Name: 新生マウスからの血管条線の一次境界細胞の単離および培養 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-03-20T13:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 27 s
Description: 学ぶ新生マウス血管条線一次境界細胞の単離培養法。酵素処理と差分培養で高純度細胞を樹立し、酸化ストレスや細胞老化のin vitroモデル構築に応用可能。聴力障害の病態解明と治療開発に有用です。

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<ol><li>Raphael, Y., Altschuler, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+and+innervation+of+the+cochlea%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res+Bull%22%5BJournal%5D)">Structure and innervation of the cochlea.</a> Brain Res Bull. 60 (5-6), 397-422 (2003).</li>
<li>Bovee, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+stria+vascularis%3A+Renewed+attention+on+a+key+player+in+age-related+hearing+loss%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">The stria vascularis: Renewed attention on a key player in age-related hearing loss.</a> Int J Mol Sci. 25 (10), 5391(2024).</li>
<li>Schulte, B. A., Schmiedt, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lateral+wall+Na%2CK-ATPase+and+endocochlear+potentials+decline+with+age+in+quiet-reared+gerbils%5BTitle%5D)+AND+%22Hear+Res%22%5BJournal%5D)">Lateral wall Na,K-ATPase and endocochlear potentials decline with age in quiet-reared gerbils.</a> Hear Res. 61 (1-2), 35-46 (1992).</li>
<li>Hibino, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+is+the+highly+positive+endocochlear+potential+formed%3F+The+specific+architecture+of+the+stria+vascularis+and+the+roles+of+the+ion-transport+apparatus%5BTitle%5D)+AND+%22Pflugers+Arch%22%5BJournal%5D)">How is the highly positive endocochlear potential formed? The specific architecture of the stria vascularis and the roles of the ion-transport apparatus.</a> Pflugers Arch. 459 (4), 521-533 (2010).</li>
<li>Johns, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+the+stria+vascularis+in+neglected+otologic+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Hear+Res%22%5BJournal%5D)">The role of the stria vascularis in neglected otologic disease.</a> Hear Res. 428, 108682(2023).</li>
<li>Yu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+the+stria+vascularis+in+the+pathogenesis+of+sensorineural+hearing+loss%3A+A+narrative+review%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Role of the stria vascularis in the pathogenesis of sensorineural hearing loss: A narrative review.</a> Front Neurosci. 15, 774585(2021).</li>
<li>Ohlemiller, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+correlates+of+age-related+endocochlear+potential+reduction+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Hear+Res%22%5BJournal%5D)">Cellular correlates of age-related endocochlear potential reduction in a mouse model.</a> Hear Res. 220 (1-2), 10-26 (2006).</li>
<li>Mahendrasingam, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relative+time+course+of+degeneration+of+different+cochlear+structures+in+the+CD%2F1+mouse+model+of+accelerated+aging%5BTitle%5D)+AND+%22J+Assoc+Res+Otolaryngol%22%5BJournal%5D)">Relative time course of degeneration of different cochlear structures in the CD/1 mouse model of accelerated aging.</a> J Assoc Res Otolaryngol. 12 (4), 437-453 (2011).</li>
<li>Lee, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+apoptosis+induced+by+cisplatin+in+marginal+cells+in+mouse+stria+vascularis%5BTitle%5D)+AND+%22ORL+J+Otorhinolaryngol+Relat+Spec%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of apoptosis induced by cisplatin in marginal cells in mouse stria vascularis.</a> ORL J Otorhinolaryngol Relat Spec. 66 (3), 111-118 (2004).</li>
<li>Ohlemiller, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+endocochlear+potential+as+an+indicator+of+reticular+lamina+integrity+after+noise+exposure+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Hear+Res%22%5BJournal%5D)">The endocochlear potential as an indicator of reticular lamina integrity after noise exposure in mice.</a> Hear Res. 361, 138-151 (2018).</li>
<li>Liberman, M. C., Kujawa, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cochlear+synaptopathy+in+acquired+sensorineural+hearing+loss%3A+Manifestations+and+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Hear+Res%22%5BJournal%5D)">Cochlear synaptopathy in acquired sensorineural hearing loss: Manifestations and mechanisms.</a> Hear Res. 349, 138-147 (2017).</li>
<li>Levano, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole+neonatal+cochlear+explants+as+an+in+vitro+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Whole neonatal cochlear explants as an in vitro model.</a> J Vis Exp. (197), e65160(2023).</li>
<li>Wu, K. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+culture+of+primary+cochlear+hair+cells+from+neonatal+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Isolation and culture of primary cochlear hair cells from neonatal mice.</a> J Vis Exp. (199), e65687(2023).</li>
<li>Schmiedt, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+furosemide+applied+chronically+to+the+round+window%3A+A+model+of+metabolic+presbyacusis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Effects of furosemide applied chronically to the round window: A model of metabolic presbyacusis.</a> J Neurosci. 22 (21), 9643-9650 (2002).</li>
<li>Kurata, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histopathologic+evaluation+of+vascular+findings+in+the+cochlea+in+patients+with+presbycusis%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA+Otolaryngol+Head+Neck+Surg%22%5BJournal%5D)">Histopathologic evaluation of vascular findings in the cochlea in patients with presbycusis.</a> JAMA Otolaryngol Head Neck Surg. 142 (2), 173-178 (2016).</li>
<li>Wangemann, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+KCNJ10+protein+expression+abolishes+endocochlear+potential+and+causes+deafness+in+Pendred+syndrome+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Med%22%5BJournal%5D)">Loss of KCNJ10 protein expression abolishes endocochlear potential and causes deafness in Pendred syndrome mouse model.</a> BMC Med. 2, 30(2004).</li>
<li>Ding, L., Wang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((miR-106a+facilitates+the+sensorineural+hearing+loss+induced+by+oxidative+stress+by+targeting+connexin-43%5BTitle%5D)+AND+%22Bioengineered%22%5BJournal%5D)">miR-106a facilitates the sensorineural hearing loss induced by oxidative stress by targeting connexin-43.</a> Bioengineered. 13 (6), 14080-14093 (2022).</li>
<li>Wan, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PARP1+inhibition+prevents+oxidative+stress+in+age-related+hearing+loss+via+PAR-Ca%282%2B%29-AIF+axis+in+cochlear+strial+marginal+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Free+Radic+Biol+Med%22%5BJournal%5D)">PARP1 inhibition prevents oxidative stress in age-related hearing loss via PAR-Ca(2+)-AIF axis in cochlear strial marginal cells.</a> Free Radic Biol Med. 220, 222-235 (2024).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decreased+poly%28ADP-ribose%29+polymerase+1+expression+attenuates+glucose+oxidase-induced+damage+in+rat+cochlear+marginal+strial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Decreased poly(ADP-ribose) polymerase 1 expression attenuates glucose oxidase-induced damage in rat cochlear marginal strial cells.</a> Mol Neurobiol. 53 (9), 5971-5984 (2016).</li>
<li>Fetoni, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathogenesis+of+presbycusis+in+animal+models%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Gerontol%22%5BJournal%5D)">Pathogenesis of presbycusis in animal models: A review.</a> Exp Gerontol. 46 (6), 413-425 (2011).</li>
<li>Marie, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Senescence-accelerated+mouse+prone+8+%28SAMP8%29+as+a+model+of+age-related+hearing+loss%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Lett%22%5BJournal%5D)">Senescence-accelerated mouse prone 8 (SAMP8) as a model of age-related hearing loss.</a> Neurosci Lett. 656, 138-143 (2017).</li>
<li>Li, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+models+in+sensorineural+hearing+loss+research%3A+A+comprehensive+review%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sci%22%5BJournal%5D)">Rodent models in sensorineural hearing loss research: A comprehensive review.</a> Life Sci. 358, 123156(2024).</li>
<li>Bommakanti, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cochlear+histopathology+in+human+genetic+hearing+loss%3A+State+of+the+science+and+future+prospects%5BTitle%5D)+AND+%22Hear+Res%22%5BJournal%5D)">Cochlear histopathology in human genetic hearing loss: State of the science and future prospects.</a> Hear Res. 382, 107785(2019).</li>
<li>Nicolson, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Navigating+hereditary+hearing+loss%3A+Pathology+of+the+inner+ear%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Navigating hereditary hearing loss: Pathology of the inner ear.</a> Front Cell Neurosci. 15, 660812(2021).</li>
<li>Liu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+and+challenges+of+CRISPR-Cas+gene-editing+to+disease+treatment+in+clinics%5BTitle%5D)+AND+%22Precis+Clin+Med%22%5BJournal%5D)">Applications and challenges of CRISPR-Cas gene-editing to disease treatment in clinics.</a> Precis Clin Med. 4 (3), 179-191 (2021).</li>
<li>Guo, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+methods+and+research+progress+of+livestock+and+poultry+immortalized+cell+lines%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Vet+Sci%22%5BJournal%5D)">Establishment methods and research progress of livestock and poultry immortalized cell lines: A review.</a> Front Vet Sci. 9, 956357(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>15 mL遠心分離機チューブ</td><td>サービスバイオ</td><td>EP-1501-J</td><td>文化のための利用</td></tr><tr><td>35mm細胞培養皿</td><td>ネスト</td><td>706001</td><td>解剖に使う</td></tr><tr><td>4% パラホルマルデヒド</td><td>サービスバイオ</td><td>G1101</td><td>免疫蛍光染色</td></tr><tr><td>6井戸プレート</td><td>サービスバイオ</td><td>CCP-6H</td><td>文化のための利用</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488結合ヤギ抗ウサギ抗体</td><td>プロテインテック</td><td>SA00013-2</td><td>免疫蛍光染色</td></tr><tr><td>DAPIを用いたアンチフェードマウントメディウム</td><td>アブシン</td><td>ABS9235</td><td>免疫蛍光染色</td></tr><tr><td>細胞計数キット-8</td><td>ビヨタイム</td><td>C0037</td><td>セルカウントに使用</td></tr><tr><td>コラーゲン酵素タイプII</td><td>バイオシャープ</td><td>BS164</td><td>文化のための利用</td></tr><tr><td>共焦点レーザー走査システム</td><td>オリンパス&nbsp;</td><td>FV1200</td><td>免疫蛍光染色</td></tr><tr><td>DCFH-DA</td><td>インビトロジェン</td><td>C2938</td><td>ROS染色</td></tr><tr><td>D-ガル</td><td>ソーラービオ</td><td>D8310</td><td>セルモデリングに使用</td></tr><tr><td>EpiCM-a メディア</td><td>サイエンスル</td><td>4131</td><td>文化のための利用</td></tr><tr><td>細かい鉗子</td><td>後輪駆動</td><td>F11020-11</td><td>解剖に使う</td></tr><tr><td>ヤギ血清</td><td>ビヨタイム</td><td>C0265</td><td>免疫蛍光染色</td></tr><tr><td>H2O2</td><td>ムクビオ</td><td>MM0707</td><td>セルモデリングに使用</td></tr><tr><td>ハンクのバランスソルトソリューション(HBSS)</td><td>バイオシャープ</td><td>BL561A</td><td>文化のための利用</td></tr><tr><td>イソフルラン</td><td>後輪駆動</td><td>R510-22-10</td><td>解剖に使う</td></tr><tr><td>KCNQ1抗体(G-8)</td><td>サンタクルス</td><td>SC-365186</td><td>免疫蛍光染色</td></tr><tr><td>顕微鏡</td><td>オリンパス&nbsp;</td><td>SZX7-1063</td><td>解剖に使う</td></tr><tr><td>顕微鏡</td><td>オリンパス&nbsp;</td><td>IX71</td><td>免疫蛍光染色の結果の観察に使用されます</td></tr><tr><td>ミトトラッカー レッド CMXRos</td><td>インビトロジェン</td><td>M7512</td><td>ROS染色</td></tr><tr><td>新生マウスの子(P0-P3)</td><td></td><td></td><td>BIONT提供</td></tr><tr><td>PBS</td><td>サービスバイオ</td><td>G4202</td><td>免疫蛍光染色</td></tr><tr><td>ウサギ抗マウスCK18モノクローナル抗体</td><td>プロテインテック</td><td>10830-1-AP</td><td>免疫蛍光染色</td></tr><tr><td>セネセンス&β;-ガラクトシダーゼ染色キット</td><td>ビヨタイム</td><td>C0602</td><td>老化染色</td></tr><tr><td>トライトン X-100</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>X100</td><td>免疫蛍光染色</td></tr></tbody></table>

新生マウスからの血管条線の一次境界細胞の単離および培養

Isolation and Culture of Primary Marginal Cells of the Stria Vascularis from Neonatal Mice

The stria vascularis is a key structure in the inner ear responsible for generating and maintaining the endocochlear potential (EP), and its dysfunction ...

isolation-culture-primary-marginal-cells-stria-vascularis-from

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Neuroscience

神経科学

ここで、我々は、マウス肺内皮細胞の単離と培養のためのプロトコルについて説明します。このメソッドは、メカニックと酵素肺組織の解離と同様に抗PECAM - 1とほとんどが微小血管起源の純粋な内皮細胞集団を生成する磁気ビーズへの結合抗ICAM -...

新生児マウスからの肺血管内皮細胞の単離と培養

初代マウス心筋細胞培養は、筋原線維組織や機能の調査のための極めて重要なツールの一つである。以下のプロトコルは、新生児マウスの心臓から初代心筋細胞の単離および培養について説明します。得られた心筋細胞培養物は、続いて、生体力学的、生化学的および細胞生物学の種々のアッセイに使用することができる。...

新生仔マウス心筋細胞の単離および培養

ミクログリア生物学の成功の調査の一つの鍵は、CNS組織からの単離の間にex vivoでミクログリア免疫機能の維持である。蛍光イメージング、免疫細胞、および炎症誘発性刺激リポ多糖（LPS）とパム3 CSK 4（PAM）を用いたELISA次のミクログリアの活性化によって評価されるように、高純度と免疫機能細胞培養で回転振盪結果を経由してミクログリアを分離する。...

マウス新生児から保護免疫表現と機能皮質ミクログリアの分離

脳微小血管内皮細胞(BMEC)は、血液と中枢神経系(CNS)を分離する高度に制御された障壁を形成する特定の接合タンパク質によって相互接続されています。このプロトコルで述べられているように、初代マウス脳微小血管内皮細胞の単離により、BBBの詳細なin...

初代マウス脳微小血管内皮細胞の単離

上皮ケラチノサイトは、機能的な皮膚バリアを形成し、外部環境傷害に対する宿主防御の最前線に位置付けられる。ここでは、新生児および成体マウスの皮膚からの表皮ケラチノサイトの単離および初代培養、およびケラチノサイトからの最終分化およびUVB誘発性炎症反応の誘導のための方法を記載する。...

新生児および成人マウス皮膚由来の初代マウスケラチノサイトの単離および培養

初代ミクログリア培養は、新しい抗炎症分子を評価するために一般的に使用されます。本プロトコルは、新生児の子犬からミクログリアを磁気的に分離するための再現可能で関連性のある方法を記載しています。...

初代細胞培養のための新生児マウスからのミクログリア細胞の磁気単離

この記事では、新生児マウスから初代肺内皮細胞を単離し、培養しました。...

初代マウス肺内皮細胞の単離

マウス網膜から得られたミュラーグリア初代培養物は、マイクロRNA処理後の網膜前駆細胞へのグリア変換を研究するための非常に堅牢で信頼性の高いツールです。単一分子または組み合わせは、 その後のin vivo...

マイクロRNA処理後のマウスミュラーグリアの再生可能性を研究するための初代細胞培養

脈管筋は内蝸牛電位の生成に不可欠です。ここでは、単核シーケンシングまたは免疫染色のための成体マウス脈条血管の解剖を紹介します。...

単核シーケンシングまたは免疫染色のための成体マウス脈条血管の解剖

この原稿では、マウスの眼から網膜グリアMüller細胞を単離するための詳細なプロトコルについて説明しています。プロトコールは、マウスの眼の除核と解剖から始まり、続いてMüller細胞の単離、播種、および培養が行われます。...

初代マウス網膜グリアミュラー細胞の単離

この記事では、新生児Sprague-Dawley(SD)ラットから初代Retinal...

Sprague-Dawley(SD)ラットからの初代Retinal Müller細胞の単離と培養

学ぶ新生マウス血管条線一次境界細胞の単離培養法。酵素処理と差分培養で高純度細胞を樹立し、酸化ストレスや細胞老化のin vitroモデル構築に応用可能。聴力障害の病態解明と治療開発に有用です。

新生マウスからの血管条線の一次境界細胞の単離および培養

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