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本研究は、台湾教育省（MOE）の高等教育芽生え計画（Higher Education Sprout Project）の枠組みにおける重点研究センタープログラムを通じて、中国医学大学の癌生物学・精密治療センター（Cancer Biology and Precision Therapeutics Center, China Medical University）より支援を受けました（CBPTC-PROJ-5-2）。
資金提供および学術的支援をいただいたCancer Biology and Precision Therapeutics Centerに感謝いたします。

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著者は利益相反がないことを開示します。

信頼性と再現性のある結果を得るためには、本プロトコルのいくつかのステップが極めて重要です。第一に、PBMC分離の質と純度が、マクロファージの回収量および分化効率に直接影響します。バフィーコート界面を維持するためには、希釈した血液をFicoll密度勾配の上に慎重に層状に重ねることと、ブレーキをオフにした状態で遠心分離することが不可欠です。赤血球の溶血が不十分であるか、あるいは溶血バッファーでのインキュベーション時間が長すぎると、PBMCの生存率が低下します。第二に、 phagocytosisアッセイの前に、フローサイトメトリーによって前炎症性マクロファージへの極性を確認する必要があります。CD80の発現が上昇していないマクロファージは、食細胞能が低下している可能性があり、抗CD24抗体による効果の解釈を妨げる原因となります。第三に、がん細胞の剥離方法が重要です。酵素消化により細胞表面からCD24が切断され、抗体の結合効率が低下する恐れがあるため、トリプシン処理は避けるべきです。表面抗原の完全性を維持できるEDTAを用いた剥離法が推奨されます。
このプロトコルは、異なる実験目的に合わせ...

乳がんは世界中の女性において最も頻繁に診断される悪性腫瘍であり、年間約230万件の新規症例が発生しています1。この疾患は臨床的に不均一であり、ホルモン受容体であるエストロゲン受容体（ER）およびプロゲステロン受容体（PR）の状態と、ヒト上皮成長因子受容体2（HER2）オンコジーンの発現に基づいて、少なくとも4つの主要な分子サブタイプに分類されます2。ルミナルA型腫瘍はHER2の過剰発現を伴わずERおよび/またはPRを発現し（ER/PR+かつHER2−）、ルミナルB型腫瘍はER/PRとHER2を共発現します（ER/PR+かつHER2+）。HER2+腫瘍はホルモン受容体の状態にかかわらず高いHER2発現を特徴とし、トリプルネガティブ乳がん（TNBC）はこれら3つのマーカーすべてが欠損しています（ER−、PR−、およびHER2−）2,3。これらのサブタイプの中で、TNBCは臨床的に最も困難な形式であり、全乳がんの約15%～20%を占めています。TNBC患者は、従来の化学療法への反応が悪く、効果的な標的療法が存在しないため、最も侵襲的な疾患経過を辿り、予後が悪く、5年生存率が最も低いことが知られています3,4。さらに、TNBCは内臓転移、特に診断から5年以内の肺転移を起こす傾向が著しく高く、進行または転移性TNBC（mTNBC）患者の生存期間中央値が2年を超えることは稀です5,6。これらの統計は、TNBCに対する新しい治療戦略への切実かつ未充足のニーズを強調しています。
腫瘍微小環境（TME）は、乳がんの進行と免疫逃避において極めて重要な役割を果たしています。腫瘍関連マクロファージは、TME内で最も豊富に存在する免疫細胞の一つであり、近年、自然抗腫瘍免疫の重要な媒介者として認識されています7,8,9。従来、TAMは炎症促進的な「M1」型と腫瘍促進的な「M2」型に分類されてきましたが、この二分法的なモデルでは、マクロファージの不均一性の実態を十分に捉えることはできません。むしろ、TAMは動的な機能スペクトラムを占めており、TME内の多様な生化学的シグナルに応じて進化します。この複雑な環境において、がん細胞はさまざまな免疫逃避戦略、特に「don't eat me（私を食べるな）」シグナルの過剰発現を通じて、マクロファージの活性を積極的に妨害します。この文脈において、CD47/SIRPα軸は、最初に同定された自然免疫チェックポイントでした6,10。そして最近では、CD24が新規かつ強力な抗食作用シグナルとして浮上しています11,12。CD24は、糖鎖が豊富に付加された小型のムチン型糖タンパク質であり、グリコシルホスファチジルイノシトール結合を介して細胞膜に固定されています13。生理的条件下ではさまざまな免疫細胞系譜で発現していますが、乳がん、卵巣がん、膵がん、大腸がんを含む固形腫瘍で頻繁に過剰発現しています14。腫瘍細胞上のCD24は、マクロファージに発現している抑制性受容体であるシアリ酸結合免疫グロブリン様レクチン10（Siglec-10）と結合します。この相互作用により、Siglec-10の細胞質領域にある免疫受容体チロシンベース抑制モチーフ（ITIM）ドメインのリン酸化が誘発され、SHP-1およびSHP-2ホスファターゼが活性化されて、下流の食作用シグナルが抑制されます11。モノクローナル抗体を用いたCD24/Siglec-10相互作用の遮断は、マクロファージによるCD24発現ヒト腫瘍の食作用を強力に増強することが示されています。また、我々の最近の研究では、マウスのトリプルネガティブ乳がんモデルにおいて、乳がん細胞のCD24aをノックアウトすると、マクロファージの食作用に対する感受性が高まることが示されました9。
抗体依存性細胞貪食（ADCP）は、抗体がマクロファージに腫瘍細胞の貪食を誘導する重要なメカニズムである15,16。腫瘍発現抗原に結合すると、抗体のFc領域がマクロファージ上のFcγ受容体（FcγR）と結合し、細胞内シグナル伝達カスケードが誘発され、最終的に細胞骨格の再編成、ファゴサイトティックカップの形成、および標的細胞の取り込みに至る17。
本研究では、抗体によって誘導される乳がん細胞のマクロファージによる食作用を測定するためのタイムラプス生細胞イメージングプロトコルを開発し、検証しました。この手法では、健康なヒトドナーから得られた末梢血単核細胞（PBMC）由来のマクロファージを使用し、マクロファージコロニー刺激因子（M-CSF）で分化させた後、リポポリサッカライド（LPS）およびインターフェロンガンマ（IFN-γ）で刺激します。フローサイトメトリー分析により、刺激後のCD11b⁺集団においてCD80のアップレギュレーションが確認され（図 1）、古典的に活性化された表現型であることが裏付けられました。この活性化状態は、強力な抗体介在性食作用能を付与するため、抗体依存性細胞食作用（ADCP）の評価に適しています。GFPタグ付きCD24陽性乳がん細胞を標的細胞として用い、共培養前に治療用抗CD24モノクローナル抗体でオプソニン化します。食作用イベントは、制御された環境条件下で自動顕微鏡を用いて16時間の期間にわたって記録されます。動的な可視化と並行して定量的な評価を可能にするため、同一の共培養条件下で別のエンドポイントアッセイを行い、内部に取り込まれなかった標的細胞を除去した後に食作用の厳密な測定を行います。本プロトコルは、抗CD24抗体によって介在されるADCPを評価するための、標準化され、再現性があり、視覚的に情報量の多いプラットフォームを提供します。重要な点として、タイムラプスイメージングと補完的なエンドポイントベースの定量戦略を統合することで、食作用のキネティクス（速度論）と程度の同時評価が可能になります。この手法は、他のマクロファージ標的の免疫療法ターゲットの研究にも適応可能です。本プロトコルは、がん細胞の表面抗原に対する治療用モノクローナル抗体によって介在されるADCPの評価に最適です。また、候補抗体の比較スクリーニング、用量反応特性の解析、および「don't-eat-me」シグナルの遮断（例：CD47–SIRPα）の影響を含むFc–FcγR結合のメカニズム研究に適しています。本アッセイは一次ヒトマクロファージを使用するため、臨床開発前にドナー間の個体差を評価する必要があるトランスレーショナル研究にも適しています。
<img alt="図1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/71461/71461fig1.jpg" /> 
図1. 末梢血単核細胞から誘導し、IFN-γ/LPSで刺激したマクロファージの作製およびフローサイトメトリーによる検証。上パネル：健康なドナーから、すべての試薬を20°C ± 2°Cに予備平衡させ、Ficoll溶液を用いて20°Cで400 × g、30分間の密度勾配遠心分離により末梢血単核細胞（PBMC）を分離する。分離したPBMCを、100 ng/mLのマクロファージコロニー刺激因子（M-CSF）を添加したImmunoCult-SF培地で7日間培養し、マクロファージへの分化を誘導する（Day 0–7）。なお、Day 5に培地を補充する。Day 8に、分化したマクロファージを100 ng/mLのIFN-γおよび1 µg/mLのLPSで48時間刺激する（Day 8–10）。その後、細胞をフローサイトメトリー解析に供する。下パネル：マクロファージのフローサイトメトリー解析。細胞をCD11b-FITC、CD80-PE、およびCD206-PerCP-Cy5.5からなる表面パネルで染色し、死細胞を除外するため、データ取得前にDAPIを添加した。ゲーティング戦略：まず生細胞（DAPI⁻）をゲートし、次にCD11b-FITC対FSC-AプロットでCD11b⁺を同定してマクロファージであることを確認した。その後、生きたCD11b⁺イベントをCD80対CD206ドットプロットで解析し、IFN-γ/LPS刺激によって誘導されたCD80⁺CD206⁻集団を確認した。右：CD11b-FITC対FSC-Aの代表的なドットプロットであり、ゲートされた細胞の99.8%がCD11b⁺であり、マクロファージであることが確認されたことを示している。左：CD11b⁺細胞の大部分がCD80⁺CD206⁻ゲート（Q1: 95.2%）内にあり、適用した刺激条件下で期待される前炎症性表現型であることを示している。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/71461/71461fig1large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
本手法を適用する際は、いくつかの制約を考慮する必要があります。第一に、PBMC由来マクロファージにおけるドナー間の個体差が、食作用の結果に大きなばらつきをもたらす可能性があるため、複数のドナー（n ≥ 3）を使用し、プールした結果と併せて個々のドナーデータを報告することを推奨します。第二に、2D共培養形式は腫瘍微小環境を再現していないため、臨床的な推論を行う前に、3Dモデルまたはin vivoモデルで結果を検証する必要があります。第三に、16時間のイメージングウィンドウでは初期の食作用イベントは捉えられますが、抗原提示や二次的な免疫活性化などのより長期的なプロセスは反映されません。したがって、リアルタイムイメージングとエンドポイント定量化を組み合わせて使用することで、ADCP測定の解釈可能性と再現性の両方を高める相補的なフレームワークが得られます。

<table><tbody><tr><td>0.5 M エチレンジアミン四酢酸 (EDTA) ストック溶液</td><td>Sigma-Aldrich (または同等品)</td><td>E7889 (または同等品)</td><td>細胞剥離用の PBS 中 10 mM EDTA ワーキングソリューションの調製に使用</td></tr><tr><td>24ウェル組織培養プレート (TC処理済み)</td><td>Corning (または同等品)</td><td>3524</td><td>食細胞作用アッセイ中のマクロファージとがん細胞の共培養に使用</td></tr><tr><td>抗ヒト CD206 抗体 (フローサイトメトリー用)</td><td>BioLegend (または同等品)</td><td>321122 (または同等品)</td><td>代替マクロファージ表現型のマーカー</td></tr><tr><td>抗ヒト CD24 モノクローナル抗体</td><td>Thermo Fisher Scientific (または同等品)</td><td>MA1-91384 (または同等品)</td><td>抗体依存性食細胞作用のためのがん細胞のオプソニン化に使用</td></tr><tr><td>環境制御チャンバー付き自動ライブセルイメージングシステム (例: Lionheart FX)</td><td>Agilent Technologies (または同等品)</td><td>BioTek Lionheart FX 自動顕微鏡</td><td>制御された温度および &lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt; 条件下での長期タイムラプスイメージングを可能にする</td></tr><tr><td>自動ライブセルイメージング用イメージングソフトウェア (例: Gen5)</td><td>Agilent Technologies (または同等品)</td><td>N/A</td><td>タイムラプスイメージングデータの取得および解析に使用</td></tr><tr><td>遠心分離機 (スイングバケットローター)</td><td>Thermo Fisher Scientific (または同等品)</td><td>Multifuge X4R Pro (TX-1000 ローター) (または同等品)</td><td>PBMC 分離および細胞洗浄ステップに使用</td></tr><tr><td>&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt; インキュベーター (37&amp;deg;C, 5% &lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;)</td><td>Thermo Fisher Scientific (または同等品)</td><td>Forma Direct Heat &lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt; インキュベーター (または同等品)</td><td>細胞培養のための生理的条件を維持</td></tr><tr><td>&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt; ガス供給装置（レギュレーター付き）</td><td>Agilent Technologies (または同等品)</td><td>N/A</td><td>インキュベーターおよびイメージングシステムの環境制御用に &lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt; を供給</td></tr><tr><td>コニカルチューブ (15 mL および 50 mL)</td><td>Corning (または同等品)</td><td>352070 (または同等品)</td><td>PBMC 分離、洗浄、および遠心分離ステップに使用</td></tr><tr><td>EDTA コーティング血液採取チューブ (バキュテイナー)</td><td>BD Biosciences (または同等品)</td><td>367863 (または同等品)</td><td>ドナーからの全血サンプルの採取に使用</td></tr><tr><td>Ficoll-Paque PLUS</td><td>Cytiva (または同等品)</td><td>17144003 (または同等品)</td><td>PBMC 分離用の密度勾配培地</td></tr><tr><td>フローサイトメーター (例: FACSCanto II)</td><td>BD Biosciences (または同等品)</td><td>BD FACSCanto II&amp;nbsp;</td><td>マクロファージの表現型解析に使用</td></tr><tr><td>コンペンセーションビーズ (フローサイトメトリー用)</td><td>Biolegend (または同等品)</td><td>424602</td><td>シングルカラーコンペンセーションコントロールに使用</td></tr><tr><td>FITC 抗ヒト CD11b 抗体 (フローサイトメトリー用)</td><td>BioLegend (または同等品)</td><td>101205 (または同等品)</td><td>マクロファージの同定に使用するマーカー</td></tr><tr><td>PE 抗ヒト CD80 抗体 (フローサイトメトリー用)</td><td>BioLegend (または同等品)</td><td>375410 (または同等品)</td><td>活性化マクロファージ表現型に関連するマーカー</td></tr><tr><td>GFP 発現乳がん細胞株 (MDA-MB-468)</td><td>ATCC (または同等品)</td><td>HTB-132 (または同等品)</td><td>食細胞作用アッセイに使用する標的細胞。GFP により可視化が可能</td></tr><tr><td>ImmunoCult-SF マクロファージ培地</td><td>STEMCELL Technologies (または同等品)</td><td>10961 (または同等品)</td><td>マクロファージ分化に使用する無血清培地</td></tr><tr><td>Dulbecco&amp;rsquo;s Modified Eagle Medium (DMEM)</td><td>Thermo Fisher Scientific (または同等品)</td><td>12100046</td><td>がん細胞の培養および再懸濁に使用</td></tr><tr><td>アイソタイプコントロール抗体 (IgG)</td><td>Bio X Cell (または同等品)</td><td>BE0297 (または同等品)</td><td>抗体依存性食細胞作用アッセイの陰性コントロール</td></tr><tr><td>リポ多糖 (LPS)</td><td>Sigma-Aldrich (または同等品)</td><td>L2630 (または同等品)</td><td>IFN-&amp;gamma; と併用してマクロファージを活性化させる刺激剤</td></tr><tr><td>組換えヒトインターフェロンガンマ (IFN-&amp;gamma;)</td><td>STEMCELL Technologies (または同等品)</td><td>78020 (または同等品)</td><td>マクロファージ活性化に使用するサイトカイン</td></tr><tr><td>組換えヒトマクロファージコロニー刺激因子 (M-CSF)</td><td>STEMCELL Technologies (または同等品)</td><td>78057 (または同等品)</td><td>マクロファージ分化に使用する増殖因子</td></tr><tr><td>パステゥールピペットまたはセラロジカルピペット</td><td>Jetbiofil (または同等品)</td><td>GSP010010 (または同等品)</td><td>PBMC 分離および細胞培養中の液体操作に使用</td></tr><tr><td>PBS (Ca&lt;sup&gt;2+&lt;/sup&gt;-/Mg&lt;sup&gt;2+&lt;/sup&gt;- free)</td><td>Thermo Fisher Scientific (または同等品)</td><td>BP399-500 (または同等品)</td><td>細胞洗浄および希釈ステップに使用するバッファー</td></tr><tr><td>シャーレ (100 mm, 非&amp;ndash;組織培養処理)</td><td>Corning (または同等品)</td><td>430591</td><td>接着選択によるマクロファージ分化に使用</td></tr><tr><td>赤血球 (RBC) 溶血バッファー</td><td>BioLegend (または同等品)</td><td>420301 (または同等品)</td><td>PBMC 分離中の赤血球除去に使用</td></tr><tr><td>Viobility 405/452 Fixable Dye</td><td>Miltenyi Biotec (または同等品)</td><td>130-130-404 (または同等品)</td><td>フローサイトメトリー解析中の細胞生存率の評価に使用</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Sigma-Aldrich (または同等品)</td><td>D9542 (または同等品)</td><td>フローサイトメトリーにおける死細胞の除外に使用</td></tr></tbody></table>

緑色蛍光タンパク質標識トリプルネガティブ乳がん細胞の抗体誘導性マクロファージ食作用のタイムラプスイメージング

Time-Lapse Imaging of Antibody-Driven Macrophage Phagocytosis of Green Fluorescence Protein&#8211;Labeled Triple-Negative Breast Cancer Cells

抗体依存性細胞貪食（ADCP）は、マクロファージが抗体でオプソニン化されたがん細胞を貪食するための重要なメカニズムです。本プロトコルでは、緑色蛍光タンパク質（GFP）で標識され、CD24を発現するトリプルネガティブ乳がん細胞のマクロファージによる抗体依存性貪食を可視化するための、タイムラプス生細胞イメージング法について解説します。マクロファージはヒト末梢血単核細胞から誘導し、マクロファージコロニー刺激因子（M-CSF）で分化させ、さらにインターフェロンガンマ（IFN-γ）とリポ多糖（LPS）を用いて極性化させることで、前炎症性表現型を誘導します。がん細胞は、規定のエフェクター対ターゲット比でマクロファージと共培養する前に、抗CD24モノクローナル抗体でオプソニン化させます。貪食イベントは、生理的条件を維持するための環境制御装置を備えた自動顕微鏡を用いて、16時間にわたり記録します。イメージングは明視野および蛍光チャンネルを用いて行い、がん細胞の特定とそのマクロファージによる内部取り込みのモニタリングを可能にします。代表的なタイムラプス画像により、蛍光がん細胞が時間の経過とともに段階的に取り込まれる様子が示されます。定量的な評価を可能にするため、同一の共培養条件下で並行してエンドポイントアッセイを実施し、イメージング前に内部に取り込まれていないがん細胞を除去することで、貪食イベントの正確な測定を行います。本手法は、in vitroにおける抗体主導のマクロファージ貪食を可視化するための、標準化され再現性のあるアプローチを提供します。特に、タイムラプスイメージングとエンドポイントベースの定量化を統合することで、貪食のキネティクスと規模の両面から相補的な評価が可能になります。本プロトコルは、制御されたin vitro環境における治療用抗体およびマクロファージ標的がん免疫療法の評価を支援するものです。

PBMCからマクロファージの生成および分極が成功したことは、形態学的評価およびフローサイトメトリー分析によって確認されました（図1）。密度勾配遠心法で分離したPBMCをM-CSF補充培地で培養した結果、7日目までにマクロファージ特有の形態を持つ接着細胞が得られました。IFN-γおよびLPSによる刺激後、細胞は適用条件での活性化と一致する表現型を示しました。フローサイトメトリー分析では、ゲート内の細胞の99.8%がCD11b陽性であり、マクロファージへの効率的な分化が確認されました（図1）。CD11b陽性細胞のうち、大部分がCD80⁺CD206⁻画分に位置しており（95.2%）、指定の刺激条件下で分極が成功したことが示されました。これらの結果から、本プロトコルにより、期待されるマーカー発現プロファイルを持つマクロファージを安定して生成できることが確認されました。
タイムラプスイメージングにより、抗体依存性細胞貪食の直接的な可視化が可能となりました（<strong c...

本プロトコルでは、末梢血単核球由来マクロファージと自動顕微鏡を用い、緑色蛍光タンパク質で標識したトリプルネガティブ乳がん細胞の抗体依存性マクロファージ貪食を可視化するためのタイムラプス生細胞イメージング法について解説します。

抗体依存性細胞内食作用は、マクロファージが抗体でオプソニン化されたがん細胞を貪食する主要なメカニズムです。本プロトコルでは、...

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Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

免疫学と感染症

それゆえ、それが関与するタンパク質の空間的および時間的挙動を調べることが重要であるシグナリングを理解するために、細胞膜内や細胞内の場所にどちらかのタンパク質の棲み分けが大幅にシグナル伝達の結果に影響を与えることができる1調節機構である。ここではT細胞のシグナル伝達を研究するための全反射顕微鏡ベースのシステムを説明しますが、広く適用可能である。...

TCRとそれに関連するシグナル伝達タンパク質のリアルタイムの同時イメージングのための全反射顕微鏡法

このビデオは、マクロファージを介した独立性赤血球(RBC)食作用イベントを監視するためのアッセイを示しています。マウス免疫グロブリンG(IgG)-オプソニン化ヒト赤血球をマウスマクロファージとインキュベートし、共焦点顕微鏡で観察します。赤血球は、食細胞カップ形成を介してマクロファージに飲み込まれ、リソソーム分解の標的となります。...

IgGオプソニン化赤血球のマクロファージ食作用のリアルタイムイメージング

我々は、抗癌治療への応答のイメージングのための方法を説明...

乳癌のマウスモデルにおいて腫瘍微小環境における薬剤応答のイメージングを生きる

ここでは、接着性マクロファージ細胞株による蛍光粒子の食作用を蛍光測定法を用いて定量化するプロトコールを紹介します。この方法により、粒子の内在化とそれに伴うアクチン重合のハイスループット定量が容易になります。...

マクロファージ食作用およびアクチン重合の評価のためのハイスループット蛍光技術

このプロトコルは、単一細胞の解像度で、生体内で 、リアルタイムで多細胞相互作用の延長タイムラプスイメージングを実行するための多光子顕微鏡の使用を記載しています。...

腫瘍微小環境におけるリアルタイム多細胞ダイナミクスの拡張タイムラプス生体内イメージング

ここでは、癌転移における肺胞マクロファージの機能を研究するためのモデルとアプローチについて説明します。転移におけるこれらの細胞の役割を実証するために、クロドロン酸リポソームによる肺胞マクロファージの枯渇と併せて乳がんの同系(4T1)モデルを使用しました。...

乳がんの転移における肺胞マクロファージの役割を学びます

全反射蛍光顕微鏡を用いて、生きたマクロファージにおける前例のない高分解能のファゴソーム形成とクロージャを3次元で可視化するための実験設定について説明します。これにより、食細胞カップの基部、伸びる偽足、および食細胞の正確な部位を監視できます。...

「ファゴソーム閉鎖アッセイ」全反射蛍光顕微鏡（TIRFM）を用いて、三次元的にファゴソーム形成を可視化します

ここでイメージの単一食イベントに回転ディスク共焦点顕微鏡を用いたマウス腹腔マクロファージの方法について述べる。他の貪食細胞に、プロトコルを拡張できます。...

マウスのマクロファージによる貪食のコマ撮りの 3 D イメージング

Efferocytosis、アポトーシス細胞の貪食除去は恒常性を維持するために必要な受容体と認識、キャニスター、アポトーシス細胞の内面化を可能にするシグナル伝達経路によって促進されます。ここで、efferocytosis の定量化と efferocytic シグナル伝達経路の活性の蛍光顕微鏡のプロトコルを提案する.

単一細胞の蛍光顕微鏡による Efferocytosis の定量化

癌細胞に対するマクロファージ貪食活性、具体的には4T1マウス乳腺癌細胞を、本研究で画像化した。生細胞共培養モデルを確立し、蛍光干渉造影造影顕微鏡の組み合わせを用いて観察した。この評価は、イメージングソフトウェアを使用して画像化し、マルチポイントタイムラプスビデオを開発しました。...

M1マクロファージ-4T1マウス乳腺癌細胞における食細胞活性のタイムラプス2Dイメージング

ここでは、減衰BSL-2承認の 結核菌...

初期血管内感染中のマウス肺における減弱型自生 性結核菌 のインバイタルイメージング

National Taiwan University Hospital.  This protocol describes a time-lapse live-cell imaging method to visualize antibody-dependent macrophage phagocytosis of green fluorescent protein–labeled triple-negative breast cancer cells using peripheral blood mononuclear cell–derived macrophages and an automated microscope.

緑色蛍光タンパク質標識トリプルネガティブ乳がん細胞の抗体誘導性マクロファージ食作用のタイムラプスイメージング

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