Name: 中和抗体価測定のための肝炎Eウイルス蛍光減少中和検査 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-05-22T13:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 58 s
Description: 学ぶ 肝炎Eウイルス（HEV）に対する中和抗体価測定法。蛍光減少中和検査（FRNT）を用いてNT50を算出し、ワクチン候補や治療用抗体の効価評価を支援します。Huh7細胞を使用した免疫蛍光法による定量的解析手法です。

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<ol><li>Smith, D. B., et al. International Committee on Taxonomy of Viruses Hepeviridae Study Group. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Consensus+proposals+for+classification+of+the+family+Hepeviridae%5BTitle%5D)+AND+%22J+Gen+Virol%22%5BJournal%5D)">Consensus proposals for classification of the family Hepeviridae.</a> J Gen Virol. 95 (Pt 10), 2223-2232 (2014).</li>
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<li>Nimgaonkar, I., Ding, Q., Schwartz, R. E., Ploss, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hepatitis+E+virus%3A+Advances+and+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Gastroenterol+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Hepatitis E virus: Advances and challenges.</a> Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 15 (2), 96-110 (2018).</li>
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<li>Songtanin, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hepatitis+E+virus+infections%3A+Epidemiology%2C+genetic+diversity%2C+and+clinical+considerations%5BTitle%5D)+AND+%22Viruses%22%5BJournal%5D)">Hepatitis E virus infections: Epidemiology, genetic diversity, and clinical considerations.</a> Viruses. 15 (6), 1389(2023).</li>
<li>Lee, G. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+infection+with+camelid+hepatitis+E+virus+in+a+liver+transplant+recipient+who+regularly+consumes+camel+meat+and+milk%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Chronic infection with camelid hepatitis E virus in a liver transplant recipient who regularly consumes camel meat and milk.</a> Gastroenterology. 150 (2), 355-357 (2016).</li>
<li>Zhou, Z., Xie, Y., Wu, C., Nan, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+hepatitis+E+virus+open+reading+frame+2+protein%3A+Beyond+viral+capsid%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Microbiol%22%5BJournal%5D)">The hepatitis E virus open reading frame 2 protein: Beyond viral capsid.</a> Front Microbiol. 12, 739124(2021).</li>
<li>Nair, V. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endoplasmic+reticulum+stress+induced+synthesis+of+a+novel+viral+factor+mediates+efficient+replication+of+genotype-1+hepatitis+E+virus%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">Endoplasmic reticulum stress induced synthesis of a novel viral factor mediates efficient replication of genotype-1 hepatitis E virus.</a> PLoS Pathog. 12 (4), e1005521(2016).</li>
<li>Meister, T. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+culture+systems+for+the+study+of+hepatitis+E+virus%5BTitle%5D)+AND+%22Antiviral+Res%22%5BJournal%5D)">Cell culture systems for the study of hepatitis E virus.</a> Antiviral Res. 163, 34-49 (2019).</li>
<li>Fu, R. M., Decker, C. C., Dao Thi, V. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+culture+models+for+hepatitis+E+virus%5BTitle%5D)+AND+%22Viruses%22%5BJournal%5D)">Cell culture models for hepatitis E virus.</a> Viruses. 11 (7), 608(2019).</li>
<li>Kaushik, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zinc+salts+block+hepatitis+E+virus+replication+by+inhibiting+the+activity+of+viral+RNA-dependent+RNA+polymerase%5BTitle%5D)+AND+%22J+Virol%22%5BJournal%5D)">Zinc salts block hepatitis E virus replication by inhibiting the activity of viral RNA-dependent RNA polymerase.</a> J Virol. 91 (21), 10-1128 (2017).</li>
<li>Gupta, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antiviral+activity+of+zinc+oxide+nanoparticles+and+tetrapods+against+the+Hepatitis+E+and+Hepatitis+C+viruses%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Antiviral activity of zinc oxide nanoparticles and tetrapods against the Hepatitis E and Hepatitis C viruses.</a> Front Microbiol. 13, 881595(2022).</li>
<li>Ansari, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Network+controllability+analysis+reveals+the+antiviral+potential+of+Etravirine+against+hepatitis+E+virus+infection%5BTitle%5D)+AND+%22mSystems%22%5BJournal%5D)">Network controllability analysis reveals the antiviral potential of Etravirine against hepatitis E virus infection.</a> mSystems. 10 (9), e00438-25(2025).</li>
<li>Gremmel, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hepatitis+E+virus+neutralization+by+porcine+serum+antibodies%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Hepatitis E virus neutralization by porcine serum antibodies.</a> J Clin Microbiol. 61 (11), e00373-23(2023).</li>
<li>Cai, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+high-throughput+neutralizing+assay+for+antibodies+and+sera+against+hepatitis+E+virus%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">A high-throughput neutralizing assay for antibodies and sera against hepatitis E virus.</a> Sci Rep. 6 (1), 25141(2016).</li>
<li>Liu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+optimized+high-throughput+neutralization+assay+for+hepatitis+E+virus+%28HEV%29+involving+detection+of+secreted+Porf2%5BTitle%5D)+AND+%22Viruses%22%5BJournal%5D)">An optimized high-throughput neutralization assay for hepatitis E virus (HEV) involving detection of secreted Porf2.</a> Viruses. 11 (1), 64(2019).</li>
<li>Meng, J., Dubreuil, P., Pillot, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+PCR-based+seroneutralization+assay+in+cell+culture+for+diagnosis+of+hepatitis+E%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Microbiol%22%5BJournal%5D)">A new PCR-based seroneutralization assay in cell culture for diagnosis of hepatitis E.</a> J Clin Microbiol. 35 (6), 1373-1377 (1997).</li>
<li>Emerson, S. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Putative+neutralization+epitopes+and+broad+cross-genotype+neutralization+of+Hepatitis+E+virus+confirmed+by+a+quantitative+cell-culture+assay%5BTitle%5D)+AND+%22J+Gen+Virol%22%5BJournal%5D)">Putative neutralization epitopes and broad cross-genotype neutralization of Hepatitis E virus confirmed by a quantitative cell-culture assay.</a> J Gen Virol. 87 (3), 697-704 (2006).</li>
<li>Deshmukh, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunogenicity+of+candidate+hepatitis+E+virus+DNA+vaccine+expressing+complete+and+truncated+ORF2+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Vaccine%22%5BJournal%5D)">Immunogenicity of candidate hepatitis E virus DNA vaccine expressing complete and truncated ORF2 in mice.</a> Vaccine. 25 (22), 4350-4360 (2007).</li>
<li>Gupta, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression%2C+purification+and+characterization+of+the+hepatitis+E+virus+like-particles+in+the+Pichia+pastoris%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Expression, purification and characterization of the hepatitis E virus like-particles in the Pichia pastoris.</a> Front Microbiol. 11, 141(2020).</li>
<li>Guo, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescence+Reduction+Neutralization+Test%3A+A+novel%2C+rapid%2C+and+efficient+method+for+characterizing+the+neutralizing+activity+of+antibodies+against+dengue+virus%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Issues+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Fluorescence Reduction Neutralization Test: A novel, rapid, and efficient method for characterizing the neutralizing activity of antibodies against dengue virus.</a> Curr Issues Mol Biol. 47 (3), 140(2025).</li>
<li>Bewley, K. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+SARS-CoV-2+neutralizing+antibody+by+wild-type+plaque+reduction+neutralization%2C+microneutralization+and+pseudotyped+virus+neutralization+assays%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Quantification of SARS-CoV-2 neutralizing antibody by wild-type plaque reduction neutralization, microneutralization and pseudotyped virus neutralization assays.</a> Nat Protoc. 16 (6), 3114-3140 (2021).</li>
<li>Islam, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutralizing+antibodies+against+the+Japanese+encephalitis+virus+are+produced+by+a+12%C3%A1kDa+E+coli+expressed+envelope+protein+domain+III+%28EDIII%29+tagged+with+a+solubility-controlling+peptide%5BTitle%5D)+AND+%22Vaccine%22%5BJournal%5D)">Neutralizing antibodies against the Japanese encephalitis virus are produced by a 12ákDa E coli expressed envelope protein domain III (EDIII) tagged with a solubility-controlling peptide.</a> Vaccine. 56, 127143(2025).</li>
</ol>

```html
<table><tbody><tr><td>1.5 mL microfuge tubes</td><td>Axygen</td><td>MCT-150-C</td><td></td></tr><tr><td>12-well cell culture dish</td><td>Corning</td><td>3512</td><td></td></tr><tr><td>37 degree incubator shaker</td><td>Thermo Scientific</td><td>50163013</td><td></td></tr><tr><td>4&prime;,6-diamidino-2-phenylindole</td><td>Abcam</td><td>AB104139</td><td>DAPI</td></tr><tr><td>50mL centrifuge tube</td><td>Falcon</td><td>352070</td><td></td></tr><tr><td>6-well cell culture dish</td><td>Corning</td><td>3516</td><td></td></tr><tr><td>Alexa flour 594 secondary IgG Antibody</td><td>Thermo Scientific</td><td>A-11012</td><td></td></tr><tr><td>Anti-ORF2 antibody</td><td>Genscript</td><td>NA</td><td>Genscriptで合成され、当社の研究室で特性が確認されています14</td></tr><tr><td>Anti-rabbit IgG antibody</td><td>Genscript</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Bovine Serum Albumin</td><td>HIMEDIA</td><td>MB083</td><td>BSA</td></tr><tr><td>Confocal microscope</td><td>Olympus</td><td>FV3000</td><td></td></tr><tr><td>DMEM, high glucose</td><td>HIMEDIA</td><td>AL007A</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Bovine Serum</td><td>GIBCO</td><td>16000-044</td><td>FBS</td></tr><tr><td>ImageJ 1.54g</td><td>ImageJ.org (Wayne Rasband and contributors, NIH, USA)</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Normal Goat Serum</td><td>HIMEDIA</td><td>RM-10701</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldehyde</td><td>HIMEDIA</td><td>GRN3660</td><td>PFA</td></tr><tr><td>Phosphate Buffer Saline pH 7.4</td><td>HIMEDIA</td><td>TL1006</td><td>PBS</td></tr><tr><td>Polyethyleneglycol 6000</td><td>SIGMA</td><td>81255</td><td>PEG6000</td></tr><tr><td>SOLIScript 1-step Probe Kit</td><td>SOLIS BIODYNE</td><td>08-57-00250</td><td></td></tr><tr><td>TRI reagent</td><td>Molecular Research Centre</td><td>TR118</td><td></td></tr><tr><td>Triton X100</td><td>SIGMA</td><td>X100</td><td></td></tr><tr><td>Trypsin-EDTA</td><td>GIBCO</td><td>25300-54</td><td></td></tr></tbody></table>
```

中和抗体価測定のための肝炎eウイルス蛍光減少中和検査

Hepatitis E Virus Fluorescence Reduction Neutralization Test for Measuring Neutralizing Antibody Titers

中和抗体価測定のための肝炎Eウイルス蛍光減少中和検査

Virus neutralization assay measures the neutralization potential of an antibody or a mixture of antibodies against the corresponding virus. It is a ...

hepatitis-e-virus-fluorescence-reduction-neutralization-test-for

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Immunology and Infection

免疫学と感染症

このビデオは、ヒト血清中のα2,6結合シアル酸を過剰発現するMadin-Darby Canine Kidney...

ヒト血清中の中和抗体価を測定するためのマイクロ中和アッセイ

このビデオは、血清サンプル中のインフルエンザノイラミニダーゼ(NA)阻害抗体価を測定するアッセイを示しています。NAに対する抗体を含む血清サンプルをフェチュイン被覆マイクロウェルプレートに加えます。ウイルスを添加すると、抗体はウイルスNAがフェチュインを切断してガラクトース部分を露出するのを防ぎます。次に、ペルオキシダーゼ結合レクチンを添加し、露出したガラクトースに結合します。NA阻害抗体価は、ペルオキシダーゼ基質が固定化されたレクチン結合ペルオキシダーゼによって切断されて発色する比色試験を用いて決定されます。...

インフルエンザノイラミニダーゼ阻害抗体価測定法

このビデオは、ヒトサイトメガロウイルス(HCMV)の中和を測定するために設計された免疫蛍光アッセイを示しています。ウイルス特異的抗体をウイルスと混合し、ヒト線維芽細胞とインキュベートします。抗体はウイルスを中和して宿主細胞に感染できなくしますが、中和されていないウイルスは細胞に感染します。インキュベーション後、中和の程度は、免疫蛍光法を用いてウイルス感染細胞を定量することによって決定されます。...

ヒトサイトメガロウイルスの中和を測定するための免疫蛍光法

このビデオでは、SARS-CoV-2ウイルスの中和における血清の有効性を測定する中和アッセイを紹介しています。これには、偽型ウイルス、血清希釈、および発光ベースの定量が含まれ、中和力価が明らかになります。...

機能性SARS-CoV-2中和抗体の評価

血清中のインフルエンザノイラミニダーゼ(NA)阻害抗体価を測定するための酵素結合レクチンアッセイ(ELLA)について説明します。このアッセイでは、ピーナッツ凝集素を使用して、フェチュインコーティングされた96ウェルプレートからNAがシアル酸を除去したときにアクセス可能になるガラクトース残基を定量します。...

酵素結合レクチンアッセイによってインフルエンザノイラミニダーゼ阻害抗体価を測定します

この研究は説明します ウイルス間の抗原性の関係を分析するための画像化ベースのマイクロ中和アッセイ。プロトコルは、フラットベッドスキャナを使用し、滴定、滴定の定量、中和、及び中和定量を含む4つのステップがあります。アッセイは、現在の循環インフルエンザA（H1N1）pdm09、A（H3N2）、およびB型ウイルスでうまく動作します。...

定量的マイクロ中和アッセイの最適化

エスケープ中和抗体でインフルエンザ ウイルスの亜種の世代

インフルエンザ中和抗体は、インフルエンザ感染症の保護と関連付けてください。中和血清中和抗体価の測定し、インフルエンザのひと血清にしばしば使用します。次のインフルエンザの予防接種や感染症現代 3C.2a 3C.3a a (h3n2) ウイルス中和抗体価を測定する SIAT1 MDCK...

試金を使用して SIAT1 MDCK 細胞のインフルエンザ a (h3n2) ウイルス中和によるひと血清中の抗体を中和することを測定

中和抗体や血清や脳脊髄液 (CSF) など、行列の人間の酵素補充療法の細胞内取り込みを妨げるその他の要因を検出する細胞ベースのフロー...

細胞に基づく試金の酵素補充療法の細胞内取り込みを中和する抗体の検出

ここで説明するE型肝炎ウイルス(HEV)の高ウイルス力価株を生成し、肝細胞を効率的に感染させる方法について説明する。提示された方法により、非エンベロープのウイルス粒子と同様に、様々な細胞株を接種するために収穫および使用することができる。...

高力子型E型肝炎ウイルス株を生産するための細胞培養モデル

ここでは、偽ウイルスパッケージングのプロトコルと抗体中和活性の測定について述べる。...

リン酸カルシウムトランスフェクション法を用いた擬似型H5鳥インフルエンザウイルスの作製と抗体中和活性の測定

学ぶ 肝炎Eウイルス（HEV）に対する中和抗体価測定法。蛍光減少中和検査（FRNT）を用いてNT50を算出し、ワクチン候補や治療用抗体の効価評価を支援します。Huh7細胞を使用した免疫蛍光法による定量的解析手法です。

中和抗体価測定のための肝炎Eウイルス蛍光減少中和検査

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