3.13: Introduction to Enzyme Kinetics(효소 반응속도학 소개)

Introduction to Enzyme Kinetics
JoVE Core
Cell Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Core Cell Biology
Introduction to Enzyme Kinetics
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

20,137 Views

01:19 min
April 30, 2023

Overview

효소 반응 속도학은 생화학 반응의 속도를 연구합니다. 과학자들은 다양한 기질 농도에서 특정 효소 반응에 대한 반응 속도를 모니터링합니다. 반응 속도에 영향을 미치는 억제제 또는 다른 분자에 대한 추가 시험도 수행될 수 있습니다.

그런 다음 실험자는 기질 농도([S])에 대해 주어진 시험의 초기 반응 속도 또는 속도(V, o)를 플롯하여 반응 특성의 그래프를 얻을 수 있습니다. 단일 기질과 관련된 많은 효소 반응의 경우 이 데이터는 Leonor Michaelis와 Maud Menten이 유도한 방정식인 Michaelis-Menten 방정식에 적합합니다.

Eq1

이 방정식은 연구 중인 효소에 대한 최대 속도(Vmax)와 Michaelis 상수(KM)를 추정하며 다음 가정을 기반으로 합니다.

  1. 반응 시작 시 생성물이 존재하지 않습니다.
  2. 효소-기질 복합체(enzyme-substrate complex)의 형성 속도는 산물로의 해리 및 분해 속도와 같습니다.
  3. 효소 농도는 기질 농도에 비해 최소화됩니다.
  4. 초기 반응 속도만 측정됩니다.
  5. 효소는 자유 형태 또는 효소-기질 복합체에 존재합니다.

Lineweaver-Burke, Eadie-Hofsteot 및 Hanes-Woolf 플롯과 같은 Michaelis-Menten 방정식의 다양한 재배열은 운동 매개변수를 그래프로 표시하는 또 다른 방법입니다. Lineweaver-Burke 또는 이중 역수 플롯은 KM Vmax를 추정하는 데 자주 사용됩니다. 이 플롯은 Michaelis-Menten 플롯에서 x축과 y축의 역수 값을 사용합니다. 수학적으로 y절편은 최대 1/V이고 x절편은 -1/KM입니다.

Lineweaver-Burke 플롯은 억제제 유형(경쟁적, 비경쟁적, 비경쟁적)을 시각적으로 구별하는 데 사용할 수 있습니다. Eadie-Hofstee 및 Hanes-Woolf 플롯과 같은 Michaelis-Menten 방정식의 다양한 재배열도 운동 매개변수를 결정하는 데 사용됩니다.

Transcript

효소 반응속도론은 효소 촉매 반응의 속도를 연구합니다. 다양한 기질 농도에서 반복되는 실험의 속도는 시간이 지남에 따라 소비된 기질 또는 형성된 제품의 농도를 측정하여 모니터링됩니다.

이러한 결과는 기질 농도가 반응 속도 또는 속도에 어떻게 영향을 미치는지 보여주기 위해 그래프로 표시할 수 있습니다.

반응 속도는 낮은 농도에서 기질의 양이 증가함에 따라 선형적으로 증가하지만 더 높은 농도에서는 안정되기 시작합니다. 속도는 최대 속도 또는 Vmax에 접근합니다 – 효소가 기질로 완전히 포화되는 속도입니다.

효소 친화도는 효소가 기질에 얼마나 강하게 또는 약하게 결합하는지를 측정하고 Michaelis 상수인 KM으로 정량화합니다. KM의 가치는 비율이 Vmax의 50%일 때 기질 농도와 동등합니다.

작은 KM은 효소가 높은 기질 친화도를 갖는다는 것을 나타내며 그 반대의 경우도 마찬가지입니다. KM이 더 큰 효소는 KM이 더 낮은 효소에 비해 최대 속도에 접근하기 위해 더 높은 기질 농도가 필요합니다.

Key Terms and definitions​

Learning Objectives

Questions that this video will help you answer

This video is also useful for