Name: ヒト頸部オルガノイドの生成と遺伝的操作 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-03-10T13:20:00.000+00:00
Duration: 10 min 29 s
Description: 学ぶ ヒト頸部オルガノイドの樹立と遺伝的操作法。酵素処理による上皮細胞分離、マトリックス内培養、siRNAによるヌクレオフェクションを用いて、子宮頸部幹細胞生物学と病態メカニズムを研究する強力なプラットフォームを構築します。

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<ol><li>Singh, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+estimates+of+incidence+and+mortality+of+cervical+cancer+in+2020%3Aa+baseline+analysis+of+the+WHO+Global+Cervical+Cancer+Elimination+Initiative%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Glob+Health%22%5BJournal%5D)">Global estimates of incidence and mortality of cervical cancer in 2020:a baseline analysis of the WHO Global Cervical Cancer Elimination Initiative.</a> Lancet Glob Health. 11 (2), e197-e206 (2023).</li>
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<li>Myeong, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microbial+metabolites+control+self-renewal+and+precancerous+progression+of+human+cervical+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Microbial metabolites control self-renewal and precancerous progression of human cervical stem cells.</a> Nat Commun. 16 (1), 2327(2025).</li>
<li>Rock, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Basal+cells+as+stem+cells+of+the+mouse+trachea+and+human+airway+epithelium%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Basal cells as stem cells of the mouse trachea and human airway epithelium.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 106 (31), 12771-12775 (2009).</li>
<li>Rajkumar, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+ubiquitin-specific+protease+11+mitigates+pulmonary+fibrosis+in+human+pluripotent+stem+cell-derived+alveolar+organoids%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Loss of ubiquitin-specific protease 11 mitigates pulmonary fibrosis in human pluripotent stem cell-derived alveolar organoids.</a> Int J Stem Cells. 18 (2), 205-213 (2025).</li>
<li>Ko, K. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Key+genetic+determinants+driving+esophageal+squamous+cell+carcinoma+initiation+and+immune+evasion%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">Key genetic determinants driving esophageal squamous cell carcinoma initiation and immune evasion.</a> Gastroenterol. 165 (3), 613-628 (2023).</li>
<li>Choi, Y. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((YAP1+regulates+esophageal+stem+cells%27+self-renewal+and+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Res+Commun%22%5BJournal%5D)">YAP1 regulates esophageal stem cells' self-renewal and differentiation.</a> Biochem Biophys Res Commun. 726, 150280(2024).</li>
<li>Oh, B., Kim, J., Kim, N., Jeong, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+cancer+organoid+system+to+evaluate+the+cytotoxicity+of+natural+killer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Lung cancer organoid system to evaluate the cytotoxicity of natural killer cells.</a> Int J Stem Cells. 18 (1), 99-106 (2025).</li>
<li>Han, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synergistic+drug+combinations+for+cancer+identified+in+a+CRISPR+screen+for+pairwise+genetic+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Synergistic drug combinations for cancer identified in a CRISPR screen for pairwise genetic interactions.</a> Nat Biotechnol. 35 (5), 463-474 (2017).</li>
<li>Jeong, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+KEAP1%2FNFE2L2+mutations+in+the+chemotherapeutic+response+of+patients+with+non-small+cell+lung+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Role of KEAP1/NFE2L2 mutations in the chemotherapeutic response of patients with non-small cell lung cancer.</a> Clin Cancer Res. 26 (1), 274-281 (2020).</li>
<li>Zhang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetically+defined%2C+syngeneic+organoid+platform+for+developing+combination+therapies+for+ovarian+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discov%22%5BJournal%5D)">Genetically defined, syngeneic organoid platform for developing combination therapies for ovarian cancer.</a> Cancer Discov. 11 (2), 362-383 (2021).</li>
<li>Lohmussaar, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+organoids+model+cervical+tissue+dynamics+and+viral+oncogenesis+in+cervical+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Patient-derived organoids model cervical tissue dynamics and viral oncogenesis in cervical cancer.</a> Cell Stem Cell. 28 (8), 1380-1396 (2021).</li>
<li>Chumduri, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Opposing+Wnt+signals+regulate+cervical+squamocolumnar+homeostasis+and+emergence+of+metaplasia%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Opposing Wnt signals regulate cervical squamocolumnar homeostasis and emergence of metaplasia.</a> Nat Cell Biol. 23 (2), 184-197 (2021).</li>
<li>He, X. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PTEN-deficient+intestinal+stem+cells+initiate+intestinal+polyposis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Genet%22%5BJournal%5D)">PTEN-deficient intestinal stem cells initiate intestinal polyposis.</a> Nat Genet. 39 (2), 189-198 (2007).</li>
<li>Wang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pten+deletion+leads+to+the+expansion+of+a+prostatic+stem%2Fprogenitor+cell+subpopulation+and+tumor+initiation%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Pten deletion leads to the expansion of a prostatic stem/progenitor cell subpopulation and tumor initiation.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 103 (5), 1480-1485 (2006).</li>
<li>Yanagi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pten+controls+lung+morphogenesis%2C+bronchioalveolar+stem+cells%2C+and+onset+of+lung+adenocarcinomas+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Pten controls lung morphogenesis, bronchioalveolar stem cells, and onset of lung adenocarcinomas in mice.</a> J Clin Invest. 117 (10), 2929-2940 (2007).</li>
<li>Jeong, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+KEAP1%2FNRF2+and+TP53+mutations+in+lung+squamous+cell+carcinoma+development+and+radiation+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discov%22%5BJournal%5D)">Role of KEAP1/NRF2 and TP53 mutations in lung squamous cell carcinoma development and radiation resistance.</a> Cancer Discov. 7 (1), 86-101 (2017).</li>
<li>Liu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+dissection+of+cellular+and+molecular+features+underlying+human+cervical+squamous+cell+carcinoma+initiation+and+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Adv%22%5BJournal%5D)">Single-cell dissection of cellular and molecular features underlying human cervical squamous cell carcinoma initiation and progression.</a> Sci Adv. 9 (4), eadd8977(2023).</li>
<li>Koster, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modelling+Chlamydia+and+HPV+co-infection+in+patient-derived+ectocervix+organoids+reveals+distinct+cellular+reprogramming%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Modelling Chlamydia and HPV co-infection in patient-derived ectocervix organoids reveals distinct cellular reprogramming.</a> Nat Commun. 13 (1), 1030(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>P4一次細胞4D-ヌクレオフェクターXキット</td><td>ロンザ</td><td>V4XP-4032</td><td></td></tr><tr><td>96ウェル超低アタッチメントプレート</td><td>SPL</td><td>39796</td><td></td></tr><tr><td>セルストレーナー40 &マイクロ;m</td><td>SPL</td><td>93040</td><td></td></tr><tr><td>50mL円錐形チューブ 500/箱</td><td>SLP</td><td>SPL50050</td><td></td></tr><tr><td>15ml円錐管</td><td>サーステット</td><td>62.554.502</td><td></td></tr><tr><td>クライオピュアチューブ 1.8mL - 白色</td><td>サーステット</td><td>72.379P</td><td></td></tr><tr><td>37 & deg;C、5%のCO2およびnbsp;インキュベーター</td><td>エッペンドルフ</td><td>9734IQ905476</td><td></td></tr><tr><td>細胞培養挿入</td><td>SPL</td><td>37024</td><td></td></tr><tr><td>Amaxa 4D-核核法器</td><td>ロンザ</td><td>AAF-1003X</td><td></td></tr><tr><td>ブロッキングバッファ(DPBSのBCS2%)</td><td>Gibco / ウェルゲン</td><td>BCS:26010074;DPBS: LB001-02</td><td></td></tr><tr><td>ディスパーズII粉末</td><td>ギブコ</td><td>17105041</td><td></td></tr><tr><td>DNAse I</td><td>酵素学</td><td>M059L</td><td></td></tr><tr><td>マトリゲル</td><td>コーニング</td><td>356231</td><td></td></tr><tr><td>赤血球溶解バッファー</td><td>ビオセサン</td><td>R2015</td><td></td></tr><tr><td>TrypLEエクスプレス</td><td>ギブコ</td><td>12605</td><td></td></tr><tr><td>ウォッシュバッファー(HBSS)</td><td>JBI</td><td>BL003-1</td><td></td></tr><tr><td>高度なDMEM/F12</td><td>ギブコ</td><td>12634028</td><td></td></tr><tr><td>グルタMAXサプリメント</td><td>ギブコ</td><td>35050-061</td><td></td></tr><tr><td>ペニシリン&ナッシュ;ストレプトマイシン</td><td>バイオウエスト</td><td>L0022-100</td><td></td></tr><tr><td>ヘペス</td><td>ギブコ</td><td>15630-080</td><td></td></tr><tr><td>B27サプリメント</td><td>ギブコ</td><td>17504044</td><td></td></tr><tr><td>ノギン</td><td>ペプロテック</td><td>118214</td><td></td></tr><tr><td>N-アセチル-L-システイン</td><td>シグマ</td><td>A9165</td><td></td></tr><tr><td>Y-27632</td><td>STEMCELL テクノロジーズ</td><td>72307</td><td></td></tr><tr><td>FGF2</td><td>ペプロテック</td><td>100-18B-50UG</td><td></td></tr><tr><td>FGF7</td><td>ペプロテック</td><td>AF-100-19-250UG</td><td></td></tr><tr><td>A83-01</td><td>セレックケム</td><td>S7692&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>フォルスコリン</td><td>シグマ</td><td>F6886</td><td></td></tr><tr><td>ニューレグリン1</td><td>ペプロテック</td><td>100-03-50UG</td><td></td></tr><tr><td>NGF</td><td>ペプロテック</td><td>AF-450-01-100UG</td><td></td></tr><tr><td>R-スポンディン</td><td>シノバイオロジー</td><td>11083-HNAS</td><td></td></tr><tr><td>HGF</td><td>ペプロテック</td><td>100-39H-250ug</td><td></td></tr><tr><td>FGF10</td><td>ペプロテック</td><td>100-26</td><td></td></tr><tr><td>ペトリディッシュ 35 mm&nbsp;</td><td>SPL</td><td>10035</td><td></td></tr><tr><td><ストロング>オルガノイドメディアレシピ<ストロング></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Name</td><td>Company</td><td><ストロング>カタログ番号</ストロング></td><td><強力>集中力<強力></td></tr><tr><td>高度なDMEM/F12</td><td>ギブコ</td><td>12634028</td><td></td></tr><tr><td>グルタMAXサプリメント</td><td>ギブコ</td><td>35050-061</td><td>1回</td></tr><tr><td>ペニシリン&ナッシュ;ストレプトマイシン</td><td>バイオウエスト</td><td>L0022-100</td><td>1回</td></tr><tr><td>ヘペス</td><td>ギブコ</td><td>15630-080</td><td>10 mM</td></tr><tr><td>B27サプリメント</td><td>ギブコ</td><td>17504044</td><td>ビタミンAなし 1回</td></tr><tr><td>ノギン</td><td>ペプロテック</td><td>118214</td><td>100 ng/ml</td></tr><tr><td>N-アセチル-L-システイン</td><td>シグマ</td><td>A9165</td><td>1 mM</td></tr><tr><td>Y-27632</td><td>STEMCELL テクノロジーズ</td><td>72307</td><td>10 uM</td></tr><tr><td>FGF2</td><td>ペプロテック</td><td>100-18B-50UG</td><td>50 ng/ml</td></tr><tr><td>FGF7</td><td>ペプロテック</td><td>AF-100-19-250UG</td><td>25 ng/ml</td></tr><tr><td>FGF10</td><td>ペプロテック</td><td>100-26</td><td>100 ng/ml</td></tr><tr><td>A83-01</td><td>セレックケム</td><td>S7692&nbsp;</td><td>500 nM</td></tr><tr><td>フォルスコリン</td><td>シグマ</td><td>F6886</td><td>10 & mu;M</td></tr><tr><td>ニューレグリン1</td><td>ペプロテック</td><td>100-03-50UG</td><td>50 ng/ml</td></tr><tr><td>NGF</td><td>ペプロテック</td><td>AF-450-01-100UG</td><td>20 ng/ml</td></tr><tr><td>R-スポンディン</td><td>シノバイオロジー</td><td>11083-HNAS</td><td>100 ng/ml</td></tr><tr><td>HGF</td><td>ペプロテック</td><td>100-39H-250ug</td><td>25 ng/ml</td></tr></tbody></table>

ヒト頸部オルガノイドの生成と遺伝的操作

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Cervical cancer is the fourth most common cancer in women and most frequently affects the uterine ectocervix. The uterine ectocervix is lined by ...

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Medicine

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神経上皮組織の前例のない複雑さのために、人間の脳の発達をモデル化することが妨げられてきました。ここでは、ヒトの脳発生の初期のイベントを明らかにし、in...

初期の神経発達障害をモデル化するためのiPSC由来のヒト脳オルガノイドの生成

標準化され、再現性のある前脳型人間から脳オルガノイドの生成誘導多能性幹細胞

上皮細胞と間質細胞からなるヒト原発性子宮内膜オルガノイドを生成し、天然子宮内膜組織の特性を保持するプロトコルが提示される。このプロトコルは、子宮組織獲得から子宮内膜オルガノイドの組織処理までの方法を記述する。...

多細胞ヒト初等子宮内膜オルガノイドの生成

このプロトコルは腸のオルガノイドに人間の多能性セルの微分を可能にする。プロトコルは決定的な内胚葉、hindgutの内胚葉および次に腸の上皮の人口にセルを分化することによって正常な人間の開発をまねる。これにより、このプロトコルは、腸の発達と疾患モデリングアプリケーションの両方の研究に適しています。...

iPS細胞由来腸オルガノイドの作製による発生・疾患モデリングへの応用

我々は、新皮質発生の2Dおよび3Dヒト人工多能性幹細胞(hIPSC)ベースのモデルの生成および特性評価のための詳細なプロトコル、ならびに初代繊毛(PC)生合成および機能の定性的および定量的分析を可能にする補完的方法論を提示する。...

2Dおよび3Dヒト人工多能性幹細胞ベースのモデルにより、新皮質発生中の原発性繊毛の関与を解剖

ここでは、ヒト多能性幹細胞由来の小腸オルガノイドおよび結腸オルガノイドを作製、維持、および特性評価するための詳細な方法について説明します。これらの方法は、オルガノイドのプレーティングと継代に必要な作業時間を短縮し、再現性を向上させ、スケーラビリティを拡大するように設計されています。...

ヒト多能性幹細胞由来腸管オルガノイドおよび結腸オルガノイドの作製、維持、および特性評価

脳オルガノイドは、臓器の発達とヒトの疾患病理を研究するための前例のない機会を提供します。脳オルガノイド培養系では大きな成功を収めていますが、この技術を適用するには運用上の困難が依然としてあります。本プロトコールは、培地交換およびオルガノイド移動を容易にする大脳オルガノイド手順を記述する。...

横方向ソフトライト照明 による 大脳オルガノイド培養の促進

霊長類の大脳オルガノイドのエレクトロポレーションは、霊長類(病原)生理学的新皮質の発生に近いモデルシステムにおいて、異なる前駆細胞タイプおよびニューロンに一過性の遺伝子改変を導入するための正確かつ効率的なアプローチを提供します。これにより、神経発達および進化過程の研究が可能になり、疾患モデリングにも適用できます。...

霊長類脳オルガノイドの遺伝子改変のための標的マイクロインジェクションとエレクトロポレーション

ここでは、ラット腸管オルガノイドを作製し、いくつかのダウンストリームアプリケーションで使用するためのプロトコルを紹介します。ラットはしばしば好ましい前臨床モデルであり、堅牢な腸オルガノイド系は、in vivo研究に付随するin...

ラット腸管オルガノイドの作製と操作

このプロトコールは、ヒト多能性幹細胞を使用して血管オルガノイドを生成する方法を示します。...

ヒト人工多能性幹細胞からの血管オルガノイド作製

学ぶ ヒト頸部オルガノイドの樹立と遺伝的操作法。酵素処理による上皮細胞分離、マトリックス内培養、siRNAによるヌクレオフェクションを用いて、子宮頸部幹細胞生物学と病態メカニズムを研究する強力なプラットフォームを構築します。

ヒト頸部オルガノイドの生成と遺伝的操作

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