Name: 顕微鏡アプローチのための ショウジョウバエ の間接飛行筋の解剖 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-11-07T14:20:00.000+00:00
Duration: 9 min 47 s
Description: 学ぶショウジョウバエの間接飛行筋解剖法。Drosophila melanogasterの筋肉発達とサルコメア形成におけるRNA制御を研究するための顕微鏡解析プロトコルを習得できます。

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<table><tbody><tr><td>60mm組織培養皿</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>FB012921</td><td>60mm、発泡スチロール</td></tr><tr><td>酢酸、氷河(認証ACS)</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>A38S-212</td><td></td></tr><tr><td>アデノシン三リン酸(ATP)</td><td>ミリポール・シグマ</td><td>A1852年</td><td></td></tr><tr><td>アルミホイル、重厚</td><td>アマゾン</td><td></td><td>12インチ。×1000フィート。</td></tr><tr><td>黒いシリコン解剖皿:活性炭粉末</td><td>ミリポール・シグマ</td><td>C9157</td><td>ほとんどの薬局でも入手可能です</td></tr><tr><td>黒いシリコン解剖皿:シルガード184</td><td>ミリポール・シグマ</td><td>761036</td><td>シリコン解剖食器を作るには、シルガードの成分をジップロック袋に入れてよく混ぜます。活性炭粉(~200mg)をシルガード(~50g)に加え、よく混ぜて袋の角を切り、60mmの培養皿に水を入れ、ピペットチップで泡を除去し、一晩で硬化させます。&nbsp;</td></tr><tr><td>段ボール製スライドトレイ、リサーチ・プロダクツ・インターナショナル社</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>50-136-7558</td><td></td></tr><tr><td>共焦点顕微鏡、ニコンAXR逆焦点共焦点</td><td>ニコン</td><td></td><td><a href="http://www.microscope.healthcare.nikon.com/">www.microscope.healthcare.nikon.com/</a></td></tr><tr><td>共焦点顕微鏡、ツァイスLSM 780逆共焦点</td><td>ツァイス</td><td></td><td><a href="http://www.zeiss.com/">www.zeiss.com</a></td></tr><tr><td>ダーウィン昆虫飼育室(インキュベーター)</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック/ダーウィン・チェンバース</td><td>IN034</td><td>光、温度、湿度制御インキュベーター</td></tr><tr><td>解剖皿(黒いガラス)</td><td>ミクロスコップ・テクニク・ディートヘルム</td><td>398011</td><td>リンパ式(染色用ボウル/リンパタンク)、黒いガラス、4x4cm、透明ガラスカバー付き</td></tr><tr><td>デュモン #3 鉗子</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>11231-30</td><td>デュモクセル直線型12cm鉗子、0.17 x 0.1 mmの先端&nbsp;</td></tr><tr><td>デュモン #5 鉗子</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>11252-20</td><td>イノックス直線型11cm鉗子、生物学グレード、0.05 x 0.02 mmの先端&nbsp;</td></tr><tr><td>EGTA(エグタジック酸)</td><td>ミリポール・シグマ</td><td>324626</td><td></td></tr><tr><td>エタノール、絶対量(200プルーフ)</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>BP28184</td><td>分子生物学グレード</td></tr><tr><td>フィッシャーブランドプレミアムカバーグラス(18 x 18 mm)、カバースリップ</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>12548A</td><td>ガラス、四角い、#1厚さ(0.13 - 0.16 mm)</td></tr><tr><td>フィッシャーブランドプレミアムカバーガラス(22 x 22 mm)、カバースリップ</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>12548B</td><td>ガラス、四角い、#1厚さ(0.13 - 0.16 mm)</td></tr><tr><td>フラットボトム細胞培養プレート(24ウェル)</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>7200740</td><td></td></tr><tr><td>蛍光解剖顕微鏡カメラ、Infinity8カメラ</td><td>テレダイン(ビジュアルダイナミックス)</td><td></td><td>600万画素、低照度、モノクロ</td></tr><tr><td>フライ:Smn[E33]</td><td></td><td></td><td>フライストック;グレゴリー・マテラの寄贈</td></tr><tr><td>ハエ:w[1118]</td><td>ブルーミントン・ストックセンター</td><td>リッド:BDSC_3605</td><td>フライストック</td></tr><tr><td>グリセロール</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>BP229-1</td><td>分子生物学グレード</td></tr><tr><td>グリオキサール溶液(H2Oに40 wt. %)</td><td>ミリポール・シグマ</td><td>128465</td><td>&nbsp;これは40%の純正溶液です</td></tr><tr><td>画像処理ソフトウェア、Affinity Designer 2</td><td>親和性</td><td></td><td>https://affinity.serif.com/en-us/</td></tr><tr><td>画像処理ソフトウェア、Image J(フィジー)</td><td>イメージJ2</td><td></td><td>https://imagej.net/software/fiji/</td></tr><tr><td>昆虫針</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>26002-10</td><td>ステンレス鋼、直径0.1mm(ミニチュアンピン)</td></tr><tr><td>塩化マグネシウム(MgCl2)</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>AA12315A1</td><td></td></tr><tr><td>メタノール(HPLC)</td><td>フィッシャー・ケミカル(フィッシャー・サイエンティフィック)</td><td>A452-4</td><td>-20度で落ち着く?使用前</td></tr><tr><td>顕微鏡スライド、すりガラス</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>12-550-400</td><td>書き込み面積、充電なし、75 mm x 25 mm x 1 mm</td></tr><tr><td>顕微鏡スライド、普通のガラス</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>12-544-4</td><td>事前洗浄済み、75mm x 25mm</td></tr><tr><td>MX35ウルトラミクストームブレード</td><td>エプレディア(フィッシャー・サイエンティフィック)</td><td>3053835</td><td>ロープロファイル、34度;カットアングル;C35フェザー80mmブレードはよく機能します</td></tr><tr><td>ネイルポリッシュ、クリア(サリー・ハンセン エクストリームウェア ネイルポリッシュ)</td><td>アマゾン</td><td></td><td>0.4 浮動オンス</td></tr><tr><td>通常のヤギ血清</td><td>ミリポール・シグマ</td><td>S26リットル</td><td></td></tr><tr><td>Nutator(ミニ・ナテイティングロッカー、ベンチマーク)</td><td>ミッドウエスト・サイエンティフィック</td><td>H3D1020</td><td>24回転、固定回転;8×6インチ。くぼみマット付きのプラットフォーム</td></tr><tr><td>ペイントブラシ(ラウンド0)</td><td>アマゾン</td><td></td><td>ラウンドNo.0や似たブラシは、どの画材でも手に入れています</td></tr><tr><td>パラホルムアルデヒド(PFA)</td><td>ミリポール・シグマ</td><td>158127-500G</td><td></td></tr><tr><td>リン酸緩衝生理食塩水(PBS):KCl</td><td>ミリポール・シグマ</td><td>529552-250GM</td><td>Cold Spring Harb ProtocによるとPBSを準備してください。2006;doi:10.1101/pdb.rec8247</td></tr><tr><td>リン酸緩衝生理食塩水(PBS):KH2PO4</td><td>ミリポール・シグマ</td><td>P0662-500G</td><td>Cold Spring Harb ProtocによるとPBSを準備してください。2006;doi:10.1101/pdb.rec8247</td></tr><tr><td>リン酸塩緩衝生理食塩水(PBS):Na2HPO4</td><td>ミリポール・シグマ</td><td>S9763-500G</td><td>Cold Spring Harb ProtocによるとPBSを準備してください。2006;doi:10.1101/pdb.rec8247</td></tr><tr><td>リン酸塩緩衝生理食塩水(PBS):NaCl</td><td>フィッシャー・ケミカル(フィッシャー・サイエンティフィック)</td><td>S271-1</td><td>Cold Spring Harb ProtocによるとPBSを準備してください。2006;doi:10.1101/pdb.rec8247</td></tr><tr><td>PR1MAピペットチップ(10&マイクロ;L)</td><td>ミッドウエスト・サイエンティフィック</td><td>PR10XLRK-NS</td><td>ユニバーサル10とマイクロ;Lピペットチップ</td></tr><tr><td>PR1MAピペットチップ(1000 & micro;L)</td><td>ミッドウエスト・サイエンティフィック</td><td>PR-1000RK-FL</td><td>ユニバーサル1000 & マイクロ;Lピペットチップ</td></tr><tr><td>PR1MAピペットチップ(200およびマイクロ;L)</td><td>ミッドウエスト・サイエンティフィック</td><td>PR-200RK-NS</td><td>ユニバーサル200 &マイクロ;Lピペットチップ</td></tr><tr><td>ロダミン・ファロイジン</td><td>インビトロジェン、分子プローブ</td><td>R415</td><td></td></tr><tr><td>スコッチ両面テープ</td><td>スコッチ/3M(ステイプルズ)</td><td>649280</td><td>両面に0.5インチ×7ヤードの接着剤が塗られ、ほとんどの文具業者で入手可能です</td></tr><tr><td>二水素リン酸ナトリウム二水和物(NaH2PO4)</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>AAA1131636</td><td></td></tr><tr><td>ソフトウェア:GraphPad Prism</td><td>GraphPad プリズム</td><td></td><td><a href="http://www.graphpad.com/">www.graphpad.com</a></td></tr><tr><td>ソフトウェア:インフィニティ・アナセリー7</td><td>テレダイン(ビジュアルダイナミックス)</td><td></td><td><a href="https://www.teledynevisionsolutions.com/products/infinity-analyze/">https://www.teledynevisionsolutions.com/products/infinity-analyze/</a></td></tr><tr><td>ソフトウェア:Microscoft Excel</td><td>マイクロソフト</td><td></td><td>https://www.microsoft.com/en-us/microsoft-365/excel</td></tr><tr><td>ティッシュ/キムテックサイエンス キムワイプ デリケートタスクワイパー、1プライ</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>06-666</td><td>標準的なティッシュワイプ</td></tr><tr><td>トランスファーピペット</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>13-711-9AMD</td><td>プラスチックピペット</td></tr><tr><td>トリション X-100</td><td>ミリポール・シグマ</td><td>T9284-100ML</td><td></td></tr><tr><td>ヴァナススプリングハサミ</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>15000-00</td><td>切断刃3mm、先端直径0.05mm、長さ8cm</td></tr><tr><td>VectashieldとDAPI</td><td>ベクター研究所</td><td>H-2000</td><td></td></tr><tr><td>DAPIなしのVectashield</td><td>ベクター研究所</td><td>H-1900</td><td></td></tr><tr><td>ワットマン・ペーパー</td><td>ミリポール・シグマ</td><td>WHA1004070</td><td>ろ過紙サークル、グレード4、70mmです</td></tr><tr><td>Z10蛍光立体解剖顕微鏡</td><td>ビジュアル・ダイナミックス(ミッドウエスト・サイエンティフィック)</td><td></td><td>http://www.visualdynamix.net/</td></tr><tr><td>Z850 エルゴノミクスステレオズーム解剖顕微鏡</td><td>ビジュアル・ダイナミックス(ミッドウエスト・サイエンティフィック)</td><td></td><td>http://www.visualdynamix.net/</td></tr></tbody></table>

顕微鏡アプローチのための ショウジョウバエ の間接飛行筋の解剖

Dissection of Drosophila melanogaster Indirect Flight Muscles for Microscopy Approaches

The indirect flight muscles (IFMs) of Drosophila melanogaster are a powerful genetic model to explore foundational principles of myogenesis. The ...

dissection-drosophila-melanogaster-indirect-flight-muscles-for

Research

JoVE Journal

Biology

生物学

このプロトコルは、分析する方法を示しています...

ショウジョウバエ幼虫NMJの解剖

筋肉の損傷のメカニズムの同定は非常に重要です。ここでは、ショウジョウバエの胸部筋肉のパラフィン包埋して凍結切片を調製するための組織学的手法を提示する。これは筋肉の形態やタンパク質と他の筋肉の細胞成分の局在の分析を行うことができます。...

のパラフィン包埋して凍結切片ショウジョウバエアダルトの筋肉

で、アクティブなゾーンの解剖とイメージングショウジョウバエ神経筋接合部

ショウジョウバエの飛行筋は、筋肉の発達と生理学のモデルシステムとして使用されます。このビデオでは、成体の飛行筋組織について説明し、蛹からのRNAシーケンシングに適した発達中の間接飛行筋を解剖するためのプロトコルに焦点を当てています。...

ショウジョウバエ後期蛹間接飛行筋(IFM)解剖:ハイスループット組織収集の方法

このビデオは、ショウジョウバエの背側縦筋の神経筋接合部の構造的完全性を評価するためのプロトコルを示しています。この手順では、ニューロンと筋肉を2つの異なる抗体で染色し、突然変異型と野生型のハエの蛍光パターンを比較します。突然変異型ハエのニューロン染色の減少は、神経変性を示していますが、筋肉構造は無傷のままです。...

ショウジョウバエの背側縦筋神経筋接合部の構造的完全性の評価

ショウジョウバエの幼虫の樹状樹枝状（DA）ニューロンを用いて、神経細胞の形態形成の研究は、免疫蛍光によって、神経や表皮タンパク質のその場可視化で恩恵を受ける。私たちは、幼虫の体壁から筋肉組織を除去することにより、ダニューロンと周囲の表皮細胞の免疫蛍光分析を向上させる手順を説明します。...

の除去<em&gt;ショウジョウバエ</em感覚ニューロンおよび表皮細胞の免疫蛍光分析のための幼虫の切り身から&gt;筋肉組織

ショウジョウバエ大人の筋肉量を決定するための間接的な手法である筋面積を定量化する手法を報告する.筋筋強直性ジストロフィー症ショウジョウバエモデルの間接飛翔を分析することによって私たちの方法論の適用を示します。...

キイロショウジョウバエ成虫の間接飛翔筋の光学断面筋決定

ショウジョウバエ飛行筋は、転写調節、代替スプライシング、代謝、およびメカノバイオロジーを研究するための強力なモデルです。我々は、プロテオミクスおよび深いシーケンシングに最適な高濃縮サンプルを生成するために、生きている子犬から蛍光標識飛行筋を解剖するためのプロトコルを提示する。これらのサンプルは、筋肉の発達の多様な側面に重要な機械的洞察を提供することができます。...

オミクスアプローチに対するショウジョウバエメラノガスター飛行筋肉の解剖

マイクロコンピュータ断層撮影を用いた開発のあらゆる段階で、無傷の ショウジョウジョウバエメラノガスター...

微小断層撮影による ショウジョウバエメラノガスター の動物全体イメージング

このレポートは、 ショウジョウバエ の幼虫の神経筋接合部を視覚化するための新しいサンプル調製手順を提供します。この方法は、従来の方法と比較してサンプルのカールを防ぐのにより効果的であり、 ショウジョウバエの...

ショウジョウバエ幼虫の神経筋接合部の透過型電子顕微鏡法のためのサンプル調製プロセスの最適化

ショウジョウバエ は、筋形成を調節する重要な分子を研究するための確立されたモデルです。しかし、現在の方法では、mRNAの転写動態や合胞体内の空間分布を決定するには不十分です。この制限に対処するために、1分子スケールでのmRNAの検出と定量を可能にするRNA蛍光 in situ ハイブリダイゼーション法を最適化しました。...

ショウジョウバエの1分子スケールでの筋肉転写ダイナミクスの研究

学ぶショウジョウバエの間接飛行筋解剖法。Drosophila melanogasterの筋肉発達とサルコメア形成におけるRNA制御を研究するための顕微鏡解析プロトコルを習得できます。

顕微鏡アプローチのためのショウジョウバエの間接飛行筋の解剖

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