修正された塩化鉄誘発性上矢状洞血栓症の確立

私たちの分野では、上矢状洞血栓症に対していくつかのモデル化手法が用いられています。しかし、塩化鉄誘導法はその簡便さと低コストから広く使われています。我々は、皮質損傷を減らし洞血栓を可視化することで、塩化鉄化鉄鉱誘導性上矢状洞血栓症モデルを洗練させることを目指します。

まず、麻酔をかけたラットの両目に眼軟膏を塗り、頭皮の毛を慎重に剃ります。その後、医療用テープを使ってネズミを齧歯類の手術台に伏せて固定します。体温を温熱パッドで約37度に保ちます。

剃った頭皮を5%のポビドンヨードで徹底的に消毒し、その後75%のアルコールを使い、これを3回繰り返します。つまみ反射で麻酔の深さを確認した後、頭皮に15ミリメートルの中央周側皮膚切開を入れます。鈍的解離を用いて、下の筋膜と骨膜を分離し、頭蓋骨を完全に露出させます。

頭蓋骨を薄くして、上矢状洞がはっきりと露出するまで、ラムダから始まり矢状縫合線に沿って前方10ミリメートル伸びます。断続的なドリル技術を用いて、下部硬膜や上矢状洞の損傷を防ぎ、皮質への熱損傷を防ぐためにドリルビットを定期的に生理食塩水で洗浄してください。基準状態を画像診断した後、露出した上矢状洞面に40%塩化鉄溶液を浸した10ミリメートルの2-0シルク縫合糸を5分間塗布します。

新しく浸したセグメントに縫い替え、さらに5分間塗布します。その後、残留塩化鉄を除去するために、0.5ミリリットルの生理食塩水で手術部位を3回洗い流します。4-0シルク縫合糸で断続縫合を使い、皮膚をポビドンヨードで消毒します。

ネズミが完全に目を覚ますまで観察し、その後ケージに戻します。レーザースペックルコントラストイメージングシステムと対応するソフトウェア、RF LSIバージョン5を起動してください。オンラインモードのボタンを押してライブ撮影を起動します。

計測器の高さと位置を調整し、インジケーターレーザーが視野の中心に収まるまで調整します。ラットをフォームプラットフォームに置き、位置を調整して上矢状洞が指示レーザーと一致するまで調整します。画像がはっきり表示されるまで倍率とピントを調整してください。

擬似色の閾値の下限と上限を設定し、擬似カラー画像の視覚的外観を最適化します。上矢状洞に円形のROIを設定し、静脈流を記録し、元の画像と擬似カラーの画像を保存します。イソフルラン、超音波ジェル、使い捨てカミソリ、医療用テープを準備し、必要な器具をすべて確認してください。

三次元取得モーターをイメージングシステムに取り付けてください。次にUHF 57Xトランスデューサーを取り付け、モーターを初期化します。麻酔後、ラットを37度に設定されたサーモスタティックイメージングプレートに伏せ、医療用テープで頭部と四肢を優しく固定します。

露出した頭皮に均等に超音波ジェルを塗ります。ラットの位置と向きを調整し、上矢状洞と腔内血栓が明確に見えるまで調整します。3次元画像Bモードで0.04ミリメートルのステップサイズで矢状面上矢状洞の逐次トモグラフィー画像を取得し、同じ設定で冠状面のトモグラフィー画像を撮影します。

カラードップラーモードで上矢状洞の血流を観察し、パルス波ドップラーモードで血流速度を測定します。麻酔を中止し、ラットが完全に目覚めるまで観察してください。その後、ネズミをケージに戻します。

最後に、取得した画像をエクスポートし、Vevo LABソフトウェアで解析します。上矢状洞における最大矢状面および冠状断面積、血栓の容積、さらに洞の最大血流速度を記録します。局所的な塩化二鉄塗布後、レーザースペックルコントラストイメージングにより、上矢状静脈洞の局所血流がベースラインと比較して有意に減少することが検出されました。

術後7日目に小動物の超音波検査で上矢状静脈洞に血栓形成が確認され、部分的な腔内再開化が確認されました。パルス波ドップラー超音波では、上矢状静脈洞の残留腔内で測定可能な血流速度が示されました。3次元超音波イメージングにより、厚さ0.04ミリの連続画像スライスを用いて上矢状洞血栓の体積測定が可能となりました。

当社の洗練されたモデルは侵襲性が低く、超音波画像診断により適合し、より信頼性が高く直接的な治療開発と評価を可能にします。術中レーザースペックル造影画像でモデルの成功を確認し、術後の高解像度超音波で血栓形成、溶解、内腔再開化を動的に監視します。