Name: エラスチン感作および血管周囲エラスターゼを用いたマウス腹部大動脈瘤モデルの信頼性の高い作成 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-06-26T14:33:00.000+00:00
Duration: 8 min 54 s
Description: 学ぶ、エラスチン感作と血管周囲エラスターゼを用いたマウス腹部大動脈瘤モデルの作成法。C57BL/6マウスで高い再現性と生存率を達成し、疾患メカニズムと治療法の研究に有用です。

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</ol>

<table><tbody><tr><td>1 mL Tuberculin Syringes</td><td>Becton Dickinson</td><td>309628</td><td></td></tr><tr><td>10% Buffered Formalin Phosphate</td><td>Fisher Chemical</td><td>SF100-4</td><td></td></tr><tr><td>70% Isopropyl Alcohol Swabs</td><td>Cardinal Health</td><td>S-16183</td><td></td></tr><tr><td>Angled sharp forceps</td><td>Dumont</td><td>I I25 I-35</td><td></td></tr><tr><td>AutoClip 9mm (Skin stapler)</td><td>MikRon</td><td>427630</td><td></td></tr><tr><td>Betadine</td><td>Atlantis Consumer Healthcare</td><td>67618-155-16</td><td></td></tr><tr><td>Cotton gauze pad</td><td>Dynarex Corporation</td><td>3223</td><td></td></tr><tr><td>Cotton tipped applicator</td><td>Puritan Medical Products</td><td>25-806 2WC</td><td></td></tr><tr><td>Elastase from porcine pancreas (&ge;4.0 units/mg protein)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E1250</td><td>4 &deg;Cで水溶液中に保存</td></tr><tr><td>Elastase from mouse pancreas (4.75 units/mg protein)</td><td>Elastin Products Co., Inc.</td><td>MS838</td><td>4 &deg;Cで水溶液中に保存（0.1 mgを1 mLのPBSに）</td></tr><tr><td>Elastin</td><td>MP Biomedicals</td><td>101636</td><td>4 &deg;Cで水溶液中に保存</td></tr><tr><td>Enersight Desktop Software</td><td>Leica</td><td>https://www.leica-microsystems.com/products/microscope-software/p/enersight/</td><td></td></tr><tr><td>Ethiqa XR (extended release buprenorphine)</td><td>Fidelis</td><td>NDC 86084-100-30</td><td></td></tr><tr><td>Eye lubricant</td><td>OptixCare</td><td>Opx-4242</td><td></td></tr><tr><td>Flexacam i5 (Stereo)</td><td>Leica</td><td>https://www.leica-microsystems.com/products/microscope-cameras/p/12730536-leica/</td><td></td></tr><tr><td>Freund&rsquo;s complete adjuvant</td><td>MP Biomedicals</td><td>642851</td><td>4 &deg;Cで水溶液中に保存</td></tr><tr><td>Freund&rsquo;s incomplete adjuvant</td><td>MP Biomedicals</td><td>642861</td><td>4 &deg;Cで水溶液中に保存</td></tr><tr><td>Gloves (Sterile)</td><td>Encore</td><td>7824PF</td><td></td></tr><tr><td>Hypodermic Needles (23 G)</td><td>Becton Dickinson</td><td>305145</td><td></td></tr><tr><td>Hypodermic Needles (27 G)</td><td>Becton Dickinson</td><td>305109</td><td></td></tr><tr><td>Isospire (Isoflurane)</td><td>Dechra Veterinary</td><td>07-894-8943</td><td></td></tr><tr><td>Labeling Tape</td><td>Fisher Scientific</td><td>15959</td><td></td></tr><tr><td>Masks</td><td>Dukal Corp.</td><td>1540</td><td></td></tr><tr><td>Needle driver</td><td>Scanlan</td><td>6006-36</td><td></td></tr><tr><td>Omnicon F/air Anesthetic Gas Canister</td><td>A.M. Bickford Inc.</td><td>80120</td><td></td></tr><tr><td>Press'N Seal</td><td>Glad</td><td>12587704417</td><td></td></tr><tr><td>RC2 Rodent Circuit Controller</td><td>VetEquip Incorporated</td><td>922100</td><td></td></tr><tr><td>RNAlater Stabilization solution</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>AM7021</td><td></td></tr><tr><td>Scissors</td><td>Fine Science Tools</td><td>14005-12</td><td></td></tr><tr><td>Skin staples (clips)</td><td>MikRon</td><td>205016</td><td></td></tr><tr><td>Small Rodent Warmer Heater</td><td>Stoelting</td><td>53851</td><td></td></tr><tr><td>Small Rodent Warmer Stage</td><td>Stoelting</td><td>53812</td><td></td></tr><tr><td>Stereo Microscope M60</td><td>Leica</td><td>https://www.leica-microsystems.com/products/light-microscopes/stereo-microscopes/p/leica-m80/</td><td></td></tr><tr><td>Straight sharp forceps</td><td>Dumont</td><td>I I 25 I-30</td><td></td></tr><tr><td>SurgiSuite self-retaining magnetic retractor set and stage</td><td>Kent Scientific</td><td>13-005-180</td><td></td></tr><tr><td>Tahoe Portable Oxygen Concentrator</td><td>Vetland Medical</td><td>595-2300A</td><td></td></tr><tr><td>Toothed forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>11043-08, 11042-08</td><td></td></tr><tr><td>Vevo 2100 Ultrasound</td><td>FUJIFILM Visualsonics</td><td>EDU00496</td><td></td></tr><tr><td>Visorb polyglycolic acid suture</td><td>CP Medical</td><td>397A</td><td></td></tr><tr><td>VWR Absorbents</td><td>VWR</td><td>95057-860</td><td></td></tr></tbody></table>

エラスチン感作および血管周囲エラスターゼを用いたマウス腹部大動脈瘤モデルの信頼性の高い作成

Reliable Creation of a Murine Abdominal Aortic Aneurysm Model Using Elastin Sensitization and Perivascular Elastase

Degradation of the elastic lamellar matrix in the abdominal aortic wall is a histopathologic feature of abdominal aortic aneurysms (AAA). Growing evidence ...

私たちは、新しい予防療法の研究を目的として、免疫感作成分を含む大動脈瘤モデルを開発しました。これらのモデルは、死亡率の高さや大動脈拡張の不一致により、構築が困難です。私たちは、これらの合併症を抑制するためにエラスチン感作を用います。まず、手袋、保護メガネ、フェイスマスクを含む個人用保護具を着用します。タンパク質1mgあたり4.75ユニットのマウス膵エラスターゼを用意します。5mgのマウスエラスチンに168µLのエラスターゼを加えます。次に、1X PBSを200 µL、混合液に加えます。エラスターゼとエラスチンの混合液を37 °Cで20分間、時々穏やかに撹拌しながらインキュベートします。続いて、冷やしたPBSを632 µL、エラスターゼとエラスチンの混合液に加え、さらにComplete Freund's adjuvantを1 mL加えます。麻酔をかけた13週齢の雄性C57BL/6Jマウスを、37 °Cに予熱したステージ上に腹臥位で置き、鼻腔に麻酔用ノーズコーンを装着させます。調製したEDP混合液 50 µLを、マウスの両側腹部に皮下注射します。その後、タオルを敷いたリカバリーバスケットに入れ、37 °Cに加熱したステージ上に置きます。マウスが麻酔から覚めるまで観察します。初回エラスチン感作の7日後に、動脈瘤誘発手術のための手術ステーションを設置します。5.1 mg/mL の豚膵臓エラスターゼ 27 µL と PBS 73 µL を混合し、エラスターゼ作業溶液を調製します。麻酔をかけたマウスを、37°Cに加熱したステージの上に仰向けに配置します。マウスの鼻を麻酔用ノーズコーンにセットします。徐放性ブプレノルフィンを体重1kgあたり3.25mgの用量で皮下注射します。ラベリングテープを用いて後肢をステージに固定します。目に潤滑剤を塗布し、動物の足指をつまんで麻酔深度を確認します。その後、腹部の除毛を行い、手術部位を準備します。外科用メスを用いて、腹部正中に約3 cmの切開を加えます。陰茎から頭側に0.5～1 cmの位置から開始し、剣状突起から尾側に0.5 cmの位置まで切開します。有歯鉗子で皮膚を把持し、ゆっくりと上方へ牽引します。皮膚を上に引き上げたまま、はさみで白線を特定し切開します。腹腔内構造を損傷しないよう注意してください。磁気式自動開創器を配置し、腹壁および膀胱や精嚢などの尾側構造を牽引します。湿らせた綿棒を用いて、腸管を除去します。腸管を5x5 cmの湿ったガーゼで覆います。後方正中線にある下大静脈と腹部大動脈を確認します。綿棒を用いて、後方の血管構造上の組織面をそっと開き、後腹膜に進入します。次に、牽引を強め大動脈の視認性を高めるために、外側リトラクターをより深く配置します。綿棒を使用して、下大静脈を腎下腹部大動脈から分離します。この段階では、大動脈

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生物学

このビデオでは、腹部大動脈の大動脈セグメントにブタ膵臓エラスターゼの過渡腔内注入を介してマウスでは腹部大動脈瘤（AAA）を誘導する方法を示しています。モデルは、多数のトランスジェニックやノックアウトマウスの進展に伴い、AAAの病理に広範な洞察を追加する機能を持っています。...

エラスターゼによるマウス実験的腹部大動脈瘤の作成

動脈瘤のエンドグラフト除外後の組織学的および生化学的な修正は、まだ不明である。我々は、マウス動脈瘤でエンドグラフト移植の新たなモデルを記述する。永続的な循環血液ストリームインタフェース、新しい血管内生体材料の評価の有無にかかわらず血栓分析を通して、このモデルでは、より良い血管内動脈瘤の除外病理生物学を理解するのに役立ちます。...

血管内大動脈瘤の修復の新しいマウスモデル

大動脈内腔と大動脈の縫合結紮にポリウレタン製カテーテル挿入、外栄養血管の血流の低下による慢性的な低酸素症を誘発します。この記事では、人間の AAA のものと同様の特性を持つ腹部大動脈瘤 (AAA)...

外ヴァーサ栄養血管の血流をブロックすることにより腹部の大動脈瘤の齧歯動物モデルの作成

我々は、マウスにおいて一貫して堅牢な下降胸部大動脈瘤を誘導する外科的プロトコルを説明する。この手順は、左胸部切読術、胸部大動脈暴露、および大動脈壁上のブタ膵臓エラスターゼに浸したスポンジの配置を含む。...

局所エラスターゼ誘発下下胸部大動脈瘤のマウス外科モデル

本プロトコールは、マウスの腹部内大動脈の外側へのエラスターゼの直接適用によるエラスターゼ誘導AAAモデルのための標準化された外科的方法を記載する。...

エラスターゼの血管周囲適用により誘導されるマウス腹部大動脈瘤モデル

この原稿では、塩化カルシウムとエラスターゼを使用してマウス腹部大動脈瘤モデルを確立するためのプロトコルを提示し、以前のモデリング方法の利点を組み合わせています。このモデルは、腹部大動脈瘤の根底にある病態生理学的メカニズムを調査するために利用できます。...

アドベンチアル塩化カルシウムとエラスターゼ浸潤によるマウス腹部大動脈瘤モデル

このプロトコルは、エラスターゼを腎下大動脈に直接適用し、飲料水を通じてβ-アミノプロピオニトリルを投与することの組み合わせにより、マウスの進行性腹部大動脈瘤をモデル化するための系統的な外科的アプローチを説明しています。...

局所エラスターゼと経口β-アミノプロピオニトリルの組み合わせによるマウスにおける高度な腹部大動脈瘤モデリング

本プロトコルは、マウスモデルにおける頸動脈瘤を1回の外科手術による誘発のための標準化された外科的方法を説明しています。...

頸動脈瘤形成のマウスモデル

前の動脈瘤クリップの配置にし、後の動脈血流を評価するための超音波フロープローブを利用した脳動脈瘤の外科的閉塞の説明。...

術中フローアセスメントを用いた中大脳動脈瘤の顕微クリップ閉塞

このビデオでは、ステント内再狭窄の開発のpathobiologicalと病態生理学的プロセスを研究する臨床安価で信頼性の高いモデルを使用する方法を示します。 OCT（光コヒーレンス断層撮影）とOCT画像の解析を用いたin...

イメージングステント内再狭窄：安価な、信頼性、および迅速な前臨床モデル

学ぶ、エラスチン感作と血管周囲エラスターゼを用いたマウス腹部大動脈瘤モデルの作成法。C57BL/6マウスで高い再現性と生存率を達成し、疾患メカニズムと治療法の研究に有用です。

エラスチン感作および血管周囲エラスターゼを用いたマウス腹部大動脈瘤モデルの信頼性の高い作成

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