Name: 初期胚の単一細胞における接合ゲノム活性化の可視化 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-04-03T13:10:00.000+00:00
Duration: 7 min 30 s
Description: 学ぶ 初期胚の単一細胞における接合ゲノム活性化の可視化手法。Xenopus laevisを用いて5-EUによる新生RNA標識とクリック化学を組み合わせ、共焦点顕微鏡で時空間的動態を追跡する。発生生物学研究に有用です。

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<ol><li>Kojima, M. L., Hoppe, C., Giraldez, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+maternal-to-zygotic+transition%3A+Reprogramming+of+the+cytoplasm+and+nucleus%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Genet%22%5BJournal%5D)">The maternal-to-zygotic transition: Reprogramming of the cytoplasm and nucleus.</a> Nat Rev Genet. 26 (4), 245-267 (2025).</li>
<li>Vastenhouw, N. L., Cao, W. X., Lipshitz, H. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+maternal-to-zygotic+transition+revisited%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">The maternal-to-zygotic transition revisited.</a> Development. 146 (11), dev161471(2019).</li>
<li>Jukam, D., Shariati, S. A. M., Skotheim, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zygotic+genome+activation+in+vertebrates%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Cell%22%5BJournal%5D)">Zygotic genome activation in vertebrates.</a> Dev Cell. 42 (4), 316-332 (2017).</li>
<li>Palfy, M., Joseph, S. R., Vastenhouw, N. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+timing+of+zygotic+genome+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Genet+Dev%22%5BJournal%5D)">The timing of zygotic genome activation.</a> Curr Opin Genet Dev. 43, 53-60 (2017).</li>
<li>Chen, H., Einstein, L. C., Little, S. C., Good, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatiotemporal+patterning+of+zygotic+genome+activation+in+a+model+vertebrate+embryo%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Cell%22%5BJournal%5D)">Spatiotemporal patterning of zygotic genome activation in a model vertebrate embryo.</a> Dev Cell. 49 (6), 852-866.e7 (2019).</li>
<li>Chen, H., Good, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nascent+transcriptome+reveals+orchestration+of+zygotic+genome+activation+in+early+embryogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">Nascent transcriptome reveals orchestration of zygotic genome activation in early embryogenesis.</a> Curr Biol. 32 (19), 4314-4324.e7 (2022).</li>
<li>Chen, H., Good, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+nascent+transcription+in+whole-mount+vertebrate+embryos+to+characterize+zygotic+genome+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Enzymol%22%5BJournal%5D)">Imaging nascent transcription in whole-mount vertebrate embryos to characterize zygotic genome activation.</a> Methods Enzymol. 638, 139-165 (2020).</li>
<li>Jao, C. Y., Salic, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exploring+RNA+transcription+and+turnover+in+vivo+by+using+click+chemistry%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Exploring RNA transcription and turnover in vivo by using click chemistry.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 105 (41), 15779-15784 (2008).</li>
<li>Chan, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brd4+and+P300+confer+transcriptional+competency+during+zygotic+genome+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Cell%22%5BJournal%5D)">Brd4 and P300 confer transcriptional competency during zygotic genome activation.</a> Dev Cell. 49 (6), 867-881.e8 (2019).</li>
<li>Adar-Levor, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytokinetic+abscission+is+part+of+the+midblastula+transition+in+early+zebrafish+embryogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Cytokinetic abscission is part of the midblastula transition in early zebrafish embryogenesis.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 118 (15), e2021210118(2021).</li>
<li>Chen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantifying+nascent+transcription+in+early+embryogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Quantifying nascent transcription in early embryogenesis.</a> Methods Mol Biol. 2923, 143-162 (2025).</li>
<li>Harland, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+situ+hybridization%3A+An+improved+whole-mount+method+for+Xenopus+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">In situ hybridization: An improved whole-mount method for Xenopus embryos.</a> Methods Cell Biol. 36, 685-695 (1991).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>16% パラホルマルデヒド(PFA)</td><td>EMS</td><td>15710-S</td><td>固定液を作るために</td></tr><tr><td>20回以上;SSC</td><td>メディアテック</td><td>MT46-020-CM</td><td>漂白液を作るために</td></tr><tr><td>3Dナテイティングミキサー</td><td>VWR</td><td>76595-802</td><td>ナチューン胚の場合</td></tr><tr><td>9mmネジ山バイアル(2 mL)</td><td>VWR</td><td>46610-722</td><td>胚の処理のために</td></tr><tr><td>抗ヒストンH3抗体</td><td>アブカム</td><td>AB1791</td><td>免疫染色のために</td></tr><tr><td>アスコルビン酸</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>A7506</td><td>クリック反応を起こすために</td></tr><tr><td>ベンジルアルコール</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>305197</td><td>胚のクリアリングのために</td></tr><tr><td>ベンジルベンゾエート</td><td>ACROSオーガニックス</td><td>105860010</td><td>胚のクリアリングのために</td></tr><tr><td>牛血清アルブミン(BSA)</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>A3059</td><td>ブロッキング解を作るために</td></tr><tr><td>9mmネジ山バイアル(2 mL)用キャップ</td><td>VWR</td><td>46610-712</td><td>胚の処理のために</td></tr><tr><td>カバーガラス(24mm&40mm)</td><td>VWR</td><td>48393-060</td><td>イメージングチャンバーの製造</td></tr><tr><td>CuSO4</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>61230</td><td>クリック反応を起こすために</td></tr><tr><td>エチレンビス(オキシエチレンニトリロ)四酢酸(EGTA)</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>AC409915000</td><td>固定液を作るために</td></tr><tr><td>フィジーイメージJ</td><td>NIH</td><td></td><td>画像処理のために</td></tr><tr><td>ホルマミド</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>AC181090010</td><td>漂白液を作るために</td></tr><tr><td>グラスパスツールピペット</td><td>VWR</td><td>14673-010</td><td>BABBの転送について</td></tr><tr><td>ヤギ抗ウサギ Alex Fluor 488 二次抗体</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>A27034</td><td>免疫染色のために</td></tr><tr><td>ヤギ血清</td><td>アブカム</td><td>AB7481</td><td>ブロッキング解を作るために</td></tr><tr><td>過酸化水素</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>H1009</td><td>漂白液を作るために</td></tr><tr><td>硫酸マグネシウム(MgSO4)</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>M65-500</td><td>固定液を作るために</td></tr><tr><td>メタノール</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>A4524</td><td>胚の脱水のために</td></tr><tr><td>メタノール、無水</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>322415</td><td>胚の脱水のために</td></tr><tr><td>MOPS</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>AC172631000</td><td>固定液を作るために</td></tr><tr><td>マルチモードのナテーティングミキサー</td><td>VWR</td><td>76595-812</td><td>ナチューン胚の場合</td></tr><tr><td>プラスチックトランスファーピペット</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>13-711-9AM</td><td>胚移植のために</td></tr><tr><td>カミソリの刃</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>18-100-970</td><td>テープを切断するために</td></tr><tr><td>RNaseフリーの水</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>BP561-1</td><td>RNASEフリー溶液の製造</td></tr><tr><td>ロトミニPLUS(ローテーター)</td><td>VWR</td><td>470313-912</td><td>輪状胚の場合</td></tr><tr><td>テトラメチルホダミン(TAMRA)-アジド</td><td>アブカム</td><td>AB146486</td><td>クリック反応を起こすために</td></tr><tr><td>TO-PRO-3</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>T3605</td><td>DNA染色のために</td></tr><tr><td>トライトン X-100</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>10789704001</td><td>洗浄バッファーの製造</td></tr><tr><td>トリズマ基地(Tris Base)</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>T1503</td><td>Trisバッファを作るために</td></tr><tr><td>VHB 3M GPH-110GFテープ(45ミル)</td><td>VWR</td><td>76524-608</td><td>イメージングチャンバーの製造</td></tr><tr><td>ツァイスLSM 700共焦点顕微鏡</td><td>ツァイス</td><td></td><td>共焦点イメージング用</td></tr></tbody></table>

初期胚の単一細胞における接合ゲノム活性化の可視化

Visualizing Zygotic Genome Activation In Single Cells of Early Embryos

Early embryogenesis requires the maternal-to-zygotic transition (MZT) that necessitates the zygotic genome activation (ZGA). During ZGA, hundreds to ...

visualizing-zygotic-genome-activation-in-single-cells-of-early-embryos

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

発生生物学

このビデオでは、我々は共焦点顕微鏡による単一細胞の解像度でのライブゼブラフィッシュの胚で開発脊椎動物の脳を分析するためにする方法を示しています。これは、我々は、単一セルのゼブラフィッシュの胚を注入し、その後、脳の発達をマウントし、イメージする方法が含まれています。...

共焦点顕微鏡によるゼブラフィッシュ胚の脳のイメージングを生きる

このプロトコルは、ゼブラフィッシュ胚の生体内で個々の神経細胞や神経堤細胞のイメージングを説明します。このメソッドは、蛍光共焦点タイムラプス顕微鏡を使用して細胞の行動とアクチンの局在を調べるために使用されます。...

細胞運動やゼブラフィッシュ胚における個々の神経細胞と神経堤細胞のアクチン細胞骨格のライブイメージング

現在のビデオは、開発ゼブラフィッシュの脳内の個々の神経前駆細胞のライブイメージングを実行するためのエレクトロポレーション、共焦点顕微鏡の組み合わせを活用する方法を示しています。...

開発ゼブラフィッシュ前脳におけるクローン関連の神経前駆細胞のタイムラプスライブイメージング

この記事では、線虫の胚発生の初期のイベントの可視化のための手法について説明...

の初期発生のタイムラプス顕微鏡線虫（Caenorhabditis elegans）

明確な遺伝的背景における個々のWT網膜前駆細胞のライブトラッキングは、神経発生時の細胞非自律的なシグナル伝達の寄与を評価することができます。ここでは、胚移植を介して、およびin vivoタイムラプス共焦点イメージングにおける遺伝子ノックダウン、キメラ世代の組み合わせは、この目的のために利用しました。...

細胞非自律影響を研究するためのキメラゼブラフィッシュ胚における個々の網膜前駆細胞におけるトランスジェニック遺伝子発現のin vivoイメージング

本稿では体外胚珠栽培手法についてシロイヌナズナ受精および胚の住セルイメージ投射を可能にします。このメソッドを利用して、受精卵の偏波の中に細胞内動態と初期胚細胞運命決定を可視化します。...

体外受精卵の Live 細胞イメージング偏光とシロイヌナズナの胚パターン形成の胚珠培養

長い波長多光子蛍光励起顕微鏡レーザーの高度な光学技術の組み合わせは、Tg (sox10:EGFP) および Tg (foxd3:GFP)...

リアルタイムで開発を可視化する多光子タイムラプス イメージング: ゼブラフィッシュ胚の神経堤細胞の可視化

C.エレガンス胚発生を解析するセミハイスループットイメージング法とデータ可視化ツールキット

ライトシート顕微鏡を使用して、無傷の絨毛膜内の初期のゼブラフィッシュ胚をイメージングするためのサンプル調製戦略について説明します。これは、70%エピボリーおよび芽の段階で胚が絨毛膜内で獲得するさまざまな向きを分析し、ライトシートシステムを使用して胚全体で細胞スケールの分解能を得るためのイメージング戦略を詳しく説明します。...

初期ゼブラフィッシュ胚のライトシート顕微鏡イメージングとマウント戦略

この論文は、原腸陥入マウス胚の単一細胞および核のシーケンシングのための高品質の単一細胞および核懸濁液のパイプラインを確立します。...

変異体全マウス胚のシングルセルRNAシーケンシング:胚盤葉上から胃腸終末まで

5-エチニルウリジン(5-EU)を用いて、ツ メガエル...

ツメガエル初期胚発生における新生転写体の代謝標識

学ぶ 初期胚の単一細胞における接合ゲノム活性化の可視化手法。Xenopus laevisを用いて5-EUによる新生RNA標識とクリック化学を組み合わせ、共焦点顕微鏡で時空間的動態を追跡する。発生生物学研究に有用です。

初期胚の単一細胞における接合ゲノム活性化の可視化

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