Name: 新生マウスの子マウスにおける口腔ガベージと、使用チャンバーを用いた腸のバリア健全性の機能評価 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-01-09T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 18 s
Description: 学ぶ新生マウスの腸バリア機能評価法。口腔ガベージとUssingチャンバーを用いて、FITC-デキストランとHRPによる透過性測定を行い、微小RNAなどの分子が早期腸バリアに与える影響を正確に評価できます。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Di Vincenzo, F., Del Gaudio, A., Petito, V., Lopetuso, L. R., Scaldaferri, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gut+microbiota%2C+intestinal+permeability%2C+and+systemic+inflammation%3A+A+narrative+review%5BTitle%5D)+AND+%22Intern+Emerg+Med%22%5BJournal%5D)">Gut microbiota, intestinal permeability, and systemic inflammation: A narrative review.</a> Intern Emerg Med. 19 (2), 275-293 (2024).</li>
<li>Mu, Q., Kirby, J., Reilly, C. M., Luo, X. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leaky+gut+as+a+danger+signal+for+autoimmune+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Leaky gut as a danger signal for autoimmune diseases.</a> Front Immunol. 8, 598(2017).</li>
<li>Sorini, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+gut+barrier+integrity+triggers+activation+of+islet-reactive+T+cells+and+autoimmune+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Loss of gut barrier integrity triggers activation of islet-reactive T cells and autoimmune diabetes.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 116 (30), 15140-15149 (2019).</li>
<li>An, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+intestinal+mucosal+barrier+in+autoimmune+disease%3A+a+potential+target%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">The role of intestinal mucosal barrier in autoimmune disease: a potential target.</a> Front Immunol. 13, 871713(2022).</li>
<li>Picco, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+gut+permeability+in+juvenile+chronic+arthritides%3A+a+multivariate+analysis+of+the+diagnostic+parameters%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Exp+Rheumatol%22%5BJournal%5D)">Increased gut permeability in juvenile chronic arthritides: a multivariate analysis of the diagnostic parameters.</a> Clin Exp Rheumatol. 18 (6), 773-778 (2000).</li>
<li>Dunleavy, K. A., Raffals, L. E., Camilleri, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intestinal+barrier+dysfunction+in+inflammatory+bowel+disease%3A+underpinning+pathogenesis+and+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Dig+Dis+Sci%22%5BJournal%5D)">Intestinal barrier dysfunction in inflammatory bowel disease: underpinning pathogenesis and therapeutics.</a> Dig Dis Sci. 68 (12), 4306-4320 (2023).</li>
<li>Borrego-Ruiz, A., Borrego, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early-life+gut+microbiome+development+and+its+potential+long-term+impact+on+health+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiome+Res+Rep%22%5BJournal%5D)">Early-life gut microbiome development and its potential long-term impact on health outcomes.</a> Microbiome Res Rep. 4 (2), 20(2025).</li>
<li>Di Costanzo, M., De Paulis, N., Biasucci, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Butyrate%3A+A+link+between+early+life+nutrition+and+gut+microbiome+in+the+development+of+food+allergy%5BTitle%5D)+AND+%22Life+%28Basel%29%22%5BJournal%5D)">Butyrate: A link between early life nutrition and gut microbiome in the development of food allergy.</a> Life (Basel). 11 (5), 384(2021).</li>
<li>Kindgren, E., Ahrens, A. P., Triplett, E. W., Ludvigsson, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Infant+gut+microbiota+and+environment+associate+with+juvenile+idiopathic+arthritis+many+years+prior+to+disease+onset%2C+especially+in+genetically+vulnerable+children%5BTitle%5D)+AND+%22eBioMedicine%22%5BJournal%5D)">Infant gut microbiota and environment associate with juvenile idiopathic arthritis many years prior to disease onset, especially in genetically vulnerable children.</a> eBioMedicine. 93, 104654(2023).</li>
<li>Borowitz, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+epidemiology+of+inflammatory+bowel+disease%3A+clues+to+pathogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Pediatr%22%5BJournal%5D)">The epidemiology of inflammatory bowel disease: clues to pathogenesis.</a> Front Pediatr. 10, 1103713(2023).</li>
<li>Leete, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+age+on+the+progression+and+severity+of+type+1+diabetes%3A+potential+effects+on+disease+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Diab+Rep%22%5BJournal%5D)">The effect of age on the progression and severity of type 1 diabetes: potential effects on disease mechanisms.</a> Curr Diab Rep. 18 (11), 115(2018).</li>
<li>Francis, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Probiotic+studies+in+neonatal+mice+using+gavage%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Probiotic studies in neonatal mice using gavage.</a> J Vis Exp. (143), e59074(2019).</li>
<li>McClain, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neonatal+mouse+model%3A+review+of+methods+and+results%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+Pathol%22%5BJournal%5D)">Neonatal mouse model: review of methods and results.</a> Toxicol Pathol. 29 (Suppl), 128-137 (2001).</li>
<li>Thomson, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Ussing+chamber+system+for+measuring+intestinal+permeability+in+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">The Ussing chamber system for measuring intestinal permeability in health and disease.</a> BMC Gastroenterol. 19, 98(2019).</li>
<li>Clarke, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+guide+to+Ussing+chamber+studies+of+mouse+intestine%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Gastrointest+Liver+Physiol%22%5BJournal%5D)">A guide to Ussing chamber studies of mouse intestine.</a> Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 296 (6), G1151-G1166 (2009).</li>
<li>Westerhout, J., Wortelboer, H., Verhoeckx, K. Ussing chamber. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWesterhout%2C+J+%22The+Impact+of+Food+Bioactives+on+Health%3A+in+vitro+and+ex+vivo+models%22">The Impact of Food Bioactives on Health: in vitro and ex vivo models</a>. , (2015).</li>
<li>Hempstock, W., Ishizuka, N., Hayashi, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+assessment+of+intestinal+tight+junction+barrier+and+ion+permeability+in+native+tissue+by+Ussing+chamber+technique%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Functional assessment of intestinal tight junction barrier and ion permeability in native tissue by Ussing chamber technique.</a> J Vis Exp. (171), e62468(2021).</li>
<li>Sjögren, E., Eriksson, J., Vedin, C., Breitholtz, K., Hilgendorf, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Excised+segments+of+rat+small+intestine+in+Ussing+chamber+studies%3A+A+comparison+of+native+and+stripped+tissue+viability+and+permeability+to+drugs%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Pharm%22%5BJournal%5D)">Excised segments of rat small intestine in Ussing chamber studies: A comparison of native and stripped tissue viability and permeability to drugs.</a> Int J Pharm. 505 (1), 361-368 (2016).</li>
<li>Moussaoui, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+intestinal+glucocorticoid+sensitivity+in+early+life+shape+the+risk+of+epithelial+barrier+defect+in+maternal-deprived+rats%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Changes in intestinal glucocorticoid sensitivity in early life shape the risk of epithelial barrier defect in maternal-deprived rats.</a> PLoS One. 9 (2), e88382(2014).</li>
<li>Gleeson, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+enhanced+intestinal+permeability+of+infant+mice+enables+oral+protein+and+macromolecular+absorption+without+delivery+technology%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Pharm%22%5BJournal%5D)">The enhanced intestinal permeability of infant mice enables oral protein and macromolecular absorption without delivery technology.</a> Int J Pharm. 593, 120120(2021).</li>
<li>Birchenough, G. M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postnatal+development+of+the+small+intestinal+mucosa+drives+age-dependent%2C+regio-selective+susceptibility+to+Escherichia+coli+K1+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Postnatal development of the small intestinal mucosa drives age-dependent, regio-selective susceptibility to Escherichia coli K1 infection.</a> Sci Rep. 7 (1), 83(2017).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>10本のDPB(キャラ&カレッジなし)MG</td><td>ダルベッコス</td><td>14200091</td><td></td></tr><tr><td>抗HRP抗体</td><td>ノルディック・バイオサイト</td><td>GTX10183</td><td>モノクローナルマウスホースラディッシュペルオキシダーゼ IgG [2H11]</td></tr><tr><td>双眼鏡ルーペ</td><td>オリンパス&nbsp;</td><td>SZ61</td><td>仕様書は不要です。</td></tr><tr><td>黒の96ウェルプレート平底</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>137101</td><td>プレートは黒色で、蛍光測定に適応していなければなりません。読書中は蓋を外さなければなりません。</td></tr><tr><td>BSA</td><td>メルク</td><td>A4503</td><td></td></tr><tr><td>C57BL/6Jマウス</td><td>チャールズ川</td><td>632C57BL/6J&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>CaCl2</td><td>メルク</td><td>2382</td><td></td></tr><tr><td>クリア96ウェルクリアフラットボトムハイバイディング</td><td>コーニング</td><td>9018</td><td></td></tr><tr><td>D-(+)-グルコース</td><td>メルク</td><td>G8270&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>蒸留水2O</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>D-マンニトール</td><td>メルク</td><td>M4125</td><td></td></tr><tr><td>細かい鉗子</td><td>FST</td><td>11445-12</td><td></td></tr><tr><td>ファインシザーズ</td><td>FST</td><td>14058-09</td><td></td></tr><tr><td>FITC-デクストロン4Kd</td><td>FD4</td><td>TdBラボ</td><td>光劣化に敏感です。</td></tr><tr><td>ヒートパッド</td><td>ミネルヴェ</td><td>20 031 01</td><td></td></tr><tr><td>HRP</td><td>メルク</td><td>P8375</td><td></td></tr><tr><td>MgCl2、6H2O</td><td>メルク</td><td>M2670&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Milli-Q H2O</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>P2300 イージーマウント 使用システム&議場</td><td>生理学的器具</td><td>EM6-C-CE</td><td>システム、チャンバー、スライダーはすべて互換性が必要です。</td></tr><tr><td>P2306 ユーシングチャンバースライダー</td><td>生理学的器具</td><td>PI-P2306</td><td>スライダーのモデルは、サイズや組織の種類によって異なる種類があります。</td></tr><tr><td>QuantaBlu フルオロゲンペルオキシダーゼ基質キット</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>15169</td><td></td></tr><tr><td>再利用可能な丸い先端の給餌針</td><td>FST</td><td>18061-24</td><td>24ゲージ、先端径1.25mm、丸型先端。使用前に滅菌水、エタノール70%で洗い、高湯消毒が必要です。</td></tr><tr><td>重炭酸ナトリウム</td><td>メルク</td><td>S6297</td><td></td></tr><tr><td>炭酸ナトリウム</td><td>メルク</td><td>S7795</td><td></td></tr><tr><td>分光光度計</td><td>TECAN&nbsp;</td><td>スパーク10M</td><td>137101黒いプレートを使用する場合は、トップ取得付きのプレートリーダーが必要です。</td></tr><tr><td>トゥイーン-20</td><td>メルク</td><td>P7949</td><td></td></tr></tbody></table>

新生マウスの子マウスにおける口腔ガベージと、使用チャンバーを用いた腸のバリア健全性の機能評価

Oral Gavage in Neonatal Mouse Pups and Functional Assessment of Gut Barrier Integrity Using Ussing Chambers

標準曲線と井戸濃度の定量化 板の各井戸からブランクの平均値を差し引いた。吸光度はY軸、濃度はX軸に、GraphPad Prismの「標準曲線補間」関数を使って標準曲線が作成されました。すべての標準点が揃っていれば、「線」モデルが最も良い結果をもたらします。あるいは、「シグモイド、4 PL、Xは集中」モデルは非線形標準曲線補間において非常に柔軟性と正確性を提供します(図6)。Y軸のサンプルの吸収度値は標準値の下に貼り付けられ、結果タブ(図6)の「補間されたX平均値」から濃度を復元しました。
<img alt="図6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69751/69751fig6v2.jpg" data-altupdatedat="1778562059000" data-alt="Figure 6...

Growing evidence underscores the importance of the first 1,000 days of life in shaping the gut-microbiome axis. This early-life window is critical in the ...

oral-gavage-neonatal-mouse-pups-functional-assessment-gut-barrier

Research

JoVE Journal

Biology

生物学

術後イレウス（POI）が増加し、罹患率および長期の入院期間につながる腹部手術の合併症である。予防的または治療的戦略が激化研究を欠いているので必要です。そこで我々は、POIの病態生理を調査し、潜在的な治療の選択肢を研究するために標準化され、実行可能なマウスモデルを確立した。...

げっ歯類における腸運動と腸壁の炎症の機能評価：腸管操作の標準化されたモデルで分析

このプロトコルは、腸バリア機能のex...

ex vivoで腸嚢は、胃腸疾患のモデルに粘膜透過性を評価するために

強制経口投与を用いた新生児マウスにおけるプロバイオティクス研究

生体内顕微鏡を利用して、ここで提示される方法は、生きている動物の腸上皮細胞脱落のリアルタイム視覚化を可能にする。従って、麻酔化マウスの局所染色された腸粘膜(アクリフラビン及びローダミンB-デキストラン)は、共焦点顕微鏡を用いて単細胞分解能まで画像化される。...

腸透過性と上皮細胞流れ性能を評価する生体内顕微鏡ベースのアプローチ

調節不整合な腸上皮バリア機能および免疫応答は、生理学的モデルの欠如のために十分に調査されていない炎症性腸疾患の特徴である。ここでは、生体内での粘膜透過性および白血球の採用を研究するために、十分に血管化され、外装された腸セグメントを採用したマウス腸管ループモデルについて述べている。...

標準化腸ループモデルを用いたマウスにおける腸透過性と好中球経上皮移動の機能評価

腸上皮は、栄養素の吸収だけでなく、有害物質に対する保護も与えます。頂端 -...

ウッシングチャンバー技術による在来組織における腸タイトジャンクションバリアとイオン透過性の機能評価

壊死性腸炎(NEC)は、未熟児、特に超低出生体重児にしばしば発生する最も重篤な胃腸(GI)疾患であり、死亡率が高く、病因が不明である。NECの原因は、炎症性免疫調節系の異常に関係している可能性があります。NECの動物モデルは、NECの疾患免疫研究に欠かせないツールです。NECの動物モデルは通常、C57BL/6J新生児マウスを使用します。BALB/c新生児マウスはめったに使用されません。関連する研究は、マウスが感染すると、C57BL/6Jマウスと比較して、THB細胞分化がBALB/cマウスにおいて優勢であることを示した。研究によると、NECの発生と発達はTヘルパー2型(Th2)細胞の増加と関連しており、一般に感染を伴うことが示唆されています。そこで本研究では、新生児BALB/cマウスを用いて、NEC小児と同様の臨床特性と腸管病理学的変化を有するNECモデルを誘導した。この動物モデルがNECにおけるTh2細胞応答を研究するために使用できるかどうかを判断するために、さらなる研究が保証されている。...

壊死性腸炎の新生児BALB/cマウスモデル

小腸がさまざまなサイズの微粒子をどのように処理するかを研究するために、私たちは確立された in vivo...

管腔微粒子のマウス小腸メカノセンシングの研究

本研究では、フルオレセインイソチオシアネート標識(FITC)デキストラン を経口強制 投与してマウスに投与し、 in vivo...

フルオレセインイソチオシアネート標識デキストランを用いたマウスの腸バリア完全性の評価

このプロトコルは、壊死性腸炎(NEC)の新生児マウスモデルと、その後の新生児マウス小腸からの固有層免疫細胞の単離の概要を説明します。...

壊死性小腸炎の新生児マウスモデルと免疫細胞プロファイリングのためのLamina Propria分離

このプロトコルの目的は、異なる分子サイズの蛍光標識デキストトランスを歯 肉表面に局所的に塗布し、その後単一光子顕微鏡システムを用いて 体外 画像を施すことで、マウスの歯肉上皮上皮障壁の完全性を定量的に評価する標準化されたアプローチを提供することです。...

蛍光トレーサーを用いたマウスの歯肉上皮障壁の機能評価

学ぶ新生マウスの腸バリア機能評価法。口腔ガベージとUssingチャンバーを用いて、FITC-デキストランとHRPによる透過性測定を行い、微小RNAなどの分子が早期腸バリアに与える影響を正確に評価できます。

新生マウスの子マウスにおける口腔ガベージと、使用チャンバーを用いた腸のバリア健全性の機能評価

さらに動画を探す