Name: 酵素による消化および密度-勾配分離を用いたルイスラットからの膵島の分離と精製 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-04-03T12:53:00.000+00:00
Duration: 7 min 44 s
Description: 学ぶルイスラットからの膵島分離法。酵素消化と密度勾配遠心により高純度・高生存率の膵島を効率的に調製し、糖尿病研究や移植実験に適した標準化プロトコルを確立する。

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<ol><li>Grattoni, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Harnessing+cellular+therapeutics+for+type+1+diabetes+mellitus%3A+progress%2C+challenges%2C+and+the+road+ahead%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Harnessing cellular therapeutics for type 1 diabetes mellitus: progress, challenges, and the road ahead.</a> Nat Rev Endocrinol. 21 (1), 14-30 (2025).</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>21 G x 2インチ。BD プレシジョングライドニードル</td><td>BD</td><td>305129</td><td></td></tr><tr><td>500 & micro;m真鍮フレームと304ステンレススクリーン、直径3インチ×深さ1インチ(ふるい番号35)</td><td>マクマスター・カー</td><td>34735K525</td><td></td></tr><tr><td>エアタイト滅菌注射器、ルアーロック</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>14-817-178</td><td></td></tr><tr><td>バイオゲルPI UltraTouch M</td><td>M&Moonl;インリッケ</td><td>42665</td><td></td></tr><tr><td>ボン・シザーズ;ストレート;鋭いポイント;刃長15mm;全長3 1/2インチ</td><td>ロボズ</td><td>RS-5840</td><td></td></tr><tr><td>ブレイントリーサイエンティフィック GERMINATOR 500 ドライステリル</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>NC9956482</td><td></td></tr><tr><td>Cell-IQシリーズ 5.8立方フィートCO2実験室インキュベーター</td><td>PHCBI</td><td>MCO-170AICUVHL-PA</td><td></td></tr><tr><td>コーニング 100mm TC処理されていない培養皿</td><td>コーニング</td><td>430591</td><td></td></tr><tr><td>コーニング胎児用牛血清、500mL、通常、USDA安全性試験済み(加熱不活化)</td><td>コーニング</td><td>35011CV</td><td></td></tr><tr><td>コーニング島勾配1.069(密度1.069 g/cm3)</td><td>コーニング</td><td>99-815-CIS</td><td>会社からの特別な要望が必要です</td></tr><tr><td>コーニング島勾配1.096(密度1.096 g/cm3)</td><td>コーニング</td><td>99-691-CIS</td><td>会社からの特別な要望が必要です</td></tr><tr><td>コーニング島勾配1.108(密度1.108 g/cm3)</td><td>コーニング</td><td>99-692-CIS</td><td>会社からの特別な要望が必要です</td></tr><tr><td>Covidien Tendersorb アンダーパッド</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>22-225-102</td><td></td></tr><tr><td>DNase I グレードII</td><td>ロッシュ</td><td>10104159001</td><td></td></tr><tr><td>ファルコン&nbsp;50 mL 高透明度円錐遠心分離機チューブ</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>14-432-22</td><td></td></tr><tr><td>フィッシャーブランド・アルミホイル、標準軌のロール</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>01-213-100</td><td></td></tr><tr><td>フィッシャーブランド&nbsp;不織布ガーゼスポンジ</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>22-028-559</td><td></td></tr><tr><td>フィッシャーブランド再利用可能な重厚型低型ビーカー</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>FB101600</td><td></td></tr><tr><td>蛍光ミルコスコープ&nbsp;BZ-X810</td><td>キーエンス</td><td>BZ-X810</td><td></td></tr><tr><td>グルコース溶液</td><td>ギブコ</td><td>A2494001</td><td></td></tr><tr><td>ハルジー・マイクロニードルホルダー</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>12500-12</td><td></td></tr><tr><td>HBSS、カルシウム、マグネシウム、フェノールレッドなし</td><td>ギブコ</td><td>14025092</td><td></td></tr><tr><td>HEPES(1 M)</td><td>ギブコ</td><td>15630080</td><td></td></tr><tr><td>止血鉗子 クラシック Crile 5 1/2インチ長</td><td>マッケソン</td><td>1231217</td><td></td></tr><tr><td>ハドソン(エワルド)鉗子</td><td>ロボズ</td><td>RS-5238</td><td></td></tr><tr><td>注射針モノジェクト 長さ1-1/2インチ 16ゲージ 通常壁 安全装置なし</td><td>マッケソン</td><td>43481</td><td></td></tr><tr><td>L-グルタミン(200 mM)</td><td>ギブコ</td><td>25030081</td><td></td></tr><tr><td>リベラーゼT-フレックス、研究用グレード</td><td>ロッシュ</td><td>5989132001</td><td></td></tr><tr><td>哺乳類細胞用のLIVE/DEAD生存可能性/細胞毒性キット</td><td>インビトロジェン</td><td>&nbsp;L3224</td><td></td></tr><tr><td>MATLABソフトウェアパッケージ</td><td>マスワークス</td><td><a href="https://www.mathworks.com/pricing-licensing.html?prodcode=ML">https://www.mathworks.com/pricing-licensing.html?prodcode=ML</a></td><td></td></tr><tr><td>NE-4000 2チャンネルプログラム型シリンジポンプ</td><td>シリンジポンプ</td><td>NE-4000-US</td><td></td></tr><tr><td>針、筋力下 27GX1/2インチ(100/BX) エクスリント</td><td>マッケソン</td><td>408877</td><td></td></tr><tr><td>Nunc細胞培養/ペトリ皿</td><td>サーモサイエンティエンティエンス</td><td>174926</td><td></td></tr><tr><td>オリンパスCKX41逆位相差顕微鏡</td><td>オリンポス</td><td>CKX41-B</td><td></td></tr><tr><td>PBS、pH 7.4</td><td>ギブコ</td><td>10010023</td><td></td></tr><tr><td>ペニシリンストレプトマイシン(10,000 U/mL)</td><td>ギブコ</td><td>15140122</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640</td><td>ギブコ</td><td>11875093</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640、グルコースなし</td><td>ギブコ</td><td>11879020</td><td></td></tr><tr><td>ピルビン酸ナトリウム(100 mM)</td><td>ギブコ</td><td>11360070</td><td></td></tr><tr><td>ピルビン酸ナトリウム(100 mMストック)</td><td>ギブコ</td><td>11360070</td><td></td></tr><tr><td>ソーバルST 16R</td><td>サーモサイエンティエンティエンス</td><td>75004381</td><td></td></tr><tr><td>ステンレススチール製304シリンジ針</td><td>ミリポール・シグマ</td><td>Z117013-1EA</td><td></td></tr><tr><td>外科用ドレープ、使い捨て、36インチ×100ヤード</td><td>コヴェトルス</td><td>10408</td><td></td></tr><tr><td>サージカルシザーズ - ToughCut</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>14054-13</td><td></td></tr><tr><td>親指包紮鉗子 4.5インチ ギザギザの繊細な先端幅1.3mm</td><td>ロボズ</td><td>RS-8120</td><td></td></tr><tr><td>サーモサイエンティフィック Nunc 200mL遠心分離機チューブ</td><td>サーモサイエンティエンティエンス</td><td>14-962-17</td><td></td></tr><tr><td>サーモサイエンティフィック NUNC遠心分離機ボトルアダプターとクッション</td><td>サーモサイエンティエンティエンス</td><td>12-565-283B</td><td></td></tr><tr><td>TSDUB15 15L ダブノフ シェイキングウォーターバス</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>300610298</td><td></td></tr><tr><td>TX-400 4×400 mL スイングバケットローター</td><td>サーモサイエンティエンティエンス</td><td>75003181</td><td></td></tr><tr><td>タイゴン S-50-HL</td><td>タイゴン</td><td>AAXoooo3</td><td></td></tr><tr><td>超感度ラットインスリンELISAキット</td><td>クリスタルケム</td><td>90060</td><td></td></tr></tbody></table>

酵素による消化および密度-勾配分離を用いたルイスラットからの膵島の分離と精製

Pancreatic Islet Isolation and Purification from Lewis Rats Using Enzymatic Digestion and Density-Gradient Separation

以下の結果は、記載された方法を用いた典型的なアイレット分離を示し、12個のルイスラット膵臓を並行処理したものです。
収量とサイズ分布
手動のアリコートカウントとIEQ変換
「アイレットカウント」ステップ6.1で説明されているように、混合アイレット懸濁液から2つの独立した100μLアリコートが得られ、直径ビン(50-100μm、100-150μm、150-200μm、200-250μm、250-300μm、250-300μm)でカウントされました。カウントは標準当量表を用いてアイレット当量(IEQ;150μm参照)に換算し、総懸濁体積に外挿しました( 図4A参照)。検査分離(n=12)では、膵臓あたり3330 IEQの収量が、50-100μmビン内に中央値の膵島径がありました。複製アリコットはビンあたり18.8%(変動係数)で一致し、手作業計数方法を用いると予想される中程度の変動を示しています。過去14回のアイレット分離では、この方法で平均1353(標準差607)のIEQ/膵臓が生成されました。
自動全プレート定量化
手動IEQのベンチマークとして、顕微鏡でD1で明視野画像を取得し、全皿合成画像(4×対物レンズ;露光1/100秒)を合成しました。フィジーと符号化を用いて、50〜600μmの定義されたサイズ閾値で自動サイズ測定と対象の定量化が行われました。画像はまず背景の変動を減らしコントラストの均一性を高めるために前処理されました。島の構造は周囲組織との強度差に基づいて同定され、二元物体マスクを生成しました。隣接または部分的に接触する島は、物体数の過小評価を避けるために分離されました。指定されたサイズ範囲外の物体は、破片や非島組織を除去するために除外されました。保持対象ごとに、面積やx軸およびy軸径を含む形態計測パラメータが抽出されました。その後、アイレットは直径でビン分けされ、IEQは各サイズビン内のアイレット数に対応する換算係数を掛けて計算されました。自動サイズ測定により、合計98,832個の物体が得られ、平均x軸径はそれぞれ117μm、y軸直径は116μm、推定IEQは16,350個で、これはD0で測定された手動IEQと強く相関していました(Spearman r = 0.937, p = 0.0048;図4A-C参照)。
アイレット細胞の脱落
全プレート画像は、精製後2時間後および1日目(D1)に取得され、同じ手法を用いた「自動全プレート定量化」を用いて早期のアイレット安定化(「脱落」)を評価しました。2時間からD1まで、オブジェクト数は0.9%、IEQは-6.11%変化しました( 図4D参照)。D0とD1の島径のペア比較では、統計的に有意な中央値減少が2μmであった(Wilcoxon符号付きランク検定、 p = 0.0136、n = 2820)。しかし、この変化の小さな規模は生物学的にも臨床的にも意味があるとは考えにくいです。
<img alt="図4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/70414/70414fig4.jpg" data-altupdatedat="1777957239000" data-alt="Figure 4"> 
図4:アイレットのサイズ分布、相関、早期脱落の定量的評価。 手動および自動解析によって得られた島の測定値の図示的要略。(A) Day 0 (D0) 標準化されたアイレット相当のIEQサイズビン間で手動定量化に基づくアイレットサイズ分布。(B) 1日目(D1)アイレットサイズ分布は、同じ標準化されたIEQサイズビン間で画像ベースの自動測定によって決定されます。(C) IEQサイズビン間で手動D0と自動D1定量化の相関。(D) 同一プレートの自動測定のためのD0からD1までのアイレット直径分布のボックスプロット。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/70414/70414fig4large.jpg" target="_blank">この図の拡大版はこちらをクリックしてご覧ください。</a>
純度(内分泌と外分泌成分)
ジチゾン(DTZ)染色
D1では、多数のアイレット(n = 451)を室温で30秒間DTZ染色し、直ちに明視野顕微鏡(対物レンズ4×、露光1/20秒)で画像化しました。フィジーでは、背景のピクセルが除去され、残りのピクセル領域がアイレット全体の面積に対応するようにされました。暗い色コントラストで識別されるDTZ陰性外分泌組織領域は、投げ縄ツールで手動で選択され、各関心領域の領域はピクセル単位で自動的に記録されました。内分泌純度は、DTZ陽性ピクセルの割合を全アイレットピクセルに対する割合として算出し、純度は98.56±0.38%でした(図5A)。
実用性と機能性能
グルコース刺激インスリン分泌(GSIS)
各時点(D1、D3、D7)で、サイズに合った15個のアイレットが手作業で選ばれ、24ウェルのプレートの個別の井戸に設置され、4倍で準備されました。アイレットはクレブスバッファー内の37°Cで5%CO2 で低・高・低グルコース刺激プロトコルのもとで培養されました。まず低グルコース(2.8 mM、60分)、その後高グルコース(16.7 mM、60分、 表1参照)で培養されました。各潜伏期間終了時に排出物分画を収集し、ラットインスリンELISAアッセイを用いてインスリン濃度を定量化しました。刺激指数は、高血糖状態と低血糖条件下でのインスリン分泌比率として計算されました。刺激指数はそれぞれ1日目、3日目、7日目に9.37、8.34、6.7で、有意差はありませんでした(図5B)。
ライブ/デッドステイン
D1、D3、D7では、15個のアイレットが製造元の指示に従ってLive/Deadの実用性キットで手作業で選ばれ、染色されました。簡単に、アイレットは生死染色液で25°Cで30分間培養され、その後、時間差(4倍対物レンズ、1/30秒露光、テキサスレッドおよびGFPフィルター)を比較可能にするために、一貫した顕微鏡設定で画像化されました。生存可能性は、scikit画像を用いたアイレットセグメンテーションと蛍光測定を用いるPythonスクリプトを用いて定量化されました。緑色と赤色の蛍光チャネルを組み合わせ、Liの閾値法を適用して二値マスクを作成し、流域分割を用いて接点を持つ島を分離することで島が特定されました。物体は面積ごとにフィルターされ、破片や遺物は除外されました。各島ごとに、生存可能性は、緑色のピクセルを組み込んだ総統合密度(緑と赤色ピクセル)に対する割合として計算されました。結果はD1で68±9%、D3で98.2±0.6%、D7で100%の生存率を示しました。70%エタノールで10分間処理した陽性対照サンプルは、生存率が2.7±7.2%を示しました(図5C-F参照)。
<img alt="図5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/70414/70414fig5.jpg" data-altupdatedat="1777957239000" data-alt="Figure 5"> 
図5:島の純度、生存可能性、機能的応答性の評価。時間経過による孤立した島の特徴の代表的な画像と定量的要約。(A) 代表的な10×ジチゾン(DTZ)で染色された島の明視野画像で、赤色に染まった内分泌小島と染色されていない外分泌組織が示されています。(B) 1日目、3日目、7日目における高グルコース/低グルコース(HG/LG)刺激指数のグルコース刺激インスリン分泌(GSIS)値。(C-E)1日目(C)、3日目(D)、7日目(E)の島の生死蛍光画像。(F) エタノール処理された陽性対照群の生死蛍光画像。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/70414/70414fig5large.jpg" target="_blank">この図の拡大版はこちらをクリックしてご覧ください。</a>
<table border="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>(a) メディアの洗浄</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>構成要素</td>
			<td>最終集中</td>
			<td>量(mL)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640</td>
			<td>-</td>
			<td>500 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>胎児用牛血清</td>
			<td>10%</td>
			<td>50 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ペン溶連菌(10,000 U/mL)</td>
			<td>1%</td>
			<td>5.5 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ヘペス</td>
			<td>25 mM</td>
			<td>12.5mL、1M在庫より</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-グルタミン</td>
			<td>2 mM</td>
			<td>200 mMのストックから5 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>(B) アイレット・カルチャー・メディア</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>構成要素</td>
			<td>最終集中</td>
			<td>量(mLまたはg)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640、グルコースなし</td>
			<td>-</td>
			<td>500 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>胎児用牛血清</td>
			<td>10%</td>
			<td>50 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ペン溶連菌(10,000 U/mL)</td>
			<td>1%</td>
			<td>5.5 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ヘペス</td>
			<td>20 mM</td>
			<td>11mLの在庫から11mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ピルビン酸ナトリウム</td>
			<td>1 mM</td>
			<td>100 mMストックから5.5 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>グルコース</td>
			<td>5.5 mM</td>
			<td>200 g/Lのストックから2.75 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>(c) ペニシリン・ストレプトマイシン洗浄液</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>構成要素</td>
			<td>最終集中</td>
			<td>量(mLまたはg)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>生理食塩水溶液、0.9%</td>
			<td>-</td>
			<td>500 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ペニシリン・ストレプトマイシン(10,000 U/mL)</td>
			<td>2%</td>
			<td>10 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>(D) 焼入れバッファー</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>構成要素</td>
			<td>最終集中</td>
			<td>量(mLまたはg)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HBSS</td>
			<td>-</td>
			<td>500 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>胎児用牛血清</td>
			<td>20%</td>
			<td>100 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES(1 M)</td>
			<td>2.50%</td>
			<td>2.5 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>(E) クレブスバッファー</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>構成要素</td>
			<td>最終集中</td>
			<td>量(mLまたはg)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dH2O</td>
			<td>-</td>
			<td>975 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>115 mM</td>
			<td>6.72 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaHCO3</td>
			<td>24 mM</td>
			<td>2.02 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td>5 mM</td>
			<td>0.3728 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES(1 M)</td>
			<td>25 mM</td>
			<td>25 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgCl2</td>
			<td>1 mM</td>
			<td>0.0952 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BSA</td>
			<td>0.10%</td>
			<td>1 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td>2.5 mM</td>
			<td>0.2775 g</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
表1:解決策一覧。 アイレット分離および精製プロトコル全体で使用されるすべての溶液の組成および調製の詳細。各小節には、成分、最終濃度、調製量、カタログ番号が記載されています。(A) 洗浄用メディアは、消化や浄化の際に組織をすすぎたり洗浄したりするために使われます。(B) アイレット培養培地は、分離後のアイレットの維持と生存性に使用されます。(C) ペニシリン・ストレプトマイシン洗浄液は、摘出した膵臓を滅菌・すすいでいます。(D) 焼光バッファー:酵素的消化を終わらせ、細胞の生存能力を維持するために使用されます。(E) グルコース刺激インスリン分泌(GSIS)アッセイで使用されるクレブスバッファー。
<table border="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>膵臓の数</td>
			<td>コラーゲナーゼ(15.38 mg/mL)</td>
			<td>サーモリシン(1 mg/mL)</td>
			<td>DNAase(100 mg/mL)</td>
			<td>動作バッファ</td>
			<td>使用用の600 mLビーカー</td>
			<td>体積/ビーカー</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30</td>
			<td>4.5 mL</td>
			<td>2.25 mL</td>
			<td>450μL</td>
			<td>450 mL</td>
			<td>5</td>
			<td>25 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24</td>
			<td>3.6 mL</td>
			<td>1.8 mL</td>
			<td>360μL</td>
			<td>360 mL</td>
			<td>4</td>
			<td>25 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20</td>
			<td>3 mL</td>
			<td>1.5 mL</td>
			<td>300 μL</td>
			<td>300 mL</td>
			<td>3</td>
			<td>25 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>16</td>
			<td>2.4 mL</td>
			<td>1.2 mL</td>
			<td>240 μL</td>
			<td>240 mL</td>
			<td>2</td>
			<td>25 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>12</td>
			<td>1.8 mL</td>
			<td>0.9 mL</td>
			<td>180μL</td>
			<td>180 mL</td>
			<td>2</td>
			<td>25 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10</td>
			<td>1.5 mL</td>
			<td>0.75 mL</td>
			<td>150 μL</td>
			<td>150 mL</td>
			<td>2</td>
			<td>25 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>最終コンセント。</td>
			<td>0.15 mg/mL</td>
			<td>5 mg/mL</td>
			<td>0.1 mg/mL</td>
			<td colspan="3"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
表2:膵臓量別の消化酵素溶液。 異なる数のラット膵臓に対応する作業解離培地(WDM)を準備するために必要量のコラーゲナーゼ、熱分解物、DNase I。各酵素の最終濃度は表の下部に記載されています。
<table border="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>膵臓の数</td>
			<td>50mLチューブ</td>
			<td>ボリューム/注射器</td>
			<td>1.096本の注射器の数</td>
			<td>1.068本の注射器の数</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30</td>
			<td>10本の管</td>
			<td>50 mL</td>
			<td>2</td>
			<td>2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24</td>
			<td>8本の真空管</td>
			<td>40 mL</td>
			<td>2</td>
			<td>2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20</td>
			<td>6本の真空管</td>
			<td>30 mL</td>
			<td>2</td>
			<td>2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>16</td>
			<td>4本の管</td>
			<td>40 mL</td>
			<td>1</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>12</td>
			<td>4本の管</td>
			<td>40 mL</td>
			<td>1</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10</td>
			<td>2本の管</td>
			<td>20 mL</td>
			<td>1</td>
			<td>1</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
表3:膵臓量による勾配負荷。 膵管数に応じて、膵島浄化に必要な50mL円錐管の数とそれに対応する勾配容量。
<table border="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>島径範囲(μm)</td>
			<td>アイレット粒子番号(AI)</td>
			<td>IEQ変換係数</td>
			<td>範囲ごとのIEQ</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50-100</td>
			<td>a</td>
			<td>* 0.167</td>
			<td>a * 0.167</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>101-150</td>
			<td>b</td>
			<td>* 0.648</td>
			<td>b * 0.648</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>151-200</td>
			<td>c</td>
			<td>* 1.685</td>
			<td>c * 1.685</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>201-250</td>
			<td>d</td>
			<td>* 3.500</td>
			<td>d * 3.500</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>251-300</td>
			<td>e</td>
			<td>* 6.315</td>
			<td>e * 6.315</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>301-350</td>
			<td>f</td>
			<td>* 10.352</td>
			<td>f * 10.352</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&gt; 350</td>
			<td>g</td>
			<td>* 15.833</td>
			<td>g * 15.833</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
表4:島の等価変換。 アイレット直径の範囲を標準化されたアイレット相当物(IEQ)に変換する。表には観測されたアイレット直径ビン、各レンジごとのアイレット粒子数、対応するサイズ範囲ごとのIEQ換算係数、および範囲ごとのIEQ寄与が一覧化されています。

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