세포 호흡

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  1. 미세 호흡계를 사용한 호흡 정량화
    • 참고: 이 실험에서는 산소와의 교환 속도를 측정하여 씨앗을 발아시키기 위한 세포 호흡 속도를 측정합니다. 에너지를 제공하기 위해 산소가 소비되면 발아 씨앗은 이산화탄소를 방출합니다. 이 이산화탄소는 탄산칼륨에 흡수되므로 호흡계의 전체 기체압이 감소합니다. 가설: 실험 가설은 발아하는 씨앗이 유리 구슬을 대조하는 것보다 더 빠른 호흡 속도를 보일 것이라는 것입니다. 또한 더 높은 온도에서는 씨앗의 세포 호흡 속도가 증가합니다. 귀무 가설은 유리 구슬과 발아 씨앗 모두 비슷한 세포 호흡 속도를 나타내고 온도가 호흡에 영향을 미치지 않는다는 것입니다.
    • 제어를 설정하려면 먼저 준비된 미세 호흡계에서 플런저를 제거하고 제어실 온도 또는 가열 처리에 따라 각각 "CR" 또는 "CH"로 레이블을 지정합니다.
    • 각 미세 호흡계에 유리 마이크로비즈를 최대 0.5mL 표시까지 추가하고 주사기의 플런저를 1mL 표시까지 밉니다.
    • 각 미세 호흡계의 나팔 모양에 3-4개의 와셔를 놓고 수조에 있는 동안 무게를 잰다. 알림: 미세 호흡계는 모세관 끝에 위치합니다.
    • 제어 장치를 옆으로 설정합니다.
    • 실험용 장착형 호흡계를 설정하려면 준비된 미세 호흡계에서 플런저를 제거하고 실험용 실내 온도 또는 가열 처리에 따라 각각 "ER" 또는 "EH"로 표시합니다.
    • 미세 호흡계의 투베르쿨린 주사기에 발아 씨앗 0.5mL를 측정합니다.
    • 그런 다음 주사기를 1mL 표시까지 밉니다.
    • 각 미세 호흡계의 나팔 모양에 3-4개의 와셔를 놓고 수조에 있는 동안 무게를 줄입니다.
    • 미세 호흡계를 사용하려면 "CR" 및 "ER" 미세 호흡계를 실온 수조에 조심스럽게 누르십시오. 주사기 전체는 물에 잠겨야 하지만 모세관 튜브는 완전히 노출되어야 합니다. 이 위치에 도달할 때까지 수조에서 물을 제거하십시오. 모세혈관의 상단이 열려 있는지 확인하십시오.
    • "CH" 및 "EH" 미세 호흡계에 대해 동일한 절차(9단계)를 수행하여 더 높은 온도의 실험 그룹을 설정합니다.
    • 미세 호흡계의 온도가 수조와 같아질 때까지 5분 동안 기다립니다.
    • 미세 호흡계 챔버를 밀봉하는 4개의 모세관 각각의 상단에 압력계 유체를 한 방울 떨어뜨립니다. 알림: 챔버가 제대로 작동하면 압력계 유체가 모세관 챔버로 빨려 들어갑니다.
    • 욕조에 설정된 플런저를 사용하여 압력계 유체를 모세관으로 빨아 넣습니다. 유체가 모세혈관 아래로 약 절반 정도 내려가면 정지합니다. 중요 : 미세 호흡계는 욕조에 넣은 후 방해해서는 안 됩니다. 챔버가 밀봉되고 이퀄라이징된 후에는 테이블을 부딪히거나 수조에 물건을 넣거나 제거하지 마십시오.
    • 챔버에 더 가까운 압력계 유체의 하단 가장자리를 표시하십시오. 이는 시점 0을 나타냅니다.
    • 5 분 후에 타이머가 울리도록 설정하십시오.
    • 5분 후 각 미세 호흡계의 압력계 유체에 있는 위치에 새 표시를 만듭니다. 25분이 지날 때까지 또는 압력계 유체가 모세관 전체 길이를 이동할 때까지 5분마다 반복합니다.
    • 그런 다음 수조에서 호흡계를 제거하십시오.
    • 각 마크 사이의 거리를 측정하고 정확한 시점 옆의 표 1에 기록합니다. 표 1을 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오.
    • 청소하는 동안 압력계는 재사용하거나 쓰레기통에 버리기 위해 분해해야합니다.
  2. Expand
    • 수집한 데이터를 분석하려면 먼저 x축을 시간으로 하고 y축을 압력계가 이동한 거리로 하여 산소 소비량을 나타내는 데이터 포인트를 플로팅합니다.
    • 이 방정식을 사용하여 각 선의 기울기를 계산합니다.
    • 표 2의 각 미호흡계에 대해 이 값을 기록합니다. 참고: 이 값은 실험 과정에서 발생한 세포 호흡의 양을 나타냅니다. 표 2를 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오.
    • 호흡수를 막대 그래프로 표시합니다.
    • 두 그래프를 모두 검사합니다. 결과가 가설과 어떻게 일치하는지 고려합니다. 대조군 구슬과 발아 씨앗 사이의 호흡수에서 관찰된 차이를 주목하십시오. 온도 상승이 호흡수에 영향을 미쳤는지 확인합니다.

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