Name: 病原体関連分子パターンによる精巣上体炎のマウスモデル (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-12-12T13:50:00.000+00:00
Duration: 8 min 30 s
Description: 学ぶマウス精巣上体炎の外科モデル。組織間注射と血管内注射を用いて、精巣上体の初期分節と尾部に炎症を誘導し、領域特異的な炎症応答メカニズムを解明する方法です。生殖医療研究に有用です。

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<ol><li>Hinton, B., Robaire, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Epididymis%5BTitle%5D)+AND+%22Knobil+and+Neill%27s+Physiology+of+Reproduction+Volume+1%22%5BJournal%5D)">The Epididymis.</a> Knobil and Neill's Physiology of Reproduction Volume 1. 1, 691-771 (2015).</li>
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<li>Silva, E. J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipopolysaccharide+and+lipotheicoic+acid+differentially+modulate+epididymal+cytokine+and+chemokine+profiles+and+sperm+parameters+in+experimental+acute+epididymitis%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Lipopolysaccharide and lipotheicoic acid differentially modulate epididymal cytokine and chemokine profiles and sperm parameters in experimental acute epididymitis.</a> Sci Rep. 8 (1), 103(2018).</li>
<li>Cheng, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toll-Like+receptors+4+and+5+cooperatively+initiate+the+innate+immune+responses+to+uropathogenic+Escherichia+coli+infection+in+mouse+epididymal+epithelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Reprod%22%5BJournal%5D)">Toll-Like receptors 4 and 5 cooperatively initiate the innate immune responses to uropathogenic Escherichia coli infection in mouse epididymal epithelial cells.</a> Biol Reprod. 94 (3), 58(2016).</li>
<li>Stammler, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epididymitis%3A+Ascending+infection+restricted+by+segmental+boundaries%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Reprod%22%5BJournal%5D)">Epididymitis: Ascending infection restricted by segmental boundaries.</a> Hum Reprod. 30 (7), 1557-1565 (2015).</li>
<li>Turner, T. T., Bomgardner, D., Jacobs, J. P., Nguyen, Q. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+of+segmentation+of+the+epididymal+interstitium+with+segmented+tubule+function+in+rats+and+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Reproduction%22%5BJournal%5D)">Association of segmentation of the epididymal interstitium with segmented tubule function in rats and mice.</a> Reproduction. 125 (6), 871-878 (2003).</li>
<li>Barrachina, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CX3CR1+deficiency+leads+to+impairment+of+immune+surveillance+in+the+epididymis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Mol+Life+Sci%22%5BJournal%5D)">CX3CR1 deficiency leads to impairment of immune surveillance in the epididymis.</a> Cell Mol Life Sci. 80 (1), 15(2022).</li>
<li>Klein, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+tissue-specific+damage+caused+by+bacterial+epididymo-orchitis+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Hum+Reprod%22%5BJournal%5D)">Differential tissue-specific damage caused by bacterial epididymo-orchitis in the mouse.</a> Mol Hum Reprod. 26 (4), 215-227 (2020).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>斜めの鈍頭外科用鉗子など;</td><td>ボンサー</td><td>xtycga1012</td><td></td></tr><tr><td>角度付き手術用鉗子</td><td>ボンサー</td><td>PWGHVV1012</td><td></td></tr><tr><td>ブルーエバンス解</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>E2129</td><td></td></tr><tr><td>ブルドッグピンセットクランプ&nbsp;</td><td>ボンサー</td><td>JTKPQS1012</td><td></td></tr><tr><td>クロルヘキシジン</td><td>リオク&イアキューテ;雲母</td><td>リオヘックス 0.25%</td><td></td></tr><tr><td>カーブ手術用鉗子</td><td>ボンサー</td><td>506e6e1012</td><td></td></tr><tr><td>電動トリマーペン形状</td><td>-</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>ハミルトン注射器</td><td>ハミルトン</td><td>80400</td><td></td></tr><tr><td>ヘッドバンドの拡大鏡&nbsp;</td><td>OptiVISOR(OptiVISOR)</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>ケタミン</td><td>ヴェンコ動物健康</td><td>ケタレックス</td><td></td></tr><tr><td>LPS&nbsp;大腸菌より 055:B55</td><td>インビボジェン</td><td>TLRL-pb5lps</td><td></td></tr><tr><td>黄色ブドウ球菌によるLTA</td><td>インビボジェン</td><td>tlrl-pslta</td><td></td></tr><tr><td>ニードルホルダー</td><td>ボンサー</td><td>8pihbf1012</td><td></td></tr><tr><td>サイズ5/0 外科用縫合糸</td><td>シャロン・メディカル</td><td>N550CTI20</td><td></td></tr><tr><td>無菌生理食塩水</td><td>-</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>ストレート外科用鉗子</td><td>ボンサー</td><td>ejaiuz1012</td><td></td></tr><tr><td>キシラジン</td><td>シンテック</td><td>シラジン</td><td></td></tr></tbody></table>

病原体関連分子パターンによる精巣上体炎のマウスモデル

Mouse Models of Epididymitis Induced by Pathogen-Associated Molecular Patterns

ここでは、マウスの初期セグメントにおける炎症刺激(間質注射)と尾尾上体(血管内注射)に対する2つの異なる外科的注射モデルを記述します。前者は近位精巣上体に炎症反応を引き起こし、後者は遠位上体に炎症反応を引き起こします。
間質性注射は腹部の切開から行われ、鼠の精巣と精巣上体を陰嚢から鼠径管を通じて腹部へ移動させる可能性を利用します。切開部の初期セグメントを慎重に露出した後、精巣上体の最初のセグメント(セグメント#1)の間質空間に注射を行います(図2Aおよび補足図1)。Blue Evans染料を用いて、注入された溶液は主にマウスの上体部#1に最大30分間限定され、間質隔膜が注入物質のゲートに果たす役割が確認されました。それにもかかわらず、染料は初期...

Epididymitis is a highly prevalent disease in the outpatient urologic clinic and a relevant factor in male infertility. Bacterial infections, including ...

私たちは、男性の生殖能力における精巣上体の生理学に対する炎症の影響を調査します。損傷なく正確に区画化された炎症誘導剤注射。マウスモデルにおける上体管は高度な外科的技術と訓練の組み合わせを必要とします。まず、麻酔された動物を手術フィールドの上で仰向けに置きます。電動トリマーペンを使って、マウスの腹部の毛を完全に取り除きます。次に、0.25%クロルヘキシジン溶液に浸した滅菌綿を使用します。そしてアルコールで腹部無菌を行います。サイズ15のメスで、腹壁右側に約4ミリメートルの垂直切開を行ってください。次に、斜めの鈍い手術用鉗子で優しく皮膚を切り離します。その後、同じメスを使い、最初の切開の側面の腹膜に約4ミリメートルの垂直切開をもう一度行います。陰嚢の右側を優しく押して精巣の精巣上体を腹腔から慎重に持ち上げます。湾曲した手術用鉗子を使い、精巣上体白色脂肪組織を優しく引き寄せて、精巣上体の最初の部分を位置づけます。上体白い脂肪組織の助けを借りて、切開部の初期セグメントを露出させます。次に、注入液をあらかじめ装填したハミルトン注射器を、初期セグメントの第1セグメントに約90度平行な角度で配置します。刃取りを下向きにして、針を間質部に慎重に挿入します。次に、湾曲した手術用鉗子を針の挿入部位に位置させ、精巣上体包と針を優しくつまみます。注射器のプランジャーをゆっくりと押し、刺激液全体が注入されるまで続けます。湾曲した手術用鉗子をそのままにし、約30秒後に慎重に針を抜き、曲がった手術用鉗子を離します。次に、精巣上体白い脂肪組織を使い、精巣組織を優しく腹腔に戻します。腹膜を特定し、針ホルダーとサイズ5-0の外科用縫合糸を使って2針縫合し、皮膚切開部を2針の縫合糸で閉じます。手術後はマウスの様子を観察し、術後の回復が適切かどうか確認してください。麻酔をかけた後、マウスを手術部位で仰向けにします。人差し指と親指を陰嚢の下に置いて触診し、精巣と精巣上体の位置を確認します。必要に応じて、腹部の側面を陰嚢に向かって優しくマッサージし、精巣と精巣上体を位置に導きます。電動トリマーペンを使い、陰嚢の三毛切除術を行い、毛を完全に除去し、0.25%クロルヘキシジン溶液に浸した滅菌綿で消毒し、その後アルコールで消毒します。陰嚢の下の人差し指と親指で、陰嚢の皮膚を優しく伸ばします。サイズ15のメスを使い、陰嚢の内側に約2ミリメートルの垂直切開を行います。次に、左精巣と精巣上体を優しく腹腔内に戻し、右精巣と精巣上体は陰嚢内に留めます。人差し指と親指を右精巣と精巣上腺の下に置き、陰嚢の皮膚を優しく伸ばしておいてください。その後、斜めの鈍頭手術用鉗子を使い、内精筋膜の先端を慎重に開閉し、内精膜と膣のチュニックを破裂させます。次に、人差し指と親指の圧力を和らげ、膣のチュニックの開口部から斜めの手術用鉗子を陰嚢の根元に差し込みます。鉗子を使って、尾部精巣上体脂肪を慎重に引き抜き、尾部の精巣上体を局所的にします。次に、精管を局所化し、まっすぐな手術用鉗子をその下に配置します。ブルドッグピンセットクランプを輸精管に置き、尾骨上体とクランプの間に十分なスペースを確保します。次に、注射液をあらかじめ装填したハミルトン注射器を精管に対して約10度から15度の平行な角度で位置し、ベベルを上に向けて針を挿入します。まっすぐな手術用鉗子を優しく絞って精管を解放し、注射プランジャーをゆっくりと押し込んで刺激液全体を注入します。さて、まっすぐな手術用鉗子を外してください。湾曲した手術用鉗子を使って、針の挿入部位の周囲を優しくつまみ、慎重に注射針を抜きます。約30秒後に、湾曲した手術用鉗子とブルドッグピンセットクランプを外し、精管を優しく陰嚢に戻します。次に膣のチュニックを特定し、針ホルダーとサイズ5-0の外科用縫合糸を使って1目縫い合わせます。人差し指を使って、右精巣と精巣上体を優しく腹部に戻し、左の精巣と精巣上体を陰嚢に移します。最後に、針ホルダーとサイズ5-0の外科用縫合糸を使って陰嚢の皮膚切開部を2針の縫合糸で閉じ、マウスの術後の回復を観察します。初期セグメントの間質性注射により、注入された青いエバンス染料は注射後最大30分間主にセグメント1に限定され、その後隣接するセグメントやカプット精上腺に拡散しました。精管内注射により、青いエバンス染料は注射後最大30分間、セグメント10の腔内に閉じ込められました。組織学的写真顕微鏡写真により、生理食塩水制御注射は治療後72時間の精巣上体形態に変化を与えなかったことが確認されました。初期セグメントへの間質性LPS注射は、治療後72時間で間質性浮腫および激しい間質性、上皮内、腔内免疫細胞の浸潤を引き起こしました。尾部精巣上体へのLPSまたはLTAの腸内注射により、治療後72時間で間質性浮腫と間質および腔内区画に免疫細胞浸潤が生じました。局所的な精巣上体炎症とそれが男性の生殖能力に与える影響を研究する再現可能な動物モデルの欠如。炎症誘発性化学物質の直接局所注射により、精巣上体の結果における領域特異的な免疫応答の精密解析が可能になります。

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Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

免疫学と感染症

出典: Conover, M. S. ら, J. マウスモデルにおける尿路感染症およびCAUTIの確立と特徴付け。 J. Vis. Exp.

マウスモデルにおけるカテーテル関連尿路感染症

前立腺の感染は、慢性前立腺炎における骨盤痛を媒介する要因かもしれません。我々は時間をかけて、マウスにおける接触性アロディニアを測定するための雄マウスと方法論の尿道への細菌の点滴、標準化された細菌の接種物の調製のための手順を記述している。...

細菌性前立腺炎のマウスモデルにおける接触性アロディニアの測定

シトロrodentium感染は腸内細菌感染症を勉強するだけでなく、マウスでは免疫応答や大腸炎をホストするための貴重なモデルを提供します。このプロトコルは、障壁の完全性、病原体負荷と病原体と宿主マウス感染性大腸炎への貢献を徹底特性評価を可能にする組織学的損傷の測定の概要を説明します。...

ザ<em&gt;シトロrodentium</em&gt;マウスモデル：感染性大腸炎に勉強病原体とホスト貢献

髄膜炎菌は、血管に感染するヒト特異的病原体である。このプロトコルでは、ヒト微小血管は、免疫不全マウスにヒト皮膚を移植することによってマウスに導入される。細菌は、典型的には、ヒトの場合に観察紫斑発疹の血管損傷と発展につながる、人間の血管に広く付着する。...

微小血管系を対象に細菌感染を研究するためのヒト化マウスモデル

動物モデルは、慢性炎症の発展に貢献宿主および病原体特異的なメカニズムを定義する上で非常に貴重なツールであることが分かっている。ここでは、ローカルおよび全身の部位での炎症の進行を評価するために、ヒト病原体ポルフィロモナス·ジンジバリスとディテールの方法論で経口感染のマウスモデルを記述する。...

局所および全身所における病原体により誘導される慢性炎症のためのマウスモデル

細菌の病因を理解し、新しい治療法の開発を生み出すためには、尿路感染症(UTI)をモデル化する能力が重要です。この研究の目標は、ヒトで見られる所見を再現および予測する実験的UTIおよびカテーテル関連UTIのマウスモデルを実証することです。...

マウスモデルにおけるUTIとCAUTIの樹立とその性状

慢性前立腺炎/慢性骨盤痛症候群の前臨床モデルを誘導するために、新生児の母体の分離 - 私たちは、初期生活ストレスパラダイムを受けた雄のC57BL / 6マウスの前立腺におけるperigenital機械的感度および肥満細胞の活性化を測定しています。...

新生児母子分離のマウスモデルにおけるPerigenital感度と前立腺肥満細胞の活性化の評価

フットパッド接種モデルは、生体内でウイルス誘発性神経炎症反応を特徴付けるための貴重なツールです。特に、末梢神経系において開始されたウイルス動態および関連する免疫病理学的プロセスの明確な評価を提供する。...

ウイルス誘導神経炎症反応を研究するマウスフットパッド接種モデル

実験的自己免疫性脳脊髄炎は、多発性硬化症の最も広く使用されているマウスモデルの1つです。現在のプロトコルでは、雌雄のC57BL/6Jマウスにミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質ペプチドを免疫し、主に尾と四肢の上行麻痺を引き起こします。ここでは、EAEの誘導と評価のプロトコルについて説明します。...

両性における多発性硬化症のモデル化:MOG35-55誘発性実験的自己免疫性脳脊髄炎

マウスにおける上行性膣感染症、早産、および新生児罹患率のモデル化

このプロトコルは、2Dで培養されたマウス前立腺オルガノイドモデルの生成を記述しています。この検査には、オルガノイド解離、細胞シーディング、分化、上皮の完全性評価、そして尿路病原性大腸菌による体外感染が含まれます。このモデルは頂端のアクセス性を提供し、宿主と病原体の相互作用の研究に適しており、従来の3Dオルガノイドシステムの制約を克服します。...

宿主-病原体相互作用を研究するためのマウス前立腺オルガノイドモデルの生成

学ぶマウス精巣上体炎の外科モデル。組織間注射と血管内注射を用いて、精巣上体の初期分節と尾部に炎症を誘導し、領域特異的な炎症応答メカニズムを解明する方法です。生殖医療研究に有用です。

病原体関連分子パターンによる精巣上体炎のマウスモデル

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