Name: 抗菌ペプチドおよびその模倣体の生産と試験 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-04-10T13:08:00.000+00:00
Duration: 10 min 35 s
Description: 学ぶ抗菌ペプチドMel4とペプチド模倣体RK-758の合成、抗菌活性評価、および細胞毒性試験の統合プロトコル。Klebsiella pneumoniaeとEscherichia coliを用いたMIC・MBC測定とL-929細胞を用いたMTTアッセイによる包括的な評価手法を解説します。

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<ol><li>Naghavi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+burden+of+bacterial+antimicrobial+resistance+1990%E2%80%932021%3A+a+systematic+analysis+with+forecasts+to+2050%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Global burden of bacterial antimicrobial resistance 1990–2021: a systematic analysis with forecasts to 2050.</a> Lancet. 404 (10459), 1199-1226 (2024).</li>
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<li>Ji, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adsorption+and+morphology+analysis+of+bovine+serum+albumin+on+a+micropillar-enhanced+quartz+crystal+microbalance%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Phys.+Chem.+B%22%5BJournal%5D)">Adsorption and morphology analysis of bovine serum albumin on a micropillar-enhanced quartz crystal microbalance.</a> J. Phys. Chem. B. 128 (41), 10247-10257 (2024).</li>
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<li>Woodring, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disrupting+the+conserved+salt+bridge+in+the+trimerization+of+influenza+A+nucleoprotein%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Med.+Chem%22%5BJournal%5D)">Disrupting the conserved salt bridge in the trimerization of influenza A nucleoprotein.</a> J. Med. Chem. 63 (1), 205-215 (2019).</li>
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<li>Deni, W. H., Gao, T., Wu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+for+reconstituting+peptides%2Fpeptidomimetics+from+DMSO+to+aqueous+buffers+for+circular+dichroism+analyses%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol for reconstituting peptides/peptidomimetics from DMSO to aqueous buffers for circular dichroism analyses.</a> STAR Protoc. 5 (1), 102850(2024).</li>
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<li>Hancock, R. E., Sahl, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antimicrobial+and+host-defense+peptides+as+new+anti-infective+therapeutic+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Antimicrobial and host-defense peptides as new anti-infective therapeutic strategies.</a> Nat. Biotechnol. 24 (12), 1551-1557 (2006).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1,2-エタンエディチオール</td><td>オークウッド&nbsp;</td><td>M03555</td><td></td></tr><tr><td>100倍抗生物質</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>A5955-20ML</td><td></td></tr><tr><td>1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩</td><td>コンビブロック</td><td>SS-7536</td><td>以下EDCと呼ばれます</td></tr><tr><td>2-ナフトイルクロリド</td><td>コンビブロック</td><td>OR-0173</td><td></td></tr><tr><td>酢酸&nbsp;</td><td>アヤックス・ファネヘム</td><td>R18401O</td><td></td></tr><tr><td>アセトニトリル</td><td>VWR&nbsp;</td><td>20060.35</td><td></td></tr><tr><td>アルカリホスファターゼ</td><td>ニューイングランド・バイオラボ</td><td>M0525S</td><td></td></tr><tr><td>牛血清アルブミン(BSA)</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>A1933年</td><td></td></tr><tr><td>陽イオン調整済みミューラー・ヒントンブロス(CAMHB)</td><td>ベクトン・ディキンソン・アンド・カンパニー</td><td>212322</td><td></td></tr><tr><td>Cbz-L-Trp</td><td>コンビブロック</td><td>QB-6691</td><td></td></tr><tr><td>コリスチン&nbsp;</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>C4461</td><td></td></tr><tr><td>デイ・エングレー(D/E)の中和ブロス</td><td>オキソイド</td><td>R453042</td><td></td></tr><tr><td>珪藻土(Celite 545)</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>102693</td><td>0.02-0.1 mm の粒子サイズ</td></tr><tr><td>ジクロロメタン(DCM)</td><td>VWR&nbsp;</td><td>23366.327</td><td></td></tr><tr><td>ジエチルエーテル</td><td>ケムサプライ</td><td>EA036</td><td></td></tr><tr><td>ジメチルスルオキシド(DMSO)</td><td>ケムサプライ株式会社および</td><td>LCS-CHEM-0098</td><td></td></tr><tr><td>ジチオスレイトール(DTT)</td><td>サーモ・サイエンティフィック</td><td>J15397.03</td><td></td></tr><tr><td>DMEM培養培地</td><td>サーモ・フィッシャー・サイエンティフィック&nbsp;</td><td>UCS-BIO-0058</td><td></td></tr><tr><td>大腸菌 BL21(DE3) 宿主</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>70235-M</td><td></td></tr><tr><td>電気孔孔器</td><td>サーモ・サイエンティフィック</td><td>NEON1SK</td><td></td></tr><tr><td>エチルアセテート</td><td>ケムサプライ</td><td>EA011-2.5L-P</td><td></td></tr><tr><td>エチレンジアミネテトラ酢酸(EDTA)</td><td>サーモ・サイエンティフィック</td><td>118432500</td><td></td></tr><tr><td>胎児用牛血清(FBS)</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>12003C-500ML</td><td></td></tr><tr><td>彼のタグ付けはTEVプロテアーズ&nbsp;</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>T4455</td><td></td></tr><tr><td>ヒドロキシベンゾトリアゾールハイドレート</td><td>ケム・インプレックス</td><td>24755</td><td></td></tr><tr><td>イミダゾール</td><td>サーモ・サイエンティフィック</td><td>288-32-4</td><td></td></tr><tr><td>イソプロピル&β;-D-1-チオガラクトピラノサイド(IPTG)</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>I6758</td><td></td></tr><tr><td>ルリア・ベルターニ・ブロス(LB)、およびnbsp;</td><td>サーモ・サイエンティフィック</td><td>12795027</td><td></td></tr><tr><td>溶解緩衝剤&nbsp;</td><td>サーモ・サイエンティフィック</td><td>89822</td><td></td></tr><tr><td>塩化水銀(II)</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>215465</td><td></td></tr><tr><td>メタノール(HPLCグレージ)</td><td>VWR</td><td>A452-4K</td><td></td></tr><tr><td>MTT試薬</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>M2128-100MG</td><td></td></tr><tr><td>N,N-ジイソプロピルチルアミン(DIPEA)</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>3440</td><td></td></tr><tr><td>N,N-ジメチルホルマミド(DMF)</td><td>ケムサプライ</td><td>RP1051</td><td></td></tr><tr><td>ナノドロップ</td><td>サーモ・サイエンティフィック</td><td>ND-ONE</td><td></td></tr><tr><td>N-ボック-エチレンジアミン</td><td>コンビブロック</td><td>AM-1613</td><td></td></tr><tr><td>NTAアフィニティ樹脂カラム</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>70666</td><td></td></tr><tr><td>炭素上のパラジウム</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>205699</td><td>10% w/w Pd</td></tr><tr><td>プラスミド精製キット</td><td>奇アゲン</td><td>27104</td><td></td></tr><tr><td>ポリプロピレンマイクロタイターチューブ&nbsp;</td><td>SARSTEDTとnbsp;</td><td>72.690.008</td><td></td></tr><tr><td>フラッシュカラムクロマトグラフィー用のシリカゲル</td><td>シリサイクル</td><td>R12030B</td><td>シリカゲル60、230-400メッシュ&nbsp;</td></tr><tr><td>シリカゲル薄層クロマトグラフィープレート</td><td>メルク</td><td>1055540001</td><td>アルミニウム裏面に0.2mmの層厚、254nm蛍光指示器付き</td></tr><tr><td>リン酸ナトリウム、0.2Mバッファソルン</td><td>サーモ・サイエンティフィック</td><td>J63816。AP</td><td></td></tr><tr><td>無菌の平底96ウェルポリプロピレンマイクロタイタープレート(蓋付き)</td><td>コーニング</td><td>3599</td><td></td></tr><tr><td>T4 DNAリガーゼ</td><td>ニューイングランド・バイオラボ</td><td>M0202S</td><td></td></tr><tr><td>トリエチルアミン(Et3N)</td><td>ケムサプライ</td><td>TR02151000</td><td></td></tr><tr><td>トリフルオロアセチン酸(TFA)</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>T6508</td><td></td></tr><tr><td>トリス-HCL</td><td>サーモ・サイエンティフィック</td><td>J62848。AK</td><td></td></tr><tr><td>トライトン X-100</td><td>サーモ・サイエンティフィック</td><td>A16046.AE</td><td></td></tr><tr><td>トリパンブルー</td><td>MP バイオメディカルズ・オーストラリア Pty LTD</td><td></td><td></td></tr><tr><td>トリプシン-EDTA(0.25%)</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>T4049-500ML</td><td></td></tr><tr><td>トリプチカゼ大豆 寒天 & nbsp;</td><td>ベクトン・ディキンソン・アンド・カンパニー</td><td>211043</td><td></td></tr><tr><td>尿素&nbsp;</td><td>サーモ・サイエンティフィック</td><td>29700</td><td></td></tr><tr><td>ベクター(T7プロモーター)</td><td>-</td><td></td><td>高コピー数プラスミド</td></tr></tbody></table>

抗菌ペプチドおよびその模倣体の生産と試験

Production and Testing of Antimicrobial Peptides and Their Mimics

Antimicrobial peptides (AMPs) and their synthetic mimics are emerging as promising alternatives to conventional antibiotics, particularly in response to ...

production-and-testing-of-antimicrobial-peptides-and-their-mimics

Research

JoVE Journal

Biology

生物学

ペプチドの第三級アミド（PTAは）が含まれるが、ペプチド、ペプトイドおよびN-メチル化ペプチドに限定されないが、ペプチドミメティックのスーパーファミリーである。ここでのPTAの1ビーズ1化合物ライブラリーを合成するためにスプリット·アンド·プールとサブモノマー戦略の両方を組み合わせた合成法を記載している。...

ペプチド第三級アミドライブラリのスプリット·アンド·プールの合成とキャラクタリゼーション

マイクロ波照射を用いた環状ペプチドの合成のための簡単で一般的な方法が概説されています。この手順により、側鎖とファーマコフォリック部分を保持しながら、異なるコンフォメーションの集合体を持つバックボーンサイクリックペプチドの合成が可能になり、したがって、生理活性コンフォメーションをスクリーニングすることができます。...

マイクロ波照射を用いて潜在的な抗寄生虫治療薬としてのバックボーン環状ペプチドライブラリの開発

ここでは、酵素の抗菌活性を迅速にスクリーニングし、特性評価するためのプロトコルを紹介します。マイクロスライド拡散アッセイと色素放出アッセイは、標的細菌基質を利用して、定性的および定量的な酵素活性評価を行います。...

定性的および定量的検出のためのアッセイおよびタンパク質の抗菌薬のキャラクタリゼーション

カチオン性官能基が混在するペプトイドを同じ配列で合成するプロトコールが提示されます（リジン型およびアルギニン型モノマー）。その後、皮膚リーシュマニア症を引き起こす原虫であるリーシュマニア・メキシカーナに対するこれらの化合物の試験についても記載されています。...

混合リジン型/アルギニン型モノマーおよびそれらの抗リーシュマニア活性の評価とペプトイドの合成のための効率的な方法

抗真菌化合物をスクリーニングするための簡単と適応のスープ微量液体希釈法。...

スープ希釈の in Vitroスクリーニング: 新しい抗真菌化合物を検出するための簡単かつ高速メソッド

プロトコルを提示大腸菌-lactococcal ・抗菌ペプチド ・ ナイシンに非正規アミノ酸類 (ncAAs) の選択的な圧力の取り込みをベースします。そのプロパティは、定義された成長媒体の目的の ncAAs...

非正規のアミノ酸類の選択的な圧力の取り込みによって生成される抗菌ペプチド

ここで提案するグラム陰性大腸菌(E. 大腸菌) を生成するプロトコル スフェロプ ラストとグラム陽性バキルス メガテリウム(B. メガテリウム) 明確に可視化し、急速に特徴付けるプロトプ...

生産と細菌のスフェロプ ラストとプロトプ ラスト抗菌ペプチドの局在を特徴付けるための可視化

pIRES2-ZSGreen1-rAbs-APN-CHO細胞で発現する組換え抗体タンパク質と、従来のハイブリドーマ技術を使用して産生されたモノクローナル抗体は、ブタアミノペプチダーゼN(APN)タンパク質を認識して結合することができます。...

ブタ腸粘膜上皮におけるアミノペプチダーゼNを標的とするモノクローナル抗体の作製

カンジダ・アルビカンスに対するペプチドの抗真菌活性の定量化

我々はリガンドが原虫溶解ペプチドと結合した蛍光顕微鏡とそのリガンドを用いたイエシロアリシロアリの腸内原生動物殺すセルロース消化これらの表面の膜に結合実証するための手順を提示...

原虫シロアリ腸に対するリガンド - 溶解性ペプチドのProtozoacidal活性を試験する in vitroで（原生動物文化）と in vivoで（シロアリ後腸へのマイクロインジェクション）

学ぶ抗菌ペプチドMel4とペプチド模倣体RK-758の合成、抗菌活性評価、および細胞毒性試験の統合プロトコル。Klebsiella pneumoniaeとEscherichia coliを用いたMIC・MBC測定とL-929細胞を用いたMTTアッセイによる包括的な評価手法を解説します。

抗菌ペプチドおよびその模倣体の生産と試験

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