Name: 人工飼料の実験を使用してアブラムシにニコチン耐性をテスト (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-05-14T16:17:00.000+00:00
Duration: 6 min 19 s
Description: 学ぶアブラムシのニコチン耐性評価法。タバコ適応系と非適応系の生存率を比較し、植物二次代謝物に対する適応メカニズムを解明します。害虫管理戦略への応用が期待されます。

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この実験では、4つの成人のアブラムシは、小さなプラスチック製のコップで囲まれています。彼らは、カップの上に伸ばしてパラフィルムの2層の間にピペッティング流動食からフィード。 3日間の給餌の後、ニコチンの異なる濃度を含む飼料の毒性は、各カップの大人と幼虫のアブラムシをカウントすることでダイエットを制御するために比較されます。 <ol><li>ショ糖と20種類のアミノ酸を含む溶液を加えます。アブラムシは、少なくとも1週間のために、通常のレベルで再現し、この食事療法で生存することができます。人工飼料用の添付ファイルを参照してください。 </li><li>ニコチンを含む6種類のエッペンドルフチュー​​ブに分注してこの食事療法の1 mLを。 0 -500μMに至るまで、使用されるニコチンの種々の濃度を基準にして、それらにラベルを付けます。 </li><li> 4アブラムシを選択し、赤または緑のどちらか、およびこれらの実験的なカップに入れ。 </li><li>アブラムシを選択する際に、それは彼らが一貫性のある年齢になることが重要です。一般的に、同じような大きさと色（彼らは古い時に赤いアブラムシはさらに暗くなります）のアブラムシを探します。 </li><li>パラフィルムの切れ端でカップをカバー。パラフィルムの2枚の間に食事を囲む。部分的にカップのエッジの周りに第二パラフィルムのレベルを伸ばす。アリコートを液体の層の間の食事、そして最上位のレイヤーを下にシールします。 </li><li>実験用のデータを収集することができる時間の後に3日間長日日長のライトの下で昆虫の部屋に、これらのカップをしてください。 </li></ol>をご覧ください<a href="http://arjournals.annualreviews.org/doi/abs/10.1146/annurev.arplant.59.032607.092825" target="_blank">植物学の年次レビューを</a>昆虫草食にこのプロトコルと植物免疫の詳細については、。

著者に開示すべき事項はありません。

人工飼料の実験を使用してアブラムシにニコチン耐性をテスト

Testing Nicotine Tolerance in Aphids Using an Artificial Diet Experiment

植物は昆虫摂食に応答して、多くの異なるsecondayの代謝産物の産生を亢進することがあります。これらの代謝物の一つ、ニコチンは、よく殺虫特性を有することを知っています。 One草食にタバコの植物の応答、または昆虫によって時に苛まれているが、この神経毒性アルカロイドの生産を増やすことです。ここでは、モモアカアブラムシ、モモアカアブラムシ、のタバコ - 適応歪がではびこるタバコをしないこの昆虫の系統よりもニコチンの高いレベルを許容できるかどうかのこの問題に対処するために実験を設定する方法を紹介しますフィールド。

このビデオとアッセイでテストアブラムシフィールドでタバコをinfests 1つとていない範囲の2つのタイプにニコチンの耐性ことが示されている。

植物は、昆虫による食害に応じて、多くの異なる二次代謝産物の生成をアップレギュレートすることがあります。これらの代謝産物の一つであるニコチンは、十分に……

植物は、昆虫の摂食に応答して、多くの異なる二次代謝産物の産生をアップレギュレートする可能性があります。草食性に対するタバコ植物の1つの反応は、昆虫によって行われていないニコチンを使用して、神経毒性アルカロイドニコチンの生産を増やすことです。例として、アブラムシに対する植物の二次代謝産物の毒性を評価するための実験の設定方法を示します。MiSiS perskyの特定の系統、緑の桃のアブラムシは、栽培されたタバコに特化するように適応しています。ここでは、これらのタバコ適応系統は、非適応系統よりもニコチンに対する抵抗性が増加していると仮定します。こんにちは、私の名前はジョン・ラムゼイです。私は、Bo Thompson Institute for Plant ResearchのGeorge Jander研究室の大学院生です。今日は、アブラムシに対する植物代謝物の毒性を測定する手順をお見せします。この手順は、関心のある植物代謝物が人工飼料を準備することを含む。この場合、ニコチンはさまざまな濃度で追加され、アブラムシをケージに入れ、この食事を食べ、数日後にアブラムシを数えて、ニコチンのさまざまな濃度での生存率と繁殖力を測定します。それでは始めましょう。実験で。アブラムシを人工飼料で飼育し、特殊なSスタイルを植物の血管系に挿入し、フロー樹液の食事を消費する摂食スタイルを利用して、アブラムシを飼育することができます。私たちは、Aが遭遇したのと同様の流動食を準備し、この溶液にショ糖とアミノ酸からなる植物を食べさせました。次に、さまざまな濃度の植物代謝物を追加します。私たちは、この場合はニコチンの毒性をアッセイすることに興味があります。この実験では、4匹の成虫アブラムシを小さなプラスチックカップに閉じ込めます。彼らは、3日後にカップの上部に張られた2つのバイオフィルムの層の間にピペットで移動した液体食から栄養を与えます。異なる濃度のニコチンを含む飼料の摂食毒性は、各カップの成虫と幼虫のアブラムシを数えることにより、対照飼料と比較されます。さて、いよいよ実験的な食事療法を準備する時が来ました。ここにショ糖と20個のアミノ酸の溶液があります。アブラムシは、この食事で少なくとも1週間は正常に生き残り、繁殖することができます。今、私はこの食事療法を1ミリリットルで分注しました、これらのフェンダーチューブにゼロから500マイクロモルまでのニコチンの変種濃度を含むアレックワッツ、次に4つのアブラムシが赤または緑のいずれかを選択し、これらの実験カップに入れられます。絵筆を使ってアブラムシを葉から繊細に持ち上げ、実験用のカップに入れます。アブラムシを選択するときは、同じ一般的なサイズと色の暗いアブラムシを選択することが重要です。たとえば、アブラムシは古くてこの実験に適していない可能性があります。次に、フィムの最初の層をカップの上部に伸ばして、アブラムシを入れます。次に、2つのパラフォーム層の間に100マイクロリットルの液体食を分注し、次に2番目のパラフォーム層をカップの端に固定して伸ばします。実験中に空気の流れが良くなることを確認するために、これらの空気穴を開けました、そして、このカップをこのチューブホルダーに入れて、照明の下での長い一日の写真撮影の下で昆虫室のラックに置きます。そこで、ここでは、先ほど実証した実験と同じように、3日前に設定した実験の結果を見てみましょう。私は、0マイクロモル、10マイクロモル、100マイクロモル、1000マイクロモル、または1ミリモルのニコチンダイエットに、緑と赤のアブラムシのそれぞれを1カップ持っています。そして、あなたはコントロールダイエットゼロマイクロモルニコチンのために、赤と緑のアブラムシの両方が生き残り、繁殖していることがわかります。同様に、10マイクロモルダイエットでは、アカアブラムシの子孫が多数います。まだ緑色の成虫はいますが、子孫はそれほど多くありません。そのため、10マイクロモルという低濃度でもニコチンの影響を感じている可能性があります。ここでは、100マイクロモルのニコチン食に生き残った成体のアオアブラムシはいませんが、アカアブラムシは対照と同じレベルで生存し、繁殖しています。あなたは1000マイクロモルのニコチンを含む食事療法で見ることができます。緑のアブラムシも赤のアブラムシも生き残ることができません。したがって、これに基づいて、赤色のMiSiS系統が野外でタバコに蔓延することを可能にした適応の1つは、ニコチンを解毒する能力の向上である可能性を考えることができます。私たちは、アブラムシに対する植物の二次代謝産物の毒性を測定するために人工飼料を使用する実験を設定する方法を示しました。これらの実験を設定するときは、同じサイズと色であるだけでなく、同様の発達段階にある植物から来た昆虫を選択することを覚えておくことが重要です。というわけで、これだけです。ご覧いただきありがとうございます、そしてあなたの実験に頑張ってください。

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人工飼料の実験を使用してアブラムシにニコチン耐性をテスト

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