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<table><tbody><tr><td>0.45 micron フィルター</td><td>Sigma</td><td>S2HVU02RE</td><td></td></tr><tr><td>12k または 92k オリゴチップ</td><td>Customarray Inc. (Genscript)</td><td></td><td></td></tr><tr><td>15 cm 細胞培養プレート</td><td>Corning</td><td>CLS353004</td><td></td></tr><tr><td>293FT</td><td>Invitrogen</td><td>R70007</td><td></td></tr><tr><td>293NT</td><td>Systems Biosciences</td><td>LV900A-1</td><td></td></tr><tr><td>アルカリホスファターゼ</td><td>NEB</td><td>M0290L</td><td></td></tr><tr><td>アンプルシリン</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP1760-25</td><td></td></tr><tr><td>ATP</td><td>NEB</td><td>9804S</td><td></td></tr><tr><td>ATP</td><td>NEB</td><td>P0756S</td><td></td></tr><tr><td>Cutsmart バッファー</td><td>NEB</td><td>B6004S</td><td></td></tr><tr><td>ディープシーケンシング (Next-Seq または Hi-Seq)</td><td>Illumina</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DNAesy Blood and Tissue DNA 抽出キット</td><td>Qiagen</td><td>69506</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco&rsquo;s 改変 Eagle 培養基</td><td>Wisent</td><td>319-015-CL</td><td></td></tr><tr><td>Endura エレクトロコンピテント細胞</td><td>Lucigen</td><td>60242-1</td><td></td></tr><tr><td>EpiCult-B マウス培養基キット</td><td>Stemcell Technologies</td><td>05610</td><td></td></tr><tr><td>Esp3I</td><td>NEB</td><td>R0734L</td><td></td></tr><tr><td>胎児ウシ血清</td><td>Wisent</td><td>090-150</td><td></td></tr><tr><td>Gel DNA-クリーンアップキット</td><td>Zymo Research</td><td>D4008</td><td></td></tr><tr><td>Gene Pulser/MicroPulser 電気穿孔キュベット</td><td>BioRad</td><td>1652089</td><td></td></tr><tr><td>Gentle Collagenase/Hyaluronidase</td><td>Stemcell Technologies</td><td>7919</td><td></td></tr><tr><td>H11-Cas9</td><td>Jackson Labratories</td><td>JAX#028239</td><td></td></tr><tr><td>高速遠心機</td><td>Beckman Coulter</td><td>MLS-50</td><td></td></tr><tr><td>キムワイプ</td><td>Kimberly-Clark</td><td>34155</td><td></td></tr><tr><td>LB アガー</td><td>Wisent Technologies</td><td>800-011-LG</td><td></td></tr><tr><td>マイクロピペットプラー</td><td>Sutter Instrument</td><td>P97</td><td></td></tr><tr><td>ミニプレッププラスミドキット</td><td>Frogga Bio</td><td>PDH300</td><td></td></tr><tr><td>NEBuffer 3.1 (BsmBI バッファー)</td><td>NEB</td><td>R0580L</td><td></td></tr><tr><td>オリゴクリーンアンドコンセントレーター</td><td>Zymo Research</td><td>D4061</td><td></td></tr><tr><td>オリゴクリーンアップキット</td><td>Zymo research</td><td>D4060</td><td></td></tr><tr><td>PAGE 精製 illumina シーケンシングプライマー</td><td>IDT DNA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>PCR マイクロピペット</td><td>Drummond</td><td>5-000-1001-X10</td><td></td></tr><tr><td>PEI (ポリエチレンイミン)</td><td>Sigma</td><td>408727-100ML</td><td></td></tr><tr><td>ペニシリンとストレプトマイシン</td><td>Wisent</td><td>450-201-EL</td><td></td></tr><tr><td>pLKO-Cre</td><td>Addgene</td><td>158032</td><td></td></tr><tr><td>pMD2.G</td><td>Addgene</td><td>12259</td><td></td></tr><tr><td>ポリ-L-リジン</td><td>Sigma</td><td>P2636-100MG</td><td></td></tr><tr><td>psPAX2</td><td>Addgene</td><td>12260</td><td></td></tr><tr><td>pXPR502-PPH-Cre</td><td>Addgene</td><td>256776</td><td></td></tr><tr><td>Q5 ポリメラーゼ 2x マスターミック</td><td>NEB</td><td>M0494L</td><td></td></tr><tr><td>Qubit フローロメトリック定量</td><td>Invitrogen</td><td>Q33327</td><td></td></tr><tr><td>R26-LSL-Cas9-EGFP</td><td>Jackson Labratories</td><td>JAX#024857</td><td></td></tr><tr><td>R26-LSL-TdTomato マウス</td><td>Jackson Labratories</td><td>JAX#007909</td><td></td></tr><tr><td>SapI</td><td>NEB</td><td>R0569L</td><td></td></tr><tr><td>T4 DNA リガーゼ</td><td>NEB</td><td>M0202L</td><td></td></tr><tr><td>超遠心チューブ</td><td>Beckman Coulter</td><td>344058</td><td></td></tr><tr><td>真空フィルターユニット</td><td>Fisher Scientific</td><td>SCHVU02RE</td><td></td></tr></tbody></table>

マウス乳腺における遺伝子ノックアウトと活性化の並行 生体内 スクリーニング

Parallel In Vivo Screening of Gene Knockout and Activation in the Mouse Mammary Gland

Forward genetics screens are routinely employed to perturb thousands of genetic elements in a pooled fashion with the goal of producing large-scale ...

parallel-vivo-screening-gene-knockout-activation-mouse-mammary

Research

JoVE Journal

Genetics

遺伝学

このメソッドは、マウスから乳腺の発達と機能を細かく分析し、評価する方法について説明します。射乳がオキシトシンベースの筋上皮細胞の収縮アッセイを用いて評価される間に切除された乳腺を全部マウントを使用して開発の度合いを評価されています。...

マウスモデルにおける乳腺の発達と機能の評価

タイムラプスイメージングは​​、特定の行動のパラメータと異なる遺伝的病変の間に相関があるかどうかを判断するために乳癌リスクの遺伝子改変モデルマウス由来の初代前腫瘍性乳腺上皮細胞の挙動を評価するために使用される。...

乳がんの遺伝子改変マウスモデル由来の初代前癌乳腺上皮細胞のタイムラプスイメージング

マウス乳腺水性試薬の非侵襲管内送達のためのプロトコルが記載されている。この方法は、特に乳管を対象とした乳腺の乳首にローカライズ注入を利用しています。この技術は、siRNA、化学療法剤および小分子を含む化合物の様々な適合可能である。...

マウス乳腺に局在薬物送達のための管内注入

臨床的に関連する転移性乳癌における乳管系の結果へのアデノウイルス-Creを持つ潜在変異の活性化。 YFPプロモーターの組み込みは、遠位の転移性腫瘍細胞の追跡を可能にする。このモデルは、潜在性転移、抗腫瘍免疫、および乳癌を治療するための新規な免疫療法を設計するための研究に有用である。...

乳癌の新規トランスジェニックマウスモデル：アデノ-Creを持つ乳管上皮の標的とすることにより、転移性乳癌の開始

癌は、腫瘍の周囲の組織だけでなく、ローカルプロ - および抗炎症性メディエーターによって影響される複雑な疾患である。したがって、むしろ皮下モデルより異方性注入モデルは、方法をより良く模倣するヒト病理における癌の進行を研究するために有用であり得る。...

腫瘍増殖を研究するためにマウスの乳房脂肪パッド中に乳癌細胞の同所注入。

ここで全体のマウスの初期胚における β-ガラクトシダーゼ活性の検出のための標準プロトコルとパラフィン切片および counterstaining の方法について述べる。これはティッシュ...

全体のマウス胚における β-ガラクトシダーゼ活性の検出によって遺伝子発現をトレース

このプロトコルの目的は、マウス乳腺へのクレ発現アデノウイルスの誘導注射に基づく新しい乳癌モデリングアプローチを記述することです。このアプローチにより、細胞型と臓器特異的の両方の発生イベントを一時的に制御した方法で操作できます。...

マウス乳腺へのクレオンゲンデノウイルスの誘導注射による乳癌のモデル化

患者由来異種移植片(PDX)モデルおよび移植可能な遺伝子組み換えマウスモデルは、ヒト疾患を忠実に再現し、基礎的および翻訳的な乳癌研究のための好ましいモデルである。ここで、乳房腫瘍断片を乳腺脂肪パッドに整形移植して腫瘍生物学を研究し、薬物反応を評価する方法について説明する。...

乳癌の前臨床モデルとしての乳房腫瘍の移植性

このプロトコルは、交換可能な蓋(R.MIW)を備えた新しい乳房イメージングウィンドウを記述しています。R.MIWの移植後の生体内顕微鏡検査は、異なる発達段階の間に細胞分解能を有する健康および罹患した乳腺の縦方向および複数日のイメージングを可能にする。...

交換可能な蓋付き乳房イメージングウィンドウを使用した縦方向のバイタル内顕微鏡

本プロトコルは、授乳中のマウス乳腺の生体内イメージングのための容易な技術を、レーザー走査型共焦点顕微鏡および多光子顕微鏡法によるものとして記述している。...

乳腺の生体内細胞内顕微鏡検査

本プロトコルは、乳頭 を介した...

インビボ 乳腺内注射によるマウス乳腺上皮細胞への遺伝子導入

Mount Sinai Hospital.  本プロトコルは、マウス乳腺における並行 したin vivo 遺伝子ノックアウトおよび活性化研究を可能にするスケーラブルな管内CRISPRスクリーニングアプローチを記述しています。

マウス乳腺における遺伝子ノックアウトと活性化の並行生体内スクリーニング

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マウス乳腺における遺伝子ノックアウトと活性化の並行 生体内 スクリーニング

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