Name: 経皮カプサイシン送達および脂肪組織還元のためのα-ラクトアルブミンナノミセルを充填した溶解可能なマイクロニードルパッチの製作 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-12-30T14:03:00.000+00:00
Duration: 6 min 33 s
Description: 学ぶ、α-ラクトアルブミンナノミセルを充填した溶解性マイクロニードルパッチの製作法。カプサイシンの経皮送達と脂肪組織還元をマウスモデルで評価し、肥満治療への応用可能性を示す革新的なドラッグデリバリーシステムです。

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</ol>

<table><tbody><tr><td>3T3-L1前細胞</td><td>ATCC</td><td>CL-173</td><td>脂肪形成研究のための細胞株</td></tr><tr><td>バチルス・リケニフォーム・プロテアーゼ(BLP)</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>P5380</td><td>&α;-ラクトアルブミンの酵素的加水分解</td></tr><tr><td>カプサイシン(&ge;98%)</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>M2028</td><td>カプセル化する有効化合物</td></tr><tr><td>遠心分離機(&ge;4000 rpm)</td><td>エッペンドルフ</td><td>5810R</td><td>型を詰めるために</td></tr><tr><td>共焦点レーザー走査顕微鏡(CLSM)</td><td>ツァイス</td><td>LSM 900</td><td>ミセルの分布と浸透を可視化するために</td></tr><tr><td>Cy3蛍光染料</td><td>GEヘルスケア</td><td>PA23001</td><td>ナノミセルの標識化のために</td></tr><tr><td>Cy5またはCy7蛍光染料</td><td>ファンボ生化学、北京、中国</td><td>該当なし</td><td>バイオディストリビューションイメージング用</td></tr><tr><td>ダルベッコ改良イーグルs中型(DMEM)</td><td>Gibco(サーモ・フィッシャー・サイエンティフィック)</td><td>11965-092</td><td>細胞培養用</td></tr><tr><td>エタノール(&ge;99.7%)</td><td>シノファーム化学試薬</td><td>100092683</td><td>カプサイシンの溶媒</td></tr><tr><td>胎児用牛血清(FBS)</td><td>Gibco(サーモ・フィッシャー・サイエンティフィック)</td><td>16000-044</td><td>細胞培養用</td></tr><tr><td>高脂肪食(60% kcal脂肪、D12492)</td><td>リサーチダイエット、アメリカ</td><td>D12492</td><td>マウスに肥満を誘発するために</td></tr><tr><td>ヒアルロン酸 (HA、Mw 100&ndash;300 kDa)</td><td>アラジン生化学技術株式会社、中国</td><td>H108124</td><td>マイクロニードル製造用のポリマー</td></tr><tr><td>イソフルラン</td><td>RWD、中国</td><td>R510-22-10</td><td>麻酔</td></tr><tr><td>代謝ケージシステム</td><td>パンラブ、アメリカ</td><td>該当なし</td><td>活動量、酸素消費量、RQの評価</td></tr><tr><td>ミリQ 脱イオン水</td><td>ミリポール</td><td>該当なし</td><td>溶媒</td></tr><tr><td>MRIシステム</td><td>ニウマグ、中国</td><td>メソQMR23-060H-I</td><td>脂肪・赤身の体組成を測定するために</td></tr><tr><td>PDMSマイクロニードル型(10 & times; 10, 600 & mu;身長はm)</td><td>ブルーエーカー技術かカスタムか</td><td>該当なし</td><td>マイクロニードル製造</td></tr><tr><td>ペニシリン&ナッシュ;ストレプトマイシン</td><td>Gibco(サーモ・フィッシャー・サイエンティフィック)</td><td>15140-122</td><td>細胞培養用</td></tr><tr><td>リン酸緩衝塩水 &nbsp;(PBS、pH 7.4)</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>10010023</td><td>in vitroおよびin vivo試験のバッファー</td></tr><tr><td>ポリビニルアルコール (PVA、Mw 30&ndash;70 kDa)</td><td>アラジン生化学技術株式会社、中国</td><td>P109389</td><td>マイクロニードル製造用のポリマー</td></tr><tr><td>走査型電子顕微鏡(SEM)</td><td>FEIテクナイ</td><td>G2 F30</td><td>マイクロニードルの形態を特徴づけるために</td></tr><tr><td>テクスチャアナライザー</td><td>BosinTech、上海、中国</td><td>ありがとう。XTC-20</td><td>マイクロニードルの強度をテストするために</td></tr><tr><td>トリパンブルー溶液(0.4%)</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>15250061</td><td>マイクロニードル挿入部位の可視化</td></tr><tr><td>UV&ndash;可視分光光度計</td><td>パーキンエルマー</td><td>ラムダ35</td><td>薬物放出アッセイ</td></tr><tr><td>真空オーブン/乾燥機</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>該当なし</td><td>マイクロニードルを乾かすために</td></tr><tr><td>ウェスタンブロッティング装置</td><td>バイオ・ラッド</td><td>ミニプロテアン・テトラ</td><td>タンパク質解析</td></tr><tr><td>&α;-ラクトアルブミン(&ge;95%)</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>L6010</td><td>ナノミセル形成のためのタンパク質源</td></tr></tbody></table>

経皮カプサイシン送達および脂肪組織還元のためのα-ラクトアルブミンナノミセルを充填した溶解可能なマイクロニードルパッチの製作

Fabrication of Dissolvable Microneedle Patches Loaded with &#945;-Lactalbumin Nanomicelles for Transdermal Capsaicin Delivery and Adipose Tissue Reduction

This protocol outlines the fabrication and application of dissolvable microneedle (MN) patches containing &#945;-lactalbumin nanomicelles for the targeted ...

私たちの研究は、脂肪減少のためにカプサイシンナノミセルを経皮送達するための溶解可能なマイクロニードルパッチの開発に関わっています。この分野の最近の進展には、痛みのない代謝制御のためのマイクロニードルを用いた経皮送達の急速な進展が含まれます。まず、アルファラクトアルブミンを脱イオン水に6ミリグラム/ミリリットルの濃度で溶かします。pHを7.4に調整し、磁気攪拌器で8〜28gの溶液をかき混ぜてタンパク質が完全に溶けるまで加熱します。次に、酵素と基質の比率を1対100で溶液にバチルス・リケニフォルミス・プロテアーゼを加えます。酵素の均一な分布を確保するために、優しく混ぜてください。混合物を50度Cで30分間培養し、両親性ペプチドを生成します。酵素反応を終わらせるために溶液を95度まで5分間加熱します。溶液を室温まで冷却した後、0.22マイクロメートルの膜を通してろ過します。次に、カプサイシンをエタノールに溶けて1ミリグラム/ミリリットルの濃度にします。次に、カプサイシン溶液をペプチド溶液に滴りずつ加え、優しくかき混ぜます。混合物を2時間かき混ぜ続けて、ナノミセルの自己組織化を促します。遊離カプサイシンを除去するには、混合物を脱イオン水に対して12時間透析し、4時間ごとに水を交換します。その後、準備済みのα-ラクトアルブミンナノミセルをフリーズドライします。溶けたマイクロニードルパッチを作るには、5%のヒアルロン酸と5%のポリビニルアルコールを60度摂氏の脱イオン水に溶かします。溶液が透明になるまでかき混ぜます。次に、冷却液とカプサイシン満載ナノミセルを4対1の比率で混ぜます。次に、真空ポンプに接続された乾燥機で約マイナス80キロパスカルの圧力で10分間、混合気を脱ガスします。脱ガス混合物200マイクロリットルを、高さ600マイクロメートルの10×10マイクロニードルアレイを含むポリジメチルシロキサン型に装填します。その後、1,800gの液体で室温で10分間遠心分離し、マイクロニードルの空洞を完全に満たします。型に詰めて再度遠心分離した後、室温で約マイナス80キロパスカルの真空で12時間乾燥させます。次に、マイクロニードルパッチを型から慎重に剥がします。生体内挿入および溶解試験を行うには、麻酔マウスの鼠径部に除毛クリームを塗布します。その後、クリームを拭き取り、肌をきれいにします。マイクロニードルパッチを鼠径部脂肪パッドの上の皮膚に当て、30分間その接触を保ちます。次にパッチを外し、マイクロニードル溶解を点検します。透過電子顕微鏡では均一に分散した球状のα-ラクトアルブミンナノミセルが確認されました。カプサイシンの負荷により平均直径は約22ナノメートルから30ナノメートルに増加しました。共焦点レーザー走査顕微鏡では、3T3-L1の脂肪前部位によるCy3標識ナノミセル

fabrication-dissolvable-microneedle-patches-loaded-with-lactalbumin

Research

JoVE Journal

Biochemistry

生物化学

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準備とシリアルフェムト秒結晶学のための脂質立方相におけるタンパク質微結晶の配達

このプロトコールは、正常飼料（NCD）または高脂肪食（HFD）+カプサイシン摂食野生型マウスから得られた鼠径脂肪パッドにおける基礎およびフォルスコリン刺激脂肪分解を決定する方法を記載する。脂肪分解の指標として、鼠径脂肪パッドからグリセロール放出を測定した。...

腹腔脂肪脂肪パッドにおける基礎およびフォルスコリン刺激脂質測定の測定

ヒト僧帽弁のタンパク質組成は、未分化であり、その分析は細胞密度が低く、したがって低タンパク質生合成によって複雑であるため、まだ未知である。この研究は、僧帽弁プロテオームの分析のためにタンパク質を効率的に抽出するためのプロトコールを提供する。...

ヒト僧帽弁からのタンパク質抽出のための最適化プロトコル

本稿の目的は、マウスから異なる白色脂肪組織を収集、脂肪質のサンプルを処理および RNA...

マウス脂肪組織の採取と RNA 解析のための処理

学ぶ、α-ラクトアルブミンナノミセルを充填した溶解性マイクロニードルパッチの製作法。カプサイシンの経皮送達と脂肪組織還元をマウスモデルで評価し、肥満治療への応用可能性を示す革新的なドラッグデリバリーシステムです。

経皮カプサイシン送達および脂肪組織還元のためのα-ラクトアルブミンナノミセルを充填した溶解可能なマイクロニードルパッチの製作

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