contexts%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">Single-cell protein expression profiling resolves circulating and resident memory T cell diversity across tissues and infection contexts.</a> Immunity. 56 (7), 1664-1680.e9 (2023).</li>
<li>Borges da Silva, H., Wang, H., Qian, L. J., Hogquist, K. A., Jameson, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ARTC2.2%2FP2RX7+Signaling+during+Cell+Isolation+Distorts+Function+and+Quantification+of+Tissue-Resident+CD8%2B+T+Cell+and+Invariant+NKT+Subsets%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">ARTC2.2/P2RX7 Signaling during Cell Isolation Distorts Function and Quantification of Tissue-Resident CD8+ T Cell and Invariant NKT Subsets.</a> J Immunol. 202 (7), 2153-2163 (2019).</li>
<li>Künzli, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-lived+T+follicular+helper+cells+retain+plasticity+and+help+sustain+humoral+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Immunol%22%5BJournal%5D)">Long-lived T follicular helper cells retain plasticity and help sustain humoral immunity.</a> Sci Immunol. 5 (45), eaay5552(2020).</li>
<li>Kang, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+induced+alveolar+assembloids+with+functional+alveolar-like+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Generation of induced alveolar assembloids with functional alveolar-like macrophages.</a> Nat Commun. 16, 3346(2025).</li>
<li>Lin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+gastrointestinal+assembloids+to+study+the+interplay+between+epithelial+crypts+and+their+mesenchymal+niche%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Establishment of gastrointestinal assembloids to study the interplay between epithelial crypts and their mesenchymal niche.</a> Nat Commun. 14, 3025(2023).</li>
<li>Park, S. E., Georgescu, A., Huh, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoids-on-a-chip%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Organoids-on-a-chip.</a> Science. 364 (6444), 960-965 (2019).</li>
<li>Quintard, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+microfluidic+platform+integrating+functional+vascularized+organoids-on-chip%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">A microfluidic platform integrating functional vascularized organoids-on-chip.</a> Nat Commun. 15, 1452(2024).</li>
<li>Vincenti, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue-resident+memory+CD8%2B+T+cells+cooperate+with+CD4%2B+T+cells+to+drive+compartmentalized+immunopathology+in+the+CNS%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Tissue-resident memory CD8+ T cells cooperate with CD4+ T cells to drive compartmentalized immunopathology in the CNS.</a> Sci Transl Med. 14 (640), eabl6058(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>16%パラホルマルデヒド水溶液</td><td>電子顕微鏡科学</td><td>15710-S</td><td></td></tr><tr><td>24ウェルのポリスチレン非処理多孔ティスース培養プレート</td><td>VWRインターナショナル</td><td>10861-558</td><td></td></tr><tr><td>2-メルカプトエタノール</td><td>ギブコ</td><td>21985023</td><td></td></tr><tr><td>3 mL 滅菌注射器</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>14-955-457</td><td></td></tr><tr><td>5 mL、nbsp;スナップキャップ、そしてnbsp;無菌・丸底ポリスチレン試験管</td><td>ファルコン</td><td>352058</td><td></td></tr><tr><td>60mmペトリ皿</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>FB0875713A&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>70 & mu;m無菌細胞ストレーナー</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>22-363-548</td><td></td></tr><tr><td>96井戸未処理ポリスチレンラウンドボトムマイクロプレート</td><td>グライナー・バイオ・ワン</td><td>650101</td><td></td></tr><tr><td>96ウェルのポリスチレン非処理多孔組織培養プレート</td><td>VWRインターナショナル</td><td>10861-562</td><td></td></tr><tr><td>アルブミン牛/フラクションV(牛のアルブミン)</td><td>サーモ・サイエンティフィック・ケミカルズ</td><td>J6465518</td><td></td></tr><tr><td>塩化アンモニウム</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>A661-500</td><td></td></tr><tr><td>アンホテリシンB&nbsp;</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>A9528-100MG</td><td></td></tr><tr><td>B-27補足</td><td>ギブコ</td><td>17504044</td><td></td></tr><tr><td>ioTek Cytation 5細胞イメージングマルチモードリーダー</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F12 1:1 ミディアム</td><td>シチバ</td><td>SH30271。FS</td><td></td></tr><tr><td>ダルベッコのリン酸塩緩衝塩溶液 1回</td><td>コーニング</td><td>21031CV</td><td></td></tr><tr><td>エチレンジアミネテトラアセチン酸(0.5 M溶液/pH 8.0)</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>BP2482-500</td><td></td></tr><tr><td>超細微解剖ハサミ</td><td>ロボズ外科機器会社</td><td>RS-5882</td><td></td></tr><tr><td>胎児用牛血清 - 炭/デクトレン処理済み</td><td>R&Dシステムズ</td><td>S11650</td><td></td></tr><tr><td>Flowjo v10 ソフトウェア</td><td>ベクトン・ディキンソン・アンド・カンパニー</td><td>フロージョ(RRID:SCR_008520)</td><td></td></tr><tr><td>グレーフェ鉗子</td><td>ロボズ外科機器会社</td><td>RS-5135</td><td></td></tr><tr><td>HEPESソリューション</td><td>シチバ</td><td>SH30237.01</td><td></td></tr><tr><td>L-グルタミン(200 mM)</td><td>ギブコ</td><td>A2916801</td><td></td></tr><tr><td>マグネット 5mL</td><td>バイオレジェンド</td><td>480019</td><td></td></tr><tr><td>マウスCD8 Na&iuml;ve T細胞分離キット</td><td>バイオレジェンド</td><td>480044</td><td></td></tr><tr><td>マウスEGF組換えタンパク質</td><td>ギブコ</td><td>315091MG</td><td></td></tr><tr><td>非必須アミノ酸溶液(100倍)</td><td>ギブコ</td><td>11140050</td><td></td></tr><tr><td>ペニシリン-ストレプトマイシン溶液</td><td>シチバ</td><td>SV30010</td><td></td></tr><tr><td>重炭酸カリウム</td><td>MPバイオメディカル</td><td>0215255780</td><td></td></tr><tr><td>精製された抗マウスCD3&エプシロン;抗体</td><td>バイオレジェンド</td><td>100360</td><td></td></tr><tr><td>組換えマウスB7.1(CD80)-Fcキメラ(キャリアフリー)</td><td>バイオレジェンド</td><td>555406</td><td></td></tr><tr><td>組換えマウスIL-12(p70)(キャリアフリー)</td><td>バイオレジェンド</td><td>577004</td><td></td></tr><tr><td>組換えマウスIL-2(キャリアフリー)</td><td>バイオレジェンド</td><td>575406</td><td></td></tr><tr><td>低減成長因子基底膜抽出物</td><td>R&Dシステムズ</td><td>BME001-10</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640メディア</td><td>シチバ</td><td>SH30027.LS</td><td></td></tr><tr><td>アジ化ナトリウム</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>S227I-25</td><td></td></tr><tr><td>ピルビン酸ナトリウム(100 mM)</td><td>ギブコ</td><td>11360070</td><td></td></tr><tr><td>トリプシン0.25%プロテアーゼと豚トリプシン</td><td>シチバ</td><td>SH30042.02</td><td></td></tr><tr><td>バイアビリティダイ(レッド780)</td><td>サイテック・バイオサイエンス</td><td>13-0865-T100</td><td></td></tr></tbody></table>

in vitro 上皮オルガノイド-t細胞共培養システムを用いた常駐記憶cd8 t細胞分化

In Vitro Resident Memory CD8 T Cell Differentiation Using Epithelial Organoid-T Cell Co-culture System

in vitro 上皮オルガノイド-T細胞共培養システムを用いた常駐記憶CD8 T細胞分化

Barrier mucosal tissues play an important role in the differentiation and function of resident T cells. Among the diverse cell populations within these ...

in-vitro-resident-memory-cd8-t-cell-differentiation-using-epithelial

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JoVE Journal

Immunology and Infection

免疫学と感染症

このプロトコルは、一次LGR5-高い正のオルガノイド文化やレトロウイルス形質導入のその後のパフォーマンスを説明しています。これは配信の導入遺伝子のCre誘導性過剰発現またはノックダウンを可能にし、機能的研究は、in vitro器官における新規で行うことができるようになり モデル系。...

初代腸オルガノイド培養におけるレトロウイルス感染のビデオプロトコル

マウス胚性幹細胞は、OP9-DL1共培養システムを使用してin...

T細胞の導出体外マウス胚性幹細胞からの

私たちは、小さな腸の陰窩からヒトの腸を、手術組織と生検の両方から採取した結腸の陰窩からコロノイドを確立する方法を説明しています。この方法論の記事では、ヒトエンテロイドとコロノイドの成長と維持を成功させるために不可欠な培養モダリティを紹介します。...

全組織生検からヒト上皮EnteroidsとColonoidsの確立

現在の2D培養システムはin vivoのシナリオを模倣していないため、in...

髄質胸腺上皮細胞の増殖、分化および無差別遺伝子発現を支える3D器官共培養モデル

本論文では、三次元(3D)胸腺培養系により腫瘍抗原特異的誘導多能性幹細胞由来の甲状腺系(iTE)を生成する新しい方法について説明する。iTEは、増殖、記憶形成、腫瘍抑制の能力を有するナイーブT細胞と密接に関連するT細胞の均質なサブセットである。...

マウス誘導多能性幹細胞由来腫瘍抗原特異的胸腺移民を生成する三次元胸腺培養システム

通常記憶 B 細胞の長命の形質細胞への分化モデル

ここでは、腸管バリア機能、透過性、および輸送を研究するためのヒトオルガノイド由来腸上皮単層の調製について述べる。オルガノイドは外部刺激に対する元の上皮組織応答を表すので、これらのモデルは細胞株の拡張性の利点と初代組織の関連性と複雑さを兼ね備えています。...

オルガノイド由来の上皮単分子膜:腸管バリア機能のための臨床的に関連するインビトロモデル

このプロトコルは、マウス小腸オルガノイドの樹立、マウス小腸固有層からの1型先天性リンパ系細胞の単離、および腸上皮細胞と1型先天性リンパ系細胞との間の双方向相互作用を研究するための両方の細胞型間の3次元(3D)共培養を確立するための詳細な指示を提供する。...

マウス小腸上皮オルガノイドと先天性リンパ球細胞との共培養

このプロトコルは、腫瘍浸潤リンパ球 (TIL) と共培養された患者由来の結腸直腸癌 (CRC) オルガノイド...

患者由来大腸腫瘍オルガノイドと腫瘍浸潤リンパ球(TIL)の共培養系の確立

このプロトコルは、調節T細胞がエフェクターT細胞の増殖および分化に与える影響を調査するための in vitro...

in vitro 調節T細胞の機能分析:増殖と分化に焦点を当てる

学ぶ上皮オルガノイドとCD8 T細胞の共培養法による常駐記憶T細胞分化のin vitro解析。マウス由来細胞を用い、フローサイトメトリーで免疫応答を評価し、女性生殖器感染症の免疫機構解明に貢献します。

in vitro 上皮オルガノイド-T細胞共培養システムを用いた常駐記憶CD8 T細胞分化

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