Name: マウス皮膚における触覚感覚軸索形態のバイタル2光子イメージング (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-12-30T13:50:00.000+00:00
Duration: 7 min 51 s
Description: 学ぶマウス皮膚におけるバイタル2光子イメージングを用いた低閾値機械受容器軸索終末の可視化法。この手法により、生体内での感覚回路構造と機能の発達研究が可能となる。

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<ol><li>Abraira, V. E., Ginty, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+sensory+neurons+of+touch%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">The sensory neurons of touch.</a> Neuron. 79 (4), 618-639 (2013).</li>
<li>Handler, A., Ginty, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mechanosensory+neurons+of+touch+and+their+mechanisms+of+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The mechanosensory neurons of touch and their mechanisms of activation.</a> Nat Rev Neurosci. 22 (9), 521-537 (2021).</li>
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<li>Suzuki, M., Ebara, S., Koike, T., Tonomura, S., Kumamoto, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+many+hair+follicles+are+innervated+by+one+afferent+axon%3F+A+confocal+microscopic+analysis+of+palisade+endings+in+the+auricular+skin+of+thy1-YFP+transgenic+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Jpn+Acad+Ser+B+Phys+Biol+Sci%22%5BJournal%5D)">How many hair follicles are innervated by one afferent axon? A confocal microscopic analysis of palisade endings in the auricular skin of thy1-YFP transgenic mouse.</a> Proc Jpn Acad Ser B Phys Biol Sci. 88 (10), 582-595 (2012).</li>
<li>Luo, W., Enomoto, H., Rice, F. L., Milbrandt, J., Ginty, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+identification+of+rapidly+adapting+mechanoreceptors+and+their+developmental+dependence+on+Ret+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Molecular identification of rapidly adapting mechanoreceptors and their developmental dependence on Ret signaling.</a> Neuron. 64 (6), 841-856 (2009).</li>
<li>Neubarth, N. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Meissner+corpuscles+and+their+spatially+intermingled+afferents+underlie+gentle+touch+perception%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Meissner corpuscles and their spatially intermingled afferents underlie gentle touch perception.</a> Science. 368 (6497), eabb2751(2020).</li>
<li>Bai, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+Identification+of+an+Expansive+Mechanoreceptor+Sensitive+to+Skin+Stroking%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Genetic Identification of an Expansive Mechanoreceptor Sensitive to Skin Stroking.</a> Cell. 163 (7), 1783-1795 (2015).</li>
<li>Griffin, J. W., Thompson, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biology+and+pathology+of+nonmyelinating+Schwann+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Glia%22%5BJournal%5D)">Biology and pathology of nonmyelinating Schwann cells.</a> Glia. 56 (14), 1518-1531 (2008).</li>
<li>Tsai, P. F., Chou, F. P., Yu, T. S., Lee, H. J., Chiu, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Depilatory+creams+increase+the+number+of+hair+follicles%2C+and+dermal+fibroblasts+expressing+interleukin-6%2C+tumor+necrosis+factor-%CE%B1%2C+and+tumor+necrosis+factor-%CE%B2+in+mouse+skin%5BTitle%5D)+AND+%22Korean+J+Physiol+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Depilatory creams increase the number of hair follicles, and dermal fibroblasts expressing interleukin-6, tumor necrosis factor-α, and tumor necrosis factor-β in mouse skin.</a> Korean J Physiol Pharmacol. 25 (6), 497-506 (2021).</li>
<li>Bourane, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low-threshold+mechanoreceptor+subtypes+selectively+express+MafA+and+are+specified+by+Ret+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Low-threshold mechanoreceptor subtypes selectively express MafA and are specified by Ret signaling.</a> Neuron. 64 (6), 857-870 (2009).</li>
<li>Jung, Y., Ng, J. H., Keating, C. P., Senthil-Kumar, P., Zhao, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comprehensive+evaluation+of+peripheral+nerve+regeneration+in+the+acute+healing+phase+using+tissue+clearing+and+optical+microscopy+in+a+rodent+model%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Comprehensive evaluation of peripheral nerve regeneration in the acute healing phase using tissue clearing and optical microscopy in a rodent model.</a> PLoS One. 9 (4), e94054(2014).</li>
<li>Gangadharan, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuropathic+pain+caused+by+miswiring+and+abnormal+end+organ+targeting%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Neuropathic pain caused by miswiring and abnormal end organ targeting.</a> Nature. 606 (7912), 137-145 (2022).</li>
<li>Huang, S., Rompolas, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two-photon+microscopy+for+intracutaneous+imaging+of+stem+cell+activity+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Two-photon microscopy for intracutaneous imaging of stem cell activity in mice.</a> Exp Dermatol. 26 (5), 379-383 (2017).</li>
<li>Meleshina, A. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multimodal+label-free+imaging+of+living+dermal+equivalents+including+dermal+papilla+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">Multimodal label-free imaging of living dermal equivalents including dermal papilla cells.</a> Stem Cell Res Ther. 9 (1), 84(2018).</li>
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<table><tbody><tr><td>対物レンズ20倍およびスーパーNA 1.0</td><td>オリンポス</td><td>1-U2B965</td><td>二光子顕微鏡装置</td></tr><tr><td>22x60 カバースリップ</td><td>VWR</td><td>16004-330</td><td>二光子顕微鏡装置</td></tr><tr><td>空気硬化モデリングクレイ</td><td>DAS</td><td></td><td>二光子顕微鏡装置</td></tr><tr><td>麻酔用エアポンプ(HF)、110V</td><td>RWDライフサイエンス社</td><td>R510-30</td><td>イソフルラン系</td></tr><tr><td>麻酔同心マスク</td><td>RWDライフサイエンス社</td><td>R510-M</td><td>イソフルラン系</td></tr><tr><td>麻酔誘導室およびndash;マウスとラット</td><td>RWDライフサイエンス社</td><td>V105</td><td>イソフルラン系</td></tr><tr><td>Bruker Ultima Investigator Plus レーザー走査顕微鏡</td><td>ブルーカー・ナノ社およびnbsp;</td><td></td><td>二光子顕微鏡装置</td></tr><tr><td>バタフライニードルズ</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>1484041</td><td>二光子顕微鏡装置</td></tr><tr><td>カメレオン・ディスカバリーNXとTPC:デュアル</td><td>一貫性</td><td>1385777</td><td>二光子顕微鏡装置</td></tr><tr><td>新生児マウス用のチューブ付きコーンマスク</td><td>RWDライフサイエンス社</td><td>68680</td><td>イソフルラン系</td></tr><tr><td>デュアルエミッションフィルター(et525/70mおよびet595/50m)およびt565lpxr&nbsp;二色性ビームスプリッター</td><td>ニコン</td><td>INVP-01</td><td>二光子顕微鏡装置</td></tr><tr><td>エピ蛍光フィルターセットET-GFP ET470/40xおよびET252/50m;二色性T495LPXR&nbsp;</td><td>ニコン</td><td>518065</td><td>二光子顕微鏡装置</td></tr><tr><td>エタノール</td><td>デコン・ラボラトリーズ社</td><td></td><td>二光子顕微鏡装置</td></tr><tr><td>遠赤外線ウォーミングパッドとコントローラー(交流電源)</td><td>ケント・サイエンティフィック</td><td>RT-0515</td><td>二光子顕微鏡装置</td></tr><tr><td>GaAsp 検出器(2)&nbsp;</td><td>浜松フォトニクス&nbsp;</td><td>HED-UP-2&nbsp;</td><td>二光子顕微鏡装置</td></tr><tr><td>ガスフィルターキャニスター</td><td>RWDライフサイエンス社</td><td>R510-31-6</td><td>イソフルラン系</td></tr><tr><td>高真空グリース</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>Z273554</td><td>イメージングシステム</td></tr><tr><td>イソフルラン、USP(250 mL)</td><td>ピラマル集中治療</td><td>6679-017-25</td><td>イソフルラン系</td></tr><tr><td>レーザーカバーボックス&nbsp;</td><td>テコ・テクノロジー</td><td></td><td>イメージングシステム</td></tr><tr><td>マウス:B6.129S6(cg)-ntrk2tm3.1(cre/ERT2)Ddg/J</td><td>ジャックス</td><td>27214</td><td></td></tr><tr><td>マウス:B6。Cg-Igs7tm140.1(tetO-EGFP,CAG-tTA2)Hze/J</td><td>ジャックス</td><td>30220</td><td></td></tr><tr><td>マウス:B6。Cg-Tg(Thy1-YFP)16Jrs/J</td><td>チャールズ川</td><td>3709</td><td></td></tr><tr><td>ナイア ヘアリムーバークリーム</td><td>アマゾン</td><td>28001</td><td>二光子顕微鏡装置</td></tr><tr><td>生データファイル</td><td>ゼノド</td><td></td><td>10.5281/zenodo.17370834</td></tr><tr><td>大型の長方形インサートホルダーを備えたリジッドスタンド</td><td>ソーラブ</td><td>MP15M</td><td>二光子顕微鏡装置</td></tr><tr><td>小動物麻酔手術プラットフォーム</td><td>RWDライフサイエンス社</td><td>R510-PGL</td><td>イソフルラン系</td></tr><tr><td>ソーズ潤滑眼軟膏</td><td>バウシュ+ロンブ</td><td></td><td>二光子顕微鏡装置</td></tr><tr><td>スーパーフロストプラス顕微鏡スライド</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>12-550-15</td><td>二光子顕微鏡装置</td></tr></tbody></table>

マウス皮膚における触覚感覚軸索形態のバイタル2光子イメージング

Intravital Two-Photon Imaging of Touch Sensory Axon Morphology in Mouse Skin

本研究では、発生過程および成人における皮膚のAβ、RA-LTMR、Aδ-LTMR軸索構造を観察するために二光子顕微鏡を用いました。成熟した披針状末端は、出生後20日目以降のマウスで完全に発達しています19,32。成マウスの有毛皮膚における軸索末端の全体的な組織が画像化されており、最大強度投影図(図2A)に示されています。これらの軸索末端の深さと形状は、AβフィールドLTMR、Aβ RA-LTMR、そして未確認のAβサブタイプ軸索を含む三次元再構成で確認できます(映画1)。このイメージング領域において、毛包は自己蛍光によって識別できます(図2A)。針状の毛根は、ガードおよびアウル/オーケネ毛包の周囲に15.8本の毛毛密度で視覚化でき、さらに高解像度で画像化できます(図2B,D)。個々のAβ ...

Low-threshold mechanoreceptors (LTMRs) are somatosensory neurons that detect innocuous light touch stimuli such as vibration, hair deflection, and ...

intravital-two-photon-imaging-touch-sensory-axon-morphology-mouse

Research

JoVE Journal

Neuroscience

神経科学

根切断術後の後根の軸索のライブイメージング

出典: Mizuno, H., et al. In Vivo 新生児マウスの皮質ニューロンの2光子イメージング J. Vis. Exp.

マウスの子犬の神経形態をイメージングするための2光子顕微鏡法

痛みを伴う神経障害（PN）における侵害受容性表皮内神経線維（IENFs）の変化を調べるために、我々が直接侵害受容IENFsで観察された三次元形態学的変化を調べることができるプロトコルを開発した。...

人間の皮膚生検における侵害受容性表皮内神経線維の三次元イメージング

動的な縦イメージングレポータートランスジェニックマウスにおける神経終末の選択的レーザ病変のためのプロトコルが提供される。...

皮膚における単一神経終末のin vivo二光子顕微鏡で

生きている動物のTime-lapse imaging...

二光子<em&gt; in vivoで</em&gt;間引き頭蓋骨の準備を使用して、マウス皮質における樹状突起棘のイメージング

このような毛包と神経終末など -   - 空間構成の特徴的なパターンを示す哺乳動物の皮膚は、構造体の多様な配列が含まれています。フラットマウントとして皮膚を分析して皮膚構造の全層の高解像度画像を生成するためにこの組織の2次元形状を利用する。...

マウス皮膚や毛包パターニングおよび感覚軸索形態の解析への応用のフラットマウントイメージング

二光子生体内イメージングは、背柱外傷性脊髄挫傷を負った骨髄キメラ動物の天然組織環境における脊髄の異なる細胞タイプ間の相互作用を調査するために使用することができます。...

マウス背側列のクラッシュ損傷におけるミクログリアおよびマクロファージと軸索の相互作用の生体内イメージング

このビデオは、Thy1-GFPトランスジェニックラインのin vivo...

同時2光子<em&gt;インビボ</emマウス脳梁膨大後部皮質におけるシナプス入力とシナプス後ターゲットの&gt;イメージング

ガラスマイクロピペットと高速2光子ハイパースタックイメージング法を用いて最適化された局所突出手順を提示し、毛細血管の直径変化の精密な測定と3次元での調節の調査を可能にします。...

ガラスマイクロピペットを用いて局所ATP吐出による血管応答を研究する生体内3次元2光子顕微鏡検査

形態学的変化は、活性化後の免疫応答性線維芽細胞で起こり、細胞募集の変化を促進する。遺伝子組み換え線維芽細胞特異的タンパク質1(FSP1)-creと組み合わせて2光子イメージングを利用する。tdTomatoフロキセドストップフロキシング(TB/TB)マウスラインと緑色蛍光タグ付きリポ多糖-FITCは、真皮線維芽細胞におけるリポ多糖類の非常に特異的な取り込みおよび生体内の形態変化を示すことができる。...

皮膚における遺伝的にタグ付けされたレポーター細胞の生体内2色2光子イメージング

学ぶマウス皮膚におけるバイタル2光子イメージングを用いた低閾値機械受容器軸索終末の可視化法。この手法により、生体内での感覚回路構造と機能の発達研究が可能となる。

マウス皮膚における触覚感覚軸索形態のバイタル2光子イメージング

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