Name: マウス海馬における厚組織のクライオ電子断層撮影ワークフロー (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-03-27T14:30:00.000+00:00
Duration: 10 min 6 s
Description: 学ぶマウス海馬の厚組織クライオ電子断層撮影ワークフロー。高圧凍結とcryo-FIBミリングを統合し、ミトコンドリアやリボソームなどの細胞内構造をin situで高分解能解析する標準化プロトコルを解説します。

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<ol><li>Young, L. N., Villa, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bringing+structure+to+cell+biology+with+cryo-electron+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Biophys%22%5BJournal%5D)">Bringing structure to cell biology with cryo-electron tomography.</a> Annu Rev Biophys. 52 (1), 573-595 (2023).</li>
<li>Baumeister, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cryo-electron+tomography%3A+A+long+journey+to+the+inner+space+of+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Cryo-electron tomography: A long journey to the inner space of cells.</a> Cell. 185 (15), 2649-2652 (2022).</li>
<li>Hong, Y., Song, Y., Zhang, Z., Li, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cryo-electron+tomography%3A+The+resolution+revolution+and+a+surge+of+in+situ+virological+discoveries%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Biophys%22%5BJournal%5D)">Cryo-electron tomography: The resolution revolution and a surge of in situ virological discoveries.</a> Annu Rev Biophys. 52 (1), 339-360 (2023).</li>
<li>Nogales, E., Mahamid, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bridging+structural+and+cell+biology+with+cryo-electron+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Bridging structural and cell biology with cryo-electron microscopy.</a> Nature. 628 (8006), 47-56 (2024).</li>
<li>Schur, F. K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toward+high-resolution+in+situ+structural+biology+with+cryo-electron+tomography+and+subtomogram+averaging%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Struct+Biol%22%5BJournal%5D)">Toward high-resolution in situ structural biology with cryo-electron tomography and subtomogram averaging.</a> Curr Opin Struct Biol. 58, 1-9 (2019).</li>
<li>Briggs, J. A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+biology+in+situ%E2%80%94the+potential+of+subtomogram+averaging%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Struct+Biol%22%5BJournal%5D)">Structural biology in situ—the potential of subtomogram averaging.</a> Curr Opin Struct Biol. 23 (2), 261-267 (2013).</li>
<li>Berger, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cryo-electron+tomography+on+focused+ion+beam+lamellae+transforms+structural+cell+biology%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Cryo-electron tomography on focused ion beam lamellae transforms structural cell biology.</a> Nat Methods. 20 (4), 499-511 (2023).</li>
<li>McCafferty, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrating+cellular+electron+microscopy+with+multimodal+data+to+explore+biology+across+space+and+time%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Integrating cellular electron microscopy with multimodal data to explore biology across space and time.</a> Cell. 187 (3), 563-584 (2024).</li>
<li>Pöge, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Making+plant+tissue+accessible+for+cryo-electron+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Making plant tissue accessible for cryo-electron tomography.</a> Elife. 106455, 1-41 (2025).</li>
<li>Bäuerlein, F. J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cryo-electron+tomography+of+large+biological+specimens+vitrified+by+plunge+freezing%5BTitle%5D)+AND+%22Preprint.+bioRxiv%22%5BJournal%5D)">Cryo-electron tomography of large biological specimens vitrified by plunge freezing.</a> Preprint. bioRxiv. , (2023).</li>
<li>Creekmore, B. C., Kixmoeller, K., Black, B. E., Lee, E. B., Chang, Y. -W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrastructure+of+human+brain+tissue+vitrified+from+autopsy+revealed+by+cryo-ET+with+cryo-plasma+fib+milling%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Ultrastructure of human brain tissue vitrified from autopsy revealed by cryo-ET with cryo-plasma fib milling.</a> Nat Commun. 15 (1), 2660(2024).</li>
<li>Chen, Z., Guo, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Innovations+in+cryo-electron+tomography+for+tissues%3A+Challenges+and+future+prospects%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Struct+Biol%22%5BJournal%5D)">Innovations in cryo-electron tomography for tissues: Challenges and future prospects.</a> Curr Opin Struct Biol. 93, 103112(2025).</li>
<li>Dubochet, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cryo-electron+microscopy+of+vitrified+specimens%5BTitle%5D)+AND+%22Q+Rev+Biophys%22%5BJournal%5D)">Cryo-electron microscopy of vitrified specimens.</a> Q Rev Biophys. 21 (2), 129-228 (2009).</li>
<li>Matsui, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cryo-electron+tomographic+investigation+of+native+hippocampal+glutamatergic+synapses%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Cryo-electron tomographic investigation of native hippocampal glutamatergic synapses.</a> Elife. 13, RP98458(2024).</li>
<li>Ning, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uncovering+synaptic+and+cellular+nanoarchitecture+of+brain+tissue+via+seamless+in+situ+trimming+and+milling+for+cryo-electron+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Preprint.+bioRxiv%22%5BJournal%5D)">Uncovering synaptic and cellular nanoarchitecture of brain tissue via seamless in situ trimming and milling for cryo-electron tomography.</a> Preprint. bioRxiv. , (2025).</li>
<li>Zhang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vhut-cryo-fib%2C+a+method+to+fabricate+frozen+hydrated+lamellae+from+tissue+specimens+for+in+situ+cryo-electron+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22J+Struct+Biol%22%5BJournal%5D)">Vhut-cryo-fib, a method to fabricate frozen hydrated lamellae from tissue specimens for in situ cryo-electron tomography.</a> J Struct Biol. 213 (3), 107763(2021).</li>
<li>Glynn, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+generalizable+and+targeted+molecular+biopsy+approach+for+in+situ+cryogenic+electron+tomography+of+vitreous+brain+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep+Methods%22%5BJournal%5D)">A generalizable and targeted molecular biopsy approach for in situ cryogenic electron tomography of vitreous brain tissue.</a> Cell Rep Methods. 5 (7), 101080(2025).</li>
<li>Kelley, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Waffle+method%3A+A+general+and+flexible+approach+for+improving+throughput+in+fib-milling%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Waffle method: A general and flexible approach for improving throughput in fib-milling.</a> Nat Commun. 13 (1), 1857(2022).</li>
<li>Pierson, J., Ziese, U., Sani, M., Peters, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exploring+vitreous+cryo-section-induced+compression+at+the+macromolecular+level+using+electron+cryo-tomography%3B+80s+yeast+ribosomes+appear+unaffected%5BTitle%5D)+AND+%22J+Struct+Biol%22%5BJournal%5D)">Exploring vitreous cryo-section-induced compression at the macromolecular level using electron cryo-tomography; 80s yeast ribosomes appear unaffected.</a> J Struct Biol. 173 (2), 345-349 (2011).</li>
<li>Alamoudi, A., Studer, D., Dubochet, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cutting+artefacts+and+cutting+process+in+vitreous+sections+for+cryo-electron+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Struct+Biol%22%5BJournal%5D)">Cutting artefacts and cutting process in vitreous sections for cryo-electron microscopy.</a> J Struct Biol. 150 (1), 109-121 (2005).</li>
<li>Rigort, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Focused+ion+beam+micromachining+of+eukaryotic+cells+for+cryoelectron+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Focused ion beam micromachining of eukaryotic cells for cryoelectron tomography.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 109 (12), 4449-4454 (2012).</li>
<li>Mahamid, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+focused+ion+beam+milling+and+lift-out+approach+for+site-specific+preparation+of+frozen-hydrated+lamellas+from+multicellular+organisms%5BTitle%5D)+AND+%22J+Struct+Biol%22%5BJournal%5D)">A focused ion beam milling and lift-out approach for site-specific preparation of frozen-hydrated lamellas from multicellular organisms.</a> J Struct Biol. 192 (2), 262-269 (2015).</li>
<li>Marko, M., Hsieh, C., Schalek, R., Frank, J., Mannella, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Focused-ion-beam+thinning+of+frozen-hydrated+biological+specimens+for+cryo-electron+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Focused-ion-beam thinning of frozen-hydrated biological specimens for cryo-electron microscopy.</a> Nat Methods. 4 (3), 215-217 (2007).</li>
<li>Engel, B. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Native+architecture+of+the+Chlamydomonas+chloroplast+revealed+by+in+situ+cryo-electron+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Native architecture of the Chlamydomonas chloroplast revealed by in situ cryo-electron tomography.</a> Elife. 4, e04889(2015).</li>
<li>Hayles, M. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+making+of+frozen-hydrated%2C+vitreous+lamellas+from+cells+for+cryo-electron+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Struct+Biol%22%5BJournal%5D)">The making of frozen-hydrated, vitreous lamellas from cells for cryo-electron microscopy.</a> J Struct Biol. 172 (2), 180-190 (2010).</li>
<li>Rubino, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+site-specific+focused-ion-beam+lift-out+method+for+cryo+transmission+electron+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Struct+Biol%22%5BJournal%5D)">A site-specific focused-ion-beam lift-out method for cryo transmission electron microscopy.</a> J Struct Biol. 180 (3), 572-576 (2012).</li>
<li>Schiøtz, O. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serial+lift-out%3A+Sampling+the+molecular+anatomy+of+whole+organisms%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Serial lift-out: Sampling the molecular anatomy of whole organisms.</a> Nat Methods. 21 (9), 1684-1692 (2023).</li>
<li>Nguyen, H. T. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serialized+on-grid+lift-in+sectioning+for+tomography+%28solist%29+enables+a+biopsy+at+the+nanoscale%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Serialized on-grid lift-in sectioning for tomography (solist) enables a biopsy at the nanoscale.</a> Nat Methods. 21 (9), 1693-1701 (2024).</li>
<li>Tang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Step-by-step+procedure+for+an+optimized+serial+lift-out+cryo-focused+ion+beam+milling+technique+in+tissue+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+Rep%22%5BJournal%5D)">Step-by-step procedure for an optimized serial lift-out cryo-focused ion beam milling technique in tissue analysis.</a> Biophys Rep. 11, 1-13 (2025).</li>
<li>Wolff, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mind+the+gap%3A+Micro-expansion+joints+drastically+decrease+the+bending+of+fib-milled+cryo-lamellae%5BTitle%5D)+AND+%22J+Struct+Biol%22%5BJournal%5D)">Mind the gap: Micro-expansion joints drastically decrease the bending of fib-milled cryo-lamellae.</a> J Struct Biol. 208 (3), 107389(2019).</li>
<li>Berger, C., Watson, H., Naismith, J. H., Dumoux, M., Grange, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Xenon+plasma+focused+ion+beam+lamella+fabrication+on+high-pressure+frozen+specimens+for+structural+cell+biology%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Xenon plasma focused ion beam lamella fabrication on high-pressure frozen specimens for structural cell biology.</a> Nat Commun. 16 (1), 2286(2025).</li>
<li>Eisenstein, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parallel+cryo+electron+tomography+on+in+situ+lamellae%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Parallel cryo electron tomography on in situ lamellae.</a> Nat Methods. 20 (1), 131-138 (2022).</li>
<li>Peck, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aretomolive%3A+Automated+reconstruction+of+comprehensively-corrected+and+denoised+cryo-electron+tomograms+in+real-time+and+at+high+throughput%5BTitle%5D)+AND+%22Preprint.+bioRxiv%22%5BJournal%5D)">Aretomolive: Automated reconstruction of comprehensively-corrected and denoised cryo-electron tomograms in real-time and at high throughput.</a> Preprint. bioRxiv. , (2025).</li>
<li>Liu, Y. -T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isotropic+reconstruction+for+electron+tomography+with+deep+learning%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Isotropic reconstruction for electron tomography with deep learning.</a> Nat Commun. 13 (1), 6482(2022).</li>
<li>Chen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+complete+data+processing+workflow+for+cryo-ET+and+subtomogram+averaging%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">A complete data processing workflow for cryo-ET and subtomogram averaging.</a> Nat Methods. 16 (11), 1161-1168 (2019).</li>
<li>Yang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+reduction+of+fib+damage+on+cryo-lamella+by+lowering+energy+of+ion+beam+revealed+by+a+quantitative+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Structure%22%5BJournal%5D)">The reduction of fib damage on cryo-lamella by lowering energy of ion beam revealed by a quantitative analysis.</a> Structure. 31 (10), 1275-1281.e4 (2023).</li>
<li>Tacke, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+streamlined+workflow+for+automated+cryo+focused+ion+beam+milling%5BTitle%5D)+AND+%22J+Struct+Biol%22%5BJournal%5D)">A streamlined workflow for automated cryo focused ion beam milling.</a> J Struct Biol. 213 (3), 107743(2021).</li>
<li>Boltje, D. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+cryogenic%2C+coincident+fluorescence%2C+electron%2C+and+ion+beam+microscope%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">A cryogenic, coincident fluorescence, electron, and ion beam microscope.</a> Elife. 11, e82891(2022).</li>
<li>Yang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrated+fluorescence+microscopy+%28IFLM%29+for+cryo-fib-milling+and+in-situ+cryo-ET%5BTitle%5D)+AND+%22Preprint.+bioRxiv%22%5BJournal%5D)">Integrated fluorescence microscopy (IFLM) for cryo-fib-milling and in-situ cryo-ET.</a> Preprint. bioRxiv. , (2023).</li>
<li>Li, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eli+trifocal+microscope%3A+A+precise+system+to+prepare+target+cryo-lamellae+for+in+situ+cryo-ET+study%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Eli trifocal microscope: A precise system to prepare target cryo-lamellae for in situ cryo-ET study.</a> Nat Methods. 20 (2), 276-283 (2023).</li>
<li>Medeiros, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Robust+workflow+and+instrumentation+for+cryo-focused+ion+beam+milling+of+samples+for+electron+cryotomography%5BTitle%5D)+AND+%22Ultramicroscopy%22%5BJournal%5D)">Robust workflow and instrumentation for cryo-focused ion beam milling of samples for electron cryotomography.</a> Ultramicroscopy. 190, 1-11 (2018).</li>
<li>Goetz, S. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modular+platform+for+automated+cryo-fib+workflows%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">A modular platform for automated cryo-fib workflows.</a> Elife. 10, e70506(2021).</li>
<li>Eisenstein, F., Fukuda, Y., Danev, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Smart+parallel+automated+cryo-electron+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Smart parallel automated cryo-electron tomography.</a> Nat Methods. 21 (9), 1612-1615 (2024).</li>
<li>Swulius, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deep+learning-based+segmentation+of+cryo-electron+tomograms%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Deep learning-based segmentation of cryo-electron tomograms.</a> J Vis Exp. (189), e64435(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1-ヘキサデセン</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>H2131</td><td>化学物質&試薬</td></tr><tr><td>2-メチルペンタン</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>M65807</td><td>化学物質&試薬</td></tr><tr><td>クリップリング</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>1131750;1188953</td><td>消耗品</td></tr><tr><td>銅箔</td><td>風成金属材料</td><td>1 & micro;厚さm(m)</td><td>消耗品</td></tr><tr><td>銅線サポートTEMグリッド(100メッシュ)</td><td>北京中京閣科技有限公司</td><td>BZ10021b</td><td>消耗品</td></tr><tr><td>クライオEM</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>クリオス G4</td><td>装備&nbsp;</td></tr><tr><td>クライオFIB</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>アクイロス2</td><td>装備&nbsp;</td></tr><tr><td>クライオFIBオートグリッド</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>1205101</td><td>消耗品</td></tr><tr><td>グリッド(UltrAufoil R 1.2/1.3 300メッシュ)</td><td>クアンティフォイル</td><td>アルトラ・オーフォイル</td><td>消耗品</td></tr><tr><td>高圧冷凍庫</td><td>ライカ・マイクロシステムズ</td><td>エム・アイス</td><td>装備&nbsp;</td></tr><tr><td>HPFキャリア、銅</td><td>ライカ・マイクロシステムズ</td><td>タイプB(6 mm)</td><td>消耗品</td></tr><tr><td>イオンスパッターコーター</td><td>定足数</td><td>Q150RS プラス</td><td>装備&nbsp;</td></tr><tr><td>金属組織研磨ペースト</td><td>lab-testec</td><td>W0.5</td><td>消耗品</td></tr><tr><td>布磨き</td><td>モラル</td><td>B00809</td><td>消耗品</td></tr><tr><td>サンドペーパー</td><td>イーグルブランドサンドペーパー</td><td>8000番、12000番</td><td>消耗品</td></tr><tr><td>立体顕微鏡</td><td>ライカ・マイクロシステムズ</td><td>S9i</td><td><a name="RANGE!D17">装備&nbsp;</a></td></tr><tr><td>ショ糖</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>200-334-9</td><td>化学物質&試薬</td></tr><tr><td>Tiltシリーズ取得ソフトウェア</td><td>https://bio3d.colorado.edu/SerialEM/</td><td>シリアルEM 4.0.9</td><td>ソフトウェア</td></tr><tr><td>傾斜系列の整列と再構築ソフトウェア</td><td>https://github.com/czimaginginstitute/AreTomo3&nbsp;</td><td>アレトモ3</td><td>ソフトウェア</td></tr><tr><td>Tiltシリーズ取得ソフトウェア</td><td>https://github.com/eisfabian/PACEtomo</td><td>ペーストモ</td><td>ソフトウェア</td></tr><tr><td>傾斜系列の整列と再構築ソフトウェア</td><td>https://github.com/IsoNet-cryoET/IsoNet</td><td>IsoNet</td><td>ソフトウェア</td></tr><tr><td>傾斜系列の整列と再構築ソフトウェア</td><td>https://github.com/cryoem/eman2</td><td>EMAN2</td><td>ソフトウェア</td></tr><tr><td>傾斜系列の整列と再構築ソフトウェア</td><td>https://relion.readthedocs.io/en/release-4.0/index.html</td><td>レリオン4</td><td>ソフトウェア</td></tr></tbody></table>

マウス海馬における厚組織のクライオ電子断層撮影ワークフロー

Cryo-Electron Tomography Workflow for Thick Tissues Demonstrated in Mouse Hippocampus

Cryo&#8209;electron tomography (cryo&#8209;ET) enables 3D visualization of native cellular ultrastructure, but its application to thick tissues is limited ...

cryo-electron-tomography-workflow-for-thick-tissues-demonstrated

Research

JoVE Journal

Neuroscience

神経科学

このビデオで明らかに瞬間冷凍のためのテクニックであり、マウスの胚脳組織をセクショニング。クリオスタットを使用するための有用なヒントが得られる組織のセクションは、クラックや他の歪みのないことを保証するために削減しながら使用できるトラブルシューティングの方法を含めて、与えられている。...

Flashは、E12.5マウス脳の凍結とCryosectioning

ここでは、半厚い脳スライスの画像蛍光標識細胞に迅速かつ簡単な方法を説明します。...

セミ厚い脳スライスにおける高解像度蛍光イメージングへの迅速なアプローチ

このビデオでは、凍結マウス脳腫瘍組織をクライオスタットを使用して切片化する様子を実演しています。このようにして得られた凍結脳組織切片は、さらなる分析まで低温で保存される。...

凍結マウス脳組織切片作製:凍結マウス脳組織から薄い凍結組織切片を得るための手順

超微細構造解析のための神経突起を維持するために、我々は、ガラス質氷の層に懸濁したサンプルを得瞬間冷凍に続く電子顕微鏡グリッド上に、一次ニューロンのメッキのためのプロトコルを記述します。これらのサンプルは、ナノメートルスケールでの構造を可視化するために低温電子顕微鏡で調べることができる。...

低温電子断層撮影法を用いて凍結 - 和状態で神経突起を可視化するための一次ニューロンの調製

ここでは、クライオ軟X線断層撮影法(SXT)で凍結保存細胞全体の超構造を25nmハーフピッチの分解能で画像化するために必要なサンプル調製およびデータ収集ステップを説明するプロトコルを提示する。...

クライオ軟X線断層撮影による細胞の3D地図作成記述

集束イオンビームミリングを使用して、凍結した生物学的サンプルを急落させてクライオ電子線トモグラフィー用にガラス体オングリッドラメラを作成します。...

クライオ電子線トモグラフィー用デュアルビーム走査電子顕微鏡を用いたガラス質生体試料からのラメラの調製(英語)

クライオに焦点を当てたイオンビームマイクロマシニングによる、凍結した生体試料のラメラ調製プロトコルを提示し 、その場で...

クライオ電子断層撮影のための サッカロミセス・セレビシエ の調製とクライオFIBマイクロマシニング

極低温電子断層撮影における大規模なデータ収集の需要の高まりには、高スループット画像取得ルーチンが必要です。ここでは、断層データ収集の時間効率とスループットを最大化することを目的とした高度な取得戦略の最近の開発を実装するプロトコルを説明します。...

極低温電子断層撮影の最適化戦略

クライオSTEMトモグラフィーは、埋め込み、切片作成、またはその他の侵襲的な調製物なしで、無傷の細胞の細胞小器官を視覚化する手段を提供します。得られた3D解像度は現在、数ナノメートルの範囲であり、数マイクロメートルの視野および1μmのオーダーのアクセス可能な厚さを有する。...

クライオSTEMトモグラフィーによるオルガネラのin situ 可視化

このワークフローは、極低温トライコンシブイメージングプラットフォームを使用して、小さく(軸方向&lt;1μm)希少な(細胞あたり1コピー)蛍光標識された生物学的構造を標的としたラメラ生成を可能にします。このプラットフォームは、蛍光顕微鏡、集束イオンビームミリング、走査型電子顕微鏡を単一の焦点位置に統合し、ミリング中の同時蛍光顕微鏡を可能にします。...

極低温同時蛍光、電子、イオンビーム顕微鏡を用いた細胞のターゲットミリングのためのワークフロー

学ぶマウス海馬の厚組織クライオ電子断層撮影ワークフロー。高圧凍結とcryo-FIBミリングを統合し、ミトコンドリアやリボソームなどの細胞内構造をin situで高分解能解析する標準化プロトコルを解説します。

マウス海馬における厚組織のクライオ電子断層撮影ワークフロー

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